跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2005年10月；6(10):936-41.
doi:10.1038/sj.embor.7400503。

p75神经营养素受体减少配体诱导的Trk受体泛素化并延缓Trk受体的内化和降解

乔·P·S·马克尔 1, 克莱尔·塞尼, 丹尼尔·S·奥尔德, 弗朗索瓦·瓦兰库尔, 吉纳维夫·多瓦尔, 菲利普·A·巴克
附属公司

p75神经营养素受体减少配体诱导的Trk受体泛素化并延缓Trk受体的内化和降解

乔·P·S·马克尔等。 EMBO代表. 2005年10月.

摘要

靶向源性神经营养素通过与细胞表面酪氨酸激酶受体的相互作用调节神经元的存活和生长。p75神经营养素受体（p75 NTR）与长程投射神经元中的Trk受体共表达，促进神经营养素与Trk结合并增强Trk活性。这里，我们表明TrkA和TrkB受体经历了强大的配体依赖性泛素化，这依赖于受体内源性Trk活性的激活。p75 NTR的共表达减弱了TrkA和TrkB的泛素化，并延迟了神经生长因子诱导的TrkA受体内化和受体降解。这些结果表明，p75 NTR可能通过负调控受体泛素化来延长细胞表面Trk依赖的信号事件。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
用脑源性神经营养因子（BDNF）处理小鼠皮层神经元可诱导TrkB泛素化。(A类)如图所示，用50 ng/ml BDNF处理小鼠皮层神经元5-90分钟，并对TrkB进行免疫沉淀和免疫印迹，以检测总泛素和磷酸酪氨酸（pTyr）含量。(B类)如图所示，在不含或含200 ng/ml K252A的情况下，用BDNF或神经生长因子（NGF）处理皮层神经元5或15分钟，并对TrkB进行免疫沉淀和分析。(C类)用BDNF（50 ng/ml）处理皮层神经元5-90分钟，TrkB被免疫沉淀。分别使用4G10、P4D1、FK1和抗TrkB（RTB）抗体通过免疫印迹分析免疫沉淀物的磷酸酪氨酸、总泛素和多泛素含量以及TrkB水平。中的实验(A类–C类)每个人都做了三次，结果都一样。
图2
图2
神经生长因子（NGF）在PC12细胞中诱导适度的TrkA泛素化。(A类)如图所示，用50 ng/ml NGF处理PC12细胞5–90分钟，对TrkA进行免疫沉淀，并通过免疫印迹法分析总泛素和磷酸酪氨酸（pTyr）含量以及TrkA水平。NSR，非特异性兔血清。(B类)用50 ng/ml NGF处理PC12细胞5–90 min，并免疫沉淀TrkA。如图所示，通过免疫印迹法分析免疫沉淀物的多泛素含量（使用FK1抗体）、磷酸酪氨酸含量和TrkA水平。(C类)如图所示，在不含或含有200 ng/ml K252A的情况下，用NGF处理PC12细胞5分钟，对TrkA进行免疫沉淀，并通过免疫印迹分析磷酸酪氨酸、总泛素和TrkA。中的实验(A、 B类)每个实验进行了三次(C类)进行了两次，结果完全相同。
图3
图3
p75神经营养素受体（p75NTR）抑制配体诱导的Trk受体泛素化。(A类)在存在和不存在编码p75NTR的表达质粒的情况下，用编码TrkA和Myc标记的泛素（Myc–Ubq）的表达质粒转染人胚胎肾293细胞。转染后2天，用神经生长因子（NGF；50 ng/ml）处理细胞5或90 min，然后在苛刻的变性条件下进行裂解。使用针对Myc表位的抗体对泛素化蛋白进行免疫沉淀（IP），并使用针对TrkA和p75NTR的抗体在免疫印迹上进行分析。TrkA和p75NTR的裂解物水平显示在下部面板中。(B类)按照(A类)随后使用抗TrkA抗体（203）或兔抗体对照（Ig）进行免疫沉淀。分别使用P4D1和FK1抗体进行总泛素和多泛素含量的免疫印迹。(C类)实验按如下所示进行(A类)，但编码TrkA的表达质粒被TrkB表达质粒替换，细胞被50 ng/ml脑源性神经营养因子（BDNF）处理5分钟。TrkB和p75NTR的裂解物水平如下图所示。(D类)实验按如下进行(A类)除了编码p75NTR的表达质粒被编码缺乏富含半胱氨酸结构域2-4的p75NTR-Tr突变形式的表达质粒所取代外，细胞仅用50 ng/ml NGF处理5分钟。对酪氨酸，磷酸酪氨酸。(E类)PC1275千磅用NGF（50 ng/ml）处理细胞株和对照PC12细胞株（稳定转染绿色荧光蛋白（GFP）并保存在G418中）5–90 min，并免疫沉淀TrkA。如图所示，通过免疫印迹分析免疫沉淀物的TrkA水平以及总泛素和磷酸酪氨酸含量。两行中的p75NTR级别显示在下部面板中。绿色荧光蛋白；RNA干扰。中的实验(A–F)每个人都做了三次，结果都一样。
图4
图4
p75NTR抑制配体诱导的酪氨酸激酶（Trk）受体泛素化。(A类)用编码TrkA和p75神经营养素受体（p75NTR）的表达质粒转染人胚胎肾293细胞，2天后在37°C下暴露于神经生长因子（NGF；50 ng/ml）2–15分钟，如图所示。然后在4°C下对细胞表面蛋白进行生物素化，使用链霉亲和素珠从裂解细胞中沉淀生物素化蛋白，并通过免疫印迹法测定TrkA水平和TrkA磷酸酪氨酸（pTyr）含量。TrkA和p75NTR的裂解物水平显示在下部面板中。SA PD，链霉亲和素普洛特。(B类)PC1275千磅将品系和对照PC12品系在4°C下生物素化，暴露于50 ng/ml NGF，然后在37°C下培养指定的时间。用链霉亲和素包衣珠从裂解细胞中回收生物素化蛋白，并用RTA免疫印迹法测定沉淀物中的TrkA水平。p75NTR和Erk的裂解物水平显示在下部面板中。绿色荧光蛋白；RNA干扰。(C类)中所示数据的量化(B类)从密度测定法确定的三个独立实验中，汇总并通过单向方差分析进行显著性分析。*P（P）<0.05. 中的实验(A类)进行了三次，结果都相同。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

