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.2011年3月;60(3):819-26.
doi:10.2337/db10-0864。 Epub 2011年1月31日。

巨噬细胞诱导的C型凝集素在肥胖小鼠和人类脂肪组织中的表达增加

附属公司

巨噬细胞诱导的C型凝集素在肥胖小鼠和人类脂肪组织中的表达增加

Masayuki Ichioka先生等。 糖尿病. 2011年3月.

摘要

目标:我们提供的证据表明,通过巨噬细胞诱导的脂肪细胞脂解从脂肪细胞中释放的饱和脂肪酸作为巨噬细胞中Toll-like受体(TLR)4复合物的天然配体,从而加重肥胖诱导的脂肪组织炎症。本研究的目的是确定肥胖患者脂肪组织巨噬细胞中激活的分子。

研究设计和方法:我们对3T3-L1脂肪细胞和RAW264巨噬细胞的共培养进行了cDNA微阵列分析。利用培养的脂肪细胞和巨噬细胞以及肥胖小鼠和人类的脂肪组织来检测mRNA和蛋白质的表达。

结果:我们发现,巨噬细胞诱导的C型凝集素(Mincle;也称为Clec4e和Clecsf9)是一种II型跨膜C型凝集素,在脂肪细胞和巨噬细胞相互作用期间在巨噬细胞中选择性诱导。棕榈酸是3T3-L1脂肪细胞释放的主要饱和脂肪酸,用棕榈酸处理至少部分通过TLR4/核因子(NF)-κB途径诱导巨噬细胞中Mincle mRNA的表达。在肥胖小鼠和人类的脂肪组织中,Mincle mRNA表达与巨噬细胞标记物平行增加。与对照C3H/HeN小鼠相比,在TLR4信号缺陷的C3H/HeJ小鼠中,肥胖诱导的Mincle mRNA表达增加显著减弱。值得注意的是,Mincle mRNA在骨髓细胞(BMC)衍生的促炎性M1巨噬细胞中表达,而不是在体外BMC衍生的抗炎性M2巨噬细胞中。

结论:我们的数据表明,肥胖症患者脂肪组织巨噬细胞中Mincle至少部分通过饱和脂肪酸/TLR4/NF-κB途径诱导,从而表明其在肥胖诱导的脂肪组织炎症中的病理生理作用。

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数字

图1。
图1。
的标识Mincle公司在3T3-L1脂肪细胞和RAW264巨噬细胞的共培养中,作为靶基因上调。A类:由3T3-L1脂肪细胞和RAW264巨噬细胞组成的接触共培养系统的图示。B:RAW264和3T3-L1中Mincle mRNA的表达。C:共培养对Mincle mRNA表达的影响。n个= 4. *P(P)<0.05**P(P)< 0.01.
图2。
图2。
棕榈酸酯对培养巨噬细胞Mincle表达的影响。A类——C:棕榈酸(Pal)和油酸(Ole)对Mincle mRNA的影响(A类)和蛋白质(BC)RAW264巨噬细胞表达。典型的Western印迹(B)和定量相对蛋白表达(C)Mincle的。D类:棕榈酸(200μmol/L)和LPS(10 ng/mL)刺激由TLR4信号缺陷的C3H/HeJ(■,HeJ)小鼠和对照C3H/HeN(□,HeN)小鼠制备的腹腔巨噬细胞中Mincle mRNA表达。E类:BAY11-7085(BAY;一种NF-κB抑制剂)对RAW264巨噬细胞中棕榈酸诱导的Mincle mRNA表达的影响。F类:棕榈酸酯对SR-IκBα-(IκB的主要负向形式)和模拟过表达RAW264(分别为SR-I kb B和mock)巨噬细胞Mincle mRNA表达的影响。G公司:C3H/HeJ和C3H/HeN小鼠的3T3-L1脂肪细胞和腹腔巨噬细胞共培养对Mincle mRNA表达的影响。H(H):BAY(1μmol/L)对共培养诱导的Mincle mRNA表达的影响。共同文化;控制文化;车辆,车辆。n个= 3–4. *P(P)<0.05**P(P)与每个对照组相比<0.01#P(P)< 0.05; ##P(P)< 0.01.
图3。
图3。
小鼠脂肪组织中Mincle mRNA的表达。A类:小窝的组织分布(顶部),M1巨噬细胞标志物CD11c(中间的)和巨噬细胞标志物F4/80(底部)野生型(WT)小鼠中的mRNA(□)和对象/对象小鼠(■)*P(P)<0.05**P(P)与相应的野生型小鼠相比,<0.01。B饮食诱导肥胖小鼠脂肪组织中Mincle mRNA的表达**P(P)与标准差相比<0.01。C:野生型小鼠(WT)成熟脂肪细胞(Adipo)和基质血管分数(SVF)中Mincle mRNA的表达对象/对象老鼠(对象).n个= 4–6. **P(P)<0.01 vs.每个脂肪细胞#P(P)< 0.05.
图4。
图4。
TLR4在肥胖诱导小鼠脂肪组织Mincle mRNA表达中的作用。Mincle公司(A类)和CD11c(B)喂食SD或HFD的C3H/HeN和C3H/HeJ小鼠脂肪组织中的mRNA表达。n个= 4. **P(P)与每个SD相比<0.01#P(P)< 0.05.
图5:。
图5:。
体外M1和M2巨噬细胞中Mincle mRNA的表达。M1标记物(TNF-α和诱导型一氧化氮合酶[iNOS])的mRNA表达(A类)、M2标记物(精氨酸酶1和甘露糖受体)(B)和Mincle(C)在BMC衍生的巨噬细胞中。M1、M1与100 ng/mL LPS和20 ng/mL IFN-γ的极化;M2、M2极化,IL-4浓度为10 ng/mL。n个= 4. **P(P)<0.01 vs.未治疗##P(P)< 0.01.
图6。
图6。
人类脂肪组织中Mincle mRNA的表达。A类:非肥胖(BMI<25 kg/m)皮下脂肪组织中Mincle、CD11c和CD68的mRNA表达2,n个=12)和肥胖(BMI≥25 kg/m2,n个=11)受试者。B:脂肪Mincle mRNA表达与BMI之间相关性的线性回归分析**P(P)< 0.01.
图7。
图7。
人循环单核细胞中Mincle mRNA的表达。非肥胖(BMI<25 kg/m)患者循环CD14-阳性细胞或单核细胞中Mincle、TNF-α、IL-6和IL-10的mRNA表达2,n个=25)和肥胖(BMI≥25 kg/m2,n个=25)受试者*P(P)<0.05**P(P)< 0.01.

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引用人

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