跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2010年11月；67(22):3883-92.
doi:10.1007/s00018-010-0410-y。 Epub 2010年6月8日。

白细胞介素-33刺激人CD14（+）单核细胞形成功能性破骨细胞

Se Hwan门 1, Na Young Ko公司, Hyuk Soon Kim（金孝顺）, 杰万金, Do Kyun Kim先生, A-Ram金, 李承宪（Seung Hyun Lee）, 金永吉（Yong-Gil Kim）, 李昌根（Chang Keun Lee）, Seoung Hoon Lee先生, Bo Kyung Kim先生, 迈克尔·A·比文, 年轻的Mi Kim, Wahn Soo Choi先生
附属公司

白细胞介素-33刺激人CD14（+）单核细胞形成功能性破骨细胞

Se Hwan门等。 细胞分子生命科学. 2010年11月.

摘要

白细胞介素（IL）-33是一种最近被描述的促炎细胞因子。在这里，我们证明IL-33是来自人类CD14（+）单核细胞的功能性破骨细胞（OCs）的调节器。IL-33刺激单核细胞形成抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）（+）多核OCs。这种作用被抗ST2抗体抑制，表明IL-33通过其受体ST2发挥作用，而不是通过NF-κB配体（RANKL）诱饵、骨保护素或抗RANKL抗体的受体激活剂发挥作用。IL-33刺激了对OC发育至关重要的单核细胞信号分子的活化磷酸化。其中包括Syk、磷脂酶Cγ2、Gab2、MAP激酶、TAK-1和NF-κB。IL-33还增强OC分化因子的表达，包括TNF-α受体相关因子6（TRAF6）、活化T细胞胞浆核因子1、c-Fos、c-Src、组织蛋白酶K和降钙素受体。IL-33最终诱导骨吸收。本研究表明，IL-33的破骨特性是通过TRAF6以及人类CD14（+）单核细胞中基于酪氨酸的免疫受体激活基依赖性Syk/PLCγ途径介导的。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
IL-33诱导人CD14培养物中OCs的形成+单核细胞。一等量的从人CD14获得的全细胞裂解物+单核细胞（hCD14+)用SDS-PAGE分离小鼠骨髓源性巨噬细胞（mBMM）、Jurkat T细胞和RBL-2H3肥大细胞，并用抗ST2抗体进行Western-blot分析。b条为了测量ST2 mRNA的表达，分离出总RNA，并在人CD14中表达ST2的mRNA+使用“材料和方法”中描述的特异性引物，通过RT-PCR分析单核细胞或mBMM。c（c）隔离的CD14+单核细胞用抗ST2抗体或等型匹配的对照抗体孵育，然后用FITC-偶联的大鼠抗羊抗体染色。细胞通过FACSCalibur流式细胞仪进行分析。d日,电子人血CD14+单核细胞在M-CSF（10 ng/ml）存在下培养，并接受以下处理。d日单用M-CSF培养20天后，细胞固定并染色TRAP(面板a)或M-CSF与20 ng/ml sRANKL联合使用(面板b)，50 ng/ml IL-33(面板c)或IL-33和5μg/ml抗ST2抗体(面板d).电子陷阱+在用M-CSF培养1、2或3周后，单独或与sRANKL（20 ng/ml）或指定浓度的IL-33联合培养，计数多核细胞（每个细胞3个或更多核）。一–d日显示了至少三个独立实验的代表性图像。值是三个独立实验值的平均值±SEM*对<0.05和**对<0.01表明与M-CSF单独治疗的相应值存在显著差异
图2
图2
sRANKL可增强IL-33诱导的OC分化，并可通过抗ST2抗体的治疗而非OPG或抗RANKL抗体的治疗来阻断。一人CD14+单核细胞在指定浓度的IL-33或sRANKL和10 ng/ml M-CSF中单独或联合培养20天。b条单核细胞在M-CSF（10 ng/ml）中培养20天，单独或与sRANKL（20 ng/ml）或IL-33（50 ng/ml）联合培养20天。此外，如图所示，一些培养物含有OPG（0.25μg/ml）、抗RANKL抗体（1μg/ml。一,b条多核TRAP+对OCs进行计数，所示值为三个独立实验值的平均值±SEM*对<0.05和**对 < 0.01
图3
图3
IL-33激活CD14中的信号分子+与OC分化相关的单核细胞。一–c（c）人CD14+单核细胞与10 ng/ml M-CSF和50 ng/ml IL-33共同孵育，孵育时间为指定时间或c（c）在最佳磷酸化时。从全细胞裂解物制备免疫印迹，并用针对指定蛋白质或其磷酸化同源物的抗体进行检测。显示了三个独立实验的代表性免疫印迹图像。b条如“材料和方法”所述，EMSA同样刺激单核细胞检测NF-κB的DNA结合。d日CD14号机组+单核细胞在10 ng/ml M-CSF和50 ng/ml IL-33存在下培养20天，含或不含抑制剂：Bay11-7082(海湾)，SB203580(某人)，SP600125(服务提供商)，皮塞塔诺(照片)，或U73122(7号机组)然后对细胞进行TRAP染色。陷阱+对多核细胞（每个细胞三个或更多核）进行计数，数值为三个独立实验值的平均值±SEM*对<0.05和**对<0.01表明与不使用抑制剂的M-CSF+IL-33治疗的值存在显著差异
图4
图4
IL-33刺激成熟OC标志物的表达。人CD14+单核细胞在10 ng/ml M-CSF存在下培养，单独或与50 ng/ml IL-33或20 ng/ml sRANKL联合培养，培养天数记录(一)或20天(b条,d日). 从全细胞裂解物制备免疫印迹，并用针对指定蛋白质的抗体进行检测。显示了具有代表性的图像(一,b条,d日)和频带密度（仅M-CSF的倍数增加）(c（c）)从三个独立实验中得出的值表示为平均值±SEM*对<0.05和**对<0.01表明与单独使用M-CSF治疗的值存在显著差异。CTR公司降钙素受体
图5
图5
IL-33通过独立于RANKL/RANK的ST2受体诱导骨吸收。人CD14+单核细胞在M-CSF（10 ng/ml）的骨科磁盘上培养20天，加入不同浓度的IL-33，或20 ng/ml sRANKL（含或不含抗RANKL（1μg/ml）、抗ST2抗体（5μg/ml。按照“材料和方法”中的描述去除细胞后，用显微镜检查吸收陷窝。一从三个独立的实验中显示了具有代表性的图像。b条吸收陷窝面积的百分比（即一)量化并表示为三个独立实验的平均±SEM值*对<0.05和**对<0.01表明与M-CSF单独治疗的值有显著差异
请参阅PMC中的此图片和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“引用者”文章

