Association of ABCA1 with syntaxin 13 and flotillin-1 and enhanced phagocytosis in tangier cells

doi:10.1091/mbc.e04-03-0182

.2004年12月；15(12):5399-407.

doi:10.1091/mbc.e04-03-0182。 Epub 2004年10月6日。

ABCA1与syntaxin 13和flotillin-1的结合及增强丹吉尔细胞的吞噬作用

萨利姆·马·巴里德¹, 克里斯塔·布埃克勒, 阿尔弗雷德·博彻, 拉妮娅·达尤布, 亚历山大·西格鲁纳, 玛格特·格兰德, 克里斯蒂安·鲁道夫, 阿什拉夫·达达, 格德·施密茨

附属公司

PMID： 15469992
预防性维修识别码： PMC532019
内政部： 10.1091/mbc.e04-03-0182

ABCA1与syntaxin 13和flotillin-1的结合及增强丹吉尔细胞的吞噬作用

萨利姆·马·巴里德等。分子生物学细胞. 2004年12月.

.2004年12月；15(12):5399-407.

doi:10.1091/mbc.e04-03-0182。 Epub 2004年10月6日。

作者

萨利姆·马·巴里德¹, 克里斯塔·布埃克勒, 阿尔弗雷德·博彻, 拉妮娅·达尤布, 亚历山大·西格鲁纳, 玛戈特·格兰德, 克里斯蒂安·鲁道夫, 阿什拉夫·达达, 格德·施密茨

附属

¹德国雷根斯堡大学临床化学和实验医学研究所，邮编：93040。

PMID： 15469992
预防性维修识别码： PMC532019
内政部： 10.1091/mbc.e04-03-0182

摘要

ATP-结合盒转运蛋白A1（ABCA1）促进细胞向载脂蛋白A-I（apoA-I）释放胆固醇和胆碱磷脂，多项研究表明，小泡转运与ABCA1功能相关。突触蛋白在囊泡融合中起主要作用，并已被证明与ABC转运蛋白家族成员相互作用。因此，我们专注于鉴定与ABCA1直接相互作用的突触蛋白。研究了M-CSF分化和胆固醇负荷期间培养的人单核细胞中syntaxin和ABCA1的表达，发现syntaxins 3、6和13与ABCA1一起在泡沫细胞中被诱导。免疫沉淀实验显示突触蛋白13与全长ABCA1直接相关，而突触蛋白3和6与ABCA1没有相互作用。免疫荧光显微镜也显示ABCA1和syntaxin 13的共定位。小干扰RNA（siRNA）沉默突触蛋白13导致ABCA1蛋白水平降低，从而显著减少apoA-I依赖性胆碱磷脂流出。ABCA1定位于巨噬细胞中的Lubrol WX-不溶性筏微域中，在这些抗洗涤剂微域中也检测到syntaxin 13和flotillin-1以及ABCA1。Syntaxin 13、flotillin-1和ABCA1被鉴定为吞噬体蛋白，表明吞噬体室参与ABCA1介导的脂质流出。此外，与对照细胞相比，突变ABCA1的成纤维细胞对乳胶吞噬珠的摄取增强，功能性ABCA1重组表达使丹吉尔成纤维细胞的吞噬率正常化。结论是ABCA1与突触蛋白13和flotillin-1形成复合物，位于质膜和吞噬体中，部分位于筏微区。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
原代人单核细胞和巨噬细胞中syntaxin表达的分析。研究了单核细胞、M-CSF分化的巨噬细胞、用40μg/ml ELDL孵育24 h的巨噬细胞和随后用100μg/ml HDL处理的E-LDL负载细胞中syntaxin 2、3、4、6、7、8和13的表达_三使用免疫印迹进行额外的24小时。E-LDL诱导了Syntaxin 3、6和13，E-LDL下调了Syntasin 2和8的表达，而E-LDL不调节Syntaxin4和7。β-actin作为负荷对照。

