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.2006年1月;130(1):58-65.
doi:10.1016/j.jss.2005.07.030。 Epub 2005年9月8日。

核因子-kappaB通过转录激活Fas/FasL介导Kupffer细胞凋亡

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核因子-kappaB通过转录激活Fas/FasL介导Kupffer细胞凋亡

彭燕华等。 外科研究杂志. 2006年1月.

摘要

简介:核因子(NF)-κB是细胞生存、炎症和应激反应的关键转录因子。我们证明Kupffer细胞衍生FasL在胰岛诱导的肝细胞损伤中起着核心作用。本研究的目的是确定NF-kappaB在模拟急性胰腺炎时调节Kupffer细胞死亡配体/受体通路的作用。

材料和方法:用弹性蛋白酶(1 U/L)处理大鼠Kupffer细胞的组织培养物,以模拟AdIkappaB感染前后的胰腺炎,从而阻断NF-kappaB的激活。测定肿瘤坏死因子(酶联免疫分析)、Fas/FasL和caspase-3(Western)、肿瘤坏死因子和Fas/Fas L mRNA(逆转录聚合酶链反应)以及NF-kappaB DNA结合(电泳迁移分析)。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP-生物素镍标记(TUNEL)和DNA片段化检测细胞凋亡。凝胶通过密度计进行定量。数据(n=3)为平均值+/-SEM;采用学生t检验进行统计分析。

结果:AdIkappaB感染上调突变的Ikappa Balpha,保持其与NF-kappaB.的结合特性。启动子报告分析表明FasL基因启动子受NF-kappaB调控。AdIkappaB感染可减弱弹性蛋白酶诱导的Fas/FasL上调(与弹性蛋白酶相比均P<0.01)和NF-κB DNA结合,但不影响弹性蛋白酶诱发的TNF上调。AdIkappaB减弱了弹性蛋白酶诱导的胱天蛋白酶-3的切割、DNA断裂和TUNEL染色(与弹性蛋白酶相比均P<0.01)。

结论:抑制NF-κB DNA结合下调Fas/FasL并减弱弹性蛋白酶诱导的细胞凋亡;然而,它对TNF的产生没有影响,提示Fas/FasL和TNF的调节可能通过不同的途径发生。Kupffer细胞通过上调其死亡配体/受体和凋亡来自动调节其应激反应的能力值得进一步研究。

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