Redox status expressed as GSH:GSSG ratio as a marker for oxidative stress in paediatric tumour patients

doi:10.3892/ol.2012.931

.2012年12月；4(6):1247-1253.

doi:10.3892/ol.2012.931。 Epub 2012年9月21日。

以GSH:GSSG比值表示的氧化还原状态是儿童肿瘤患者氧化应激的标志

昂德雷·齐特卡¹, 西尔维·斯卡利科娃, 杰罗米尔·古穆列克, 米查尔·马萨里克, Vojtech亚当, Jaromir Hubalek先生, 利布斯·特伦科娃, 贾米拉·克鲁塞奥娃, 托马斯·埃克施拉格, 雷内·基泽克

附属公司

PMID： 23205122
预防性维修识别码：项目经理3506742
DOI（操作界面）： 10.3892/ol.2012.931

以GSH:GSSG比值表示的氧化还原状态是儿童肿瘤患者氧化应激的标志

昂德雷·齐特卡等。 Oncol Lett公司. 2012年12月.

.2012年12月；4（6）：1247-1253。

doi:10.3892/ol20129.31。 Epub 2012年9月21日。

作者

附属

¹布尔诺孟德尔大学农学系化学和生物化学系，布尔诺61300；

PMID： 23205122
预防性维修识别码：项目经理3506742
DOI（操作界面）： 10.3892/ol.2012.931

摘要

氧化应激引起各种生物结构的深刻改变，包括细胞膜、脂质、蛋白质和核酸，并与许多恶性肿瘤有关。还原型谷胱甘肽（GSH）被认为是活性氧（ROS）最重要的清除剂之一，其与氧化谷胱甘苷（GSSG）的比值可以作为氧化应激的标志。本研究的主要目的是确定儿科癌症患者血清中的GSH:GSSG比率，以将此比率用作氧化应激的潜在标记。对整个过程进行了优化，在优化条件下，两种物质的回收率均大于80%。我们分析了一组患有各种类型癌症的儿科患者（n=116），包括神经母细胞瘤、间变性室管膜瘤、生殖细胞瘤、生殖道肿瘤、淋巴结病、横纹肌肉瘤、肾母细胞瘤、尤因肉瘤、骨肉瘤、霍奇金淋巴瘤、髓母细胞瘤和视网膜母细胞瘤。我们同时测定了还原和氧化谷胱甘肽的水平，从而测定了其在患者血清中的比例。视网膜母细胞瘤患者的比率最高，间变性室管膜瘤的比率最低。我们能够根据获得的GSH:GSSG比值的结果来区分诊断。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
γ-谷氨酰循环方案，根据特定步骤合成谷胱甘肽。（A） γ-谷氨酰转肽酶、（B）γ-谷胺酰环转移酶、（C）氧丙烷酶、（D）肽酶，（E）γ-GCS、（F）谷胱甘肽合成酶和随后的GSH清除自由基和自我转化为GSSG。GSSG，氧化葡硫酮。GSH，还原型谷胱甘肽；γ-GCS，谷氨酰半胱氨酸合成酶。

**图2。**
（A） GSH的HDV（50μM）和GSSG（25μM）。（B） GSH和GSSG在0.2–100范围内的典型HPL色谱图叠加μM、用于绘制（C）校准曲线。流动相的实验条件为：A，80 mM TFA；和B，100%甲醇。化合物的洗脱遵循递增的线性梯度：0-1分钟（3%B）、1-2分钟（10%B）、2-5分钟（30%B）和15-16分钟（98%B）。流动相流速为1 ml/min，电极电位为900 mV。GSH、还原型谷胱甘肽、GSSG、氧化葡萄糖硫酮。HDV，水动力伏安图；HPL，高性能液体；TFA，三氟乙酸。

**图3。**
（A）不同浓度的磷酸盐缓冲液对谷胱甘肽（50μM）隔离。（B） 5%TFA和1 mM TCEP对GSH:GSSG比率的影响。相同浓度的谷胱甘肽（50μg/ml）和GSSG（5μg/ml）。GSH、还原型谷胱甘肽、GSSG、氧化葡萄糖硫酮；TFA，三氟乙酸；TCEP、三（2-羧乙基）膦。

**图4。**
（A） GSH（50）标准混合物的HPL色谱图叠加μM）和GSSG（25μM）和真实的血清样本。（B） GSH:GSSG在以下疾病患者中的比率：神经母细胞瘤（n=27，RSD=43.9%）、肾母细胞瘤，霍奇金淋巴瘤（n=16，RSD=24.9%）、淋巴结病（n=3，RSD:22.1%）、髓母细胞瘤（n=15，RSD=39.8%）、横纹肌肉瘤（n=4，RSD=18.4%）或视网膜母细胞瘤。GSH、还原型谷胱甘肽、GSSG、氧化葡萄糖硫酮。HPL，高性能液体；RSD，相对标准偏差。

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