**图2。**
免疫沉淀法证明ABCA1与突触蛋白13的相互作用。（A）从4-d分化的巨噬细胞和负载E-LDL的细胞制备的细胞裂解液中沉淀的syntaxin 13免疫印迹与对照组（第1和第2道）和ABCA1抗体（第3和第4道）。（B） ABCA1的免疫印迹用来自4-d分化巨噬细胞和E-LDL负载细胞制备的细胞裂解物的结合蛋白13抗体沉淀。

**图3。**
Syntaxin 13与ABCA1共定位。用4%多聚甲醛和0.02%戊二醛固定人巨噬细胞（A–C）和PMA分化的HL-60细胞（D–F），并用syntaxin 13（小鼠）和ABCA1（兔）的一级抗体进行免疫染色然后与德克萨斯红标记的抗兔和FITC-标记的抗鼠二级抗体孵育，并进行免疫荧光显微镜检查。ABCA1（A和D）、syntaxin 13（B和E）；合并图像（C和F）。黄色：重叠区域。棒材，10μm。

**图4。**
siRNA-处理的HL-60细胞中突触蛋白13和胆碱磷脂流出的沉默。（A）以非沉默siRNA转染或syntaxin 13 siRNA转导的PMA分化HL-60细胞和PMA分化的HL-60细胞核为对照进行分析。分离蛋白，通过免疫印迹分析syntaxin 13和ABCA1的表达。（B）在PMA分化的HL-60细胞、以非沉默siRNA转染的PMA-分化的HL60细胞或以syntaxin 13 siRNA转导的HL-60-细胞中测定了胆碱磷脂外排_三-与三个独立实验中的非特异性外排有关的介导性脂质外排以百分比表示。使用以下公式计算突触蛋白13沉默细胞和对照细胞之间流出减少的显著性t吨测试；^*p<0.05。

**图5。**
ABCA1相互作用蛋白的噬菌体定位。（A）从4天分化的巨噬细胞中纯化吞噬体，用乳胶珠培养2、4、6、12和20小时。纯化的吞噬体蛋白用于免疫印迹。分析ABCA1、syntaxin 13、syntasin 4、flotillin-1、Rab 9和LAMP1的表达。（B）用吞噬体蛋白组分（6 h）中的syntaxin 13抗体沉淀ABCA1，用ABCA1沉淀syntaxin13。对照兔抗体作为阴性对照。（C）以功能性、重组ABCA1或lacZ为对照，用荧光素黄绿色微球孵育4h后，用流式细胞术测定成纤维细胞的吞噬活性。与正常成纤维细胞相比，Tangier的吞噬作用增加，与lacZ转染的成纤维细胞相比较，ABCA1转染的Tangier的吞噬活性降低，两者都具有统计学意义（p<0.05）。TD1、3和5：从丹吉尔病患者中获得的成纤维细胞，其ABCA1基因已记录突变，如*材料和方法。*Ctrl1、2和3：从健康对照个体获得的成纤维细胞。

**图6。**
ABCA1-associated proteins的微区定位及ABCA1与flotillin-1的关联。（A）负载E-LDL的巨噬细胞在1%Lubrol WX或Triton X-100中溶解，并通过蔗糖梯度离心分离。用ABCA1、syntaxin 13、syntasin 4、syntassin 7和flotillin-1进行免疫印迹。分数2-5表示木筏，而车道6-8与木筏无关。第8组分代表可溶性膜蛋白，P是不溶性颗粒。（B）从4-d分化的巨噬细胞制备的细胞裂解物中，用对照和ABCA1抗体沉淀的flotillin-1的免疫印迹。

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[6] Bojanovski，D.、Gregg，R.E.、Zech，L.A.、Meng，M.S.、Bishop，C.、Ronan，R.和Brewer，H.B.Jr.（1987年）。丹吉尔病中载脂蛋白原A-I的体内代谢。临床杂志。投资。80, 1742-1747.-项目管理咨询公司-公共医学

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[9] Buechler，C.、Bared，S.M.、Aslanidis，C.、Ritter，M.、Drobnik，W.和Schmitz，G.（2002a）。ATP-结合盒转运体A1与Fas相关死亡域蛋白的分子和功能相互作用。生物学杂志。化学。277, 41307-41310.-公共医学

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