  • TrkA信号增强会损害基本的前脑依赖行为。
    Calvo-Enrique L、Lisa S、Vicente-Garcia C、Deogracias R、Arévalo JC。 Calvo-Enrique L等人。 前摩尔神经科学。2023年9月22日；16:1266983。doi:10.3389/fnmol.2023.1266983。eCollection 2023年。 前摩尔神经科学。2023 PMID：37808473 免费PMC文章。
  • TrkA共受体：TrkA的Janus脸？
    Trouvilliez S、Lagadec C、Toillon RA。 Trouvilliez S等人。 癌症（巴塞尔）。2023年3月23日；15(7):1943. doi:10.3390/cancers15071943。 癌症（巴塞尔）。2023 PMID：37046604 免费PMC文章。 审查。
  • 神经营养素在创伤性脑损伤中的作用。
    Lin PH、Kuo LT、Luh HT。 Lin PH等人。 人寿保险（巴塞尔）。2021年12月24日；12(1):26. doi:10.3390/life12010026。 人寿保险（巴塞尔）。2021 PMID：35054419 免费PMC文章。 审查。
  • 神经营养素作为细胞代谢的关键调节器：胆固醇平衡的意义。
    Colardo M、Martella N、Pensabene D、Siteni S、Di Bartolomeo S、Pallottini V、Segatto M。 Colardo M等人。 国际分子科学杂志。2021年5月26日；22(11):5692. doi:10.3390/ijms22115692。 国际分子科学杂志。2021 PMID：34073639 免费PMC文章。 审查。
  • 体感神经元的发育：对疼痛和瘙痒的洞察。
    Cranfill SL、Luo W。 Cranfill SL等人。 当前最高开发生物。2021;142:443-475. doi:10.1016/bs.ctdb.2020.10.005。Epub 2020年11月5日。 当前最高开发生物。2021 PMID：33706924 免费PMC文章。 审查。
查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Berg MM、Sternberg DW、Parada LF、Chao MV（1992）K252a抑制神经生长因子诱导的trk原癌基因酪氨酸磷酸化和激酶活性。生物化学杂志267:13–16-公共医学
    1. Bhakar AL、Howell JL、Paul CE、Salehi AH、Becker EB、Said F、Bonni A、Barker PA（2003）p75NTR过度表达诱导的细胞凋亡需要Bad的Jun激酶依赖性磷酸化。神经科学杂志23:11373-11381-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Bronfman FC、Tcherpakov M、Jovin TM、Fainzilber M（2003）配体诱导的p75神经营养素受体内化：信号内体的缓慢途径。神经科学杂志23:3209-3220-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Delcroix JD、Valletta JS、Wu C、Hunt SJ、Kowal AS、Mobley WC（2003）感觉神经元中的NGF信号：早期内体携带NGF逆行信号的证据。神经元39:69–84-公共医学
    1. Di Fiore PP，De Camilli P（2001），细胞内吞和信号传导。不可分割的伙伴关系。单元格106:1-4-公共医学

出版物类型