跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2008年5月；19(5):2051-8.
doi:10.1091/mbc.e07-09-0930。 Epub 2008年3月5日。

三维胶原基质中胶原纤维流动和组织移位与成纤维细胞迁移耦合

米格尔·米隆·门多萨 1, 约阿希姆·西曼, 弗雷德里克·格林奈尔
附属公司

三维胶原基质中胶原纤维流动和组织移位与成纤维细胞迁移耦合

米格尔·米隆·门多萨等。 分子生物学细胞. 2008年5月.

摘要

在嵌套的胶原基质中，人成纤维细胞从含细胞的真皮等效物迁移到周围的无细胞外基质中。时间推移显微镜显示，除了细胞迁移外，胶原原纤维在外基质中向与真皮等效物的界面流动。这种流动的特征表明，它依赖于通常导致细胞迁移的细胞运动机制。胶原纤维流动能够产生大规模组织移位，如漂浮嵌套胶原基质中成对真皮等效物之间约1 mm的间隙闭合所示。我们的发现表明，当成纤维细胞与胶原基质相互作用时，细胞施加的牵引力可以耦合到基质移位和细胞迁移。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
嵌套矩阵中的细胞迁移。（A） 嵌套胶原蛋白基质图。（B） 嵌套胶原蛋白基质的扫描图像显示真皮等效物（致密内部区域）被外部胶原蛋白基质包围（更透明的区域）。（C） 延时显微镜视频中显示的嵌套胶原蛋白基质（6小时真皮当量）的时间代表性图像，聚焦于真皮当量（较暗区域）和周围胶原蛋白基质之间的界面（较亮区域）。棒材，130μm。
图2。
图2。
嵌套基质中的细胞迁移和胶原移位。（A） 嵌套胶原蛋白基质（6小时真皮当量）的延时显微镜视频（Sup_1.mov）显示了时间的代表性图像，显示单个细胞从真皮当量迁移到外基质。通过注意基质变形的位置（用星号标记）可以了解胶原蛋白移位向皮肤等效物的界面移动。棒材，25μm。（B） 胶原移位和细胞迁移的比较。显示胶原移位（圆圈）和细胞迁移（正方形）速度变化（间隔1小时测量位移）的三个单独电影的平均±SD。对于每部电影，通过测量界面上的3个点、外基质中的10个点和六个细胞的末端来确定速度。当细胞首次出现在外基质中时，测量的距离是从细胞的末端到界面的距离。针对接口的移动纠正了数据。
图3。
图3。
嵌套基质中的胶原移位。（A） 延时视频（Sup_2.mov）开头和结尾的代表性图像，其中用48小时收缩的皮肤等效物制备嵌套胶原蛋白基质，在外基质中含有3-μm聚苯乙烯珠（稀释为1:1000），以帮助可视化胶原蛋白基质流动。（B） 通过测量10个不同珠子（任意选择）在1h间隔内的位移（平均±SD），量化外基质中胶原向真皮等效物的移动。针对接口的移动纠正了数据。棒材，130μm。
图4。
图4。
肌球蛋白II和Rho激酶对细胞迁移和胶原移位的依赖性。（A） 用22h收缩的皮肤等效物制备嵌套胶原蛋白基质，并在含有PDGF和10μM Rho激酶抑制剂Y-27632或20μM肌球蛋白II抑制剂blebbistatin的培养基中培养20h。随后固定细胞并用PI染色。棒材，100μm。（B） 所示细胞迁移指数值是两个单独实验中重复样品的平均值±SD。（C） 显示胶原移位速度变化（间隔1小时测量位移）的两张单独电影的平均±SD。对于每部电影，通过测量外基质中的10个点和界面上的3个点来确定速度。针对接口的移动纠正了数据。
图5。
图5。
浮动与约束嵌套矩阵中的细胞迁移。（A） 将嵌套胶原基质（24小时皮肤等效物）培养24小时，然后用PI染色细胞。棒材，100μm。（B） 所示细胞迁移指数值为三个单独实验中重复样品的平均值±SD。
图6。
图6。
细胞在漂浮和抑制的成对嵌套胶原基质中的迁移。（A） 用19h真皮等效物制备的成对嵌套胶原蛋白基质在含有50 ng/ml PDGF的培养基中孵育35 h，如图所示，抑制在培养皿上或漂浮在培养基中。在孵育结束时，固定细胞并用PI染色以观察细胞核。（B） 不同区域的细胞迁移指数值（边缘与间隙）是每个样品两个单独实验和七个微观场的平均值±SD。棒材，60μm。
图7。
图7。
浮动嵌套基质中的胶原基质重组。在外基质（1:200）中用6-μm荧光微球制备嵌套胶原蛋白基质，并在培养皿上限制培养24小时或在培养基中漂浮培养24小时，如图所示。在孵育结束时，细胞被固定并用Alexa Fluor 594阴茎倍体蛋白染色。采集图像时，首先聚焦于界面或外基质细胞的肌动蛋白染色，然后在不改变焦点的情况下切换到荧光珠。嵌套基质聚合后（0 h），珠子立即均匀分布在外基质中。24 h后，观察到细胞迁移，但在真皮等效界面上没有珠子积聚。在浮动嵌套基质中，未观察到细胞迁移，但在界面处出现珠状堆积。棒材，100μm。
图8。
图8。
用成对嵌套胶原蛋白基质封闭缝隙。（A） 延时显微镜视频（Sup_4.mov）中显示的漂浮成对嵌套胶原蛋白基质（19h皮肤等效物）时间的代表性图像。在35小时内，观察到张力线的形成、细胞向缝隙区域迁移以及缝隙闭合。（B） 延时显微镜视频（Sup_5.mov）中显示的漂浮成对嵌套胶原蛋白基质（48小时真皮等效物）时间的代表性图像。在45小时内，细胞很少迁移到缝隙区域，但真皮等效物之间的缝隙完全闭合。棒材，130μm。（C） 配对嵌套胶原蛋白基质（皮肤等效物收缩24小时）的扫描图像，在含有50 ng/ml PDGF、10μM LPA、10%FBS或不添加生长因子（BSA）的培养基中培养，并在规定的限制和浮动条件下培养。只有在含有PDGF的悬浮介质的条件下，缝隙才会闭合。棒材，3 mm。
图9。
图9。
细胞牵引、迁移和胶原移位。如果胶原蛋白基质能够抵抗细胞的牵引力，那么细胞就可以移动。如果基质无法抵抗细胞的牵引力，那么基质就会移动。有关其他详细信息，请参阅文本。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“引用者”文章

工具书类

    1. Abe M.，Ho C.H.，Kamm K.E.，Grinnell F.不同的分子马达介导血小板衍生生长因子和溶血磷脂酸刺激的浮动胶原基质收缩。生物学杂志。化学。2003;278:47707–47712.-公共医学
    1. Abercrombie M.、James D.W.、Newcombe J.F.通过夹板固定伤口边缘研究兔子皮肤的伤口收缩。J.阿纳特。1960;94:170–182.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Ahlfors J.E.，Billiar K.L.《人类成纤维细胞生产和重塑基质的生物力学和生物化学特征》。生物材料。2007;28:2183–2191.-公共医学
    1. Balaban N.Q.等人，《力和焦点粘附装配：使用弹性微图形基板研究的密切关系》。自然细胞生物学。2001;3:466–472.-公共医学
    1. Barocas V.H.，Moon A.G.，Tranquillo R.T.细胞牵引力的成纤维细胞聚集胶原微球测定第2部分，细胞牵引参数的测量。J.生物技术。工程1995；117:161–170.-公共医学

出版物类型