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.2012年8月;144(2):221-33.
doi:10.1530/REP-12-0025。 Epub 2012年5月31日。

反刍动物卵巢卵泡-黄体转变相关miRNAs的鉴定

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反刍动物卵巢卵泡-黄体转变相关miRNAs的鉴定

D麦克布莱德等。 繁殖. 2012年8月.

摘要

关于微小RNA(miRNA)参与卵泡-黄体过渡的情况知之甚少。本研究的目的是确定绵羊卵泡分化相关miRNAs的全基因组变化。miRNA文库是从绵羊发情周期特定阶段采集的样本中产生的,代表健康生长的卵泡(直径4.0-5.5 mm)、排卵前卵泡(6.0-7.0 mm)、早期黄体(发情后第3天)和晚期黄体(第9天)。通过对这些文库进行测序,共鉴定出绵羊或其他物种中的189个miRNAs和另外23个新的miRNA。miR-21、miR-125b、let-7a和let-7b是最丰富的miRNAs,占所有测序miRNA的40%。通过对发育过程中克隆频率变化的检查,确定了9种不同的miRNAs,它们的表达随着卵泡-黄体转变而降低,8种miRNAs的表达在这个转变过程中增加。northern分析证实了表达谱,并使用miRTarBase识别了实验验证的靶点。所鉴定的29个靶标中的大多数代表了已知在体内积极参与调节卵泡分化的基因。最后,体外卵泡细胞的黄体化导致miRNA水平的变化,与体内确定的miRNA水平一致,这些变化与颗粒细胞中假定的miRNA靶水平的变化暂时相关。总之,这是首次对卵泡和黄体发育不同阶段全基因组miRNA图谱进行表征的研究。我们的数据确定了一组miRNAs,它们可能是卵泡-黄体转变的重要调节因子。

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