Small interference RNA against PTP-1B reduces hypoxia/reoxygenation induced apoptosis of rat cardiomyocytes

doi:10.1007/s10495-008-0181-1

.2008年3月；13(3):383-93.

doi:10.1007/s10495-008-0181-1。

PTP-1B小干扰RNA减少缺氧/复氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡

宋慧文¹, 张志勇, 王林（Lin Wang）

附属公司

PMID： 18278556
内政部： 2007年10月10日/10495-008-0181-1

PTP-1B小干扰RNA减少缺氧/复氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡

宋慧文等。细胞凋亡. 2008年3月.

.2008年3月；13(3):383-93.

doi:10.1007/s10495-008-0181-1。

作者

宋慧文¹, 张志勇, 王林（Lin Wang）

附属

¹华中科技大学同济医学院同济医院心内科，武汉430030。

PMID： 18278556
内政部： 2007年10月10日/10495-008-0181-1

摘要

目标：目的研究抗PTP-1B的siRNA对缺氧再氧（H/R）诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的影响及其分子机制。

方法：分离的新生大鼠和成年大鼠心肌细胞在PTP-1B siRNA转染后培养24小时，缺氧2、4和6小时后再复氧6小时（h/R）。TUNEL染色检测各组诱导的心肌细胞凋亡。用Western blot检测PTP-1B和磷酸化Akt水平，用比色试剂盒测定caspase-3和caspase-8的活性，用免疫共沉淀法检测PTP-2B与FasR的结合量。分别用普通药理学磷酸酶阻滞剂原钒酸钠和PI3-激酶/Akt通路抑制剂LY294002抑制PTP-1B和Akt活性。

结果：H/R导致培养大鼠心肌细胞严重损伤，PTP-1B表达上调。然而，与未经siRNA处理的细胞相比，抗PTP-1B的siRNA显著降低了4H/6R诱导的心肌细胞凋亡数量（凋亡指数：12.1+/-1.4%vs.23.2+/-1.6%，P<0.05），同时Akt磷酸化程度更高，caspase-3和8活性降低，PTP-1B与FasR的相关性更低。钒酸盐和LY294002也部分降低了4H/6R诱导的心肌细胞凋亡。

结论：PTP-1B是H/R诱导心肌细胞凋亡的关键调节因子，针对PTP-1B的siRNA可有效保护心肌细胞免受H/R损伤，其机制可能与Akt活化、caspase-3和caspase-8活性降低以及与FasR结合量降低有关。

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