工具书类

    1. McInnes IB，Schett G.细胞因子在类风湿关节炎发病机制中的作用。Nat Rev免疫学。2007;7:429–442. doi:10.1038/nri2094。-内政部-公共医学
    1. Takayanagi H.骨免疫和免疫系统对骨骼的影响。国家风湿病研究所。2009;5:667–676. doi:10.1038/nrrheum.2009.217。-内政部-公共医学
    1. Udagawa N、Takahashi N、Akatsu T、Tanaka H、Sasaki T、Nishihara T、Koga T、Martin TJ、Suda T。破骨细胞的起源：成熟单核细胞和巨噬细胞能够在骨髓基质细胞制备的合适微环境下分化为破骨细胞。美国国家科学院院刊，1990年；87:7260–7264. doi:10.1073/pnas.87.18.7260。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Massey HM，Flanagan AM。人破骨细胞来源于CD14阳性单核细胞。英国血液学杂志。1999;106:167–170. doi:10.1046/j.1365-2141.1999.01491.x。-内政部-公共医学
    1. Shalhoub V、Elliott G、Chiu L、Manoukian R、Kelley M、Hawkins N、Davy E、Shimamoto G、Beck J、Kaufman SA。人类血液中破骨细胞前体的表征。英国血液学杂志。2000;111:501–512. doi:10.1046/j.1365-2141.2000.02379.x。-内政部-公共医学

出版物类型