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.2004年4月30日;279(18):18353-60.
doi:10.1074/jbc。M308160200。 Epub 2004年2月16日。

精氨酸琥珀酸合成酶的表达是维持主动脉内皮细胞一氧化氮生成和细胞存活所必需的

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精氨酸琥珀酸合成酶的表达是维持主动脉内皮细胞一氧化氮生成和细胞存活所必需的

邦妮·L·古德温等。 生物化学杂志. .
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摘要

虽然细胞内精氨酸水平大大超过内皮型一氧化氮合酶的表观K(m),但目前的证据表明,这种精氨酸的大部分可能无法用于一氧化氮(NO)的生成。我们认为精氨酸再生,即瓜氨酸再循环回精氨酸,是精氨酸产生NO的基本来源。为了支持这一提议,RNA干扰分析被用于选择性降低精氨酸琥珀酸合成酶(AS)的表达,因为AS在内皮细胞中唯一已知的代谢作用是从l-瓜氨酸再生l-精氨酸。Western blot分析表明,尽管培养基中精氨酸水平饱和,但由于AS小干扰RNA处理导致产生基础或刺激水平NO的能力相应降低,AS蛋白显著减少,且呈剂量依赖性。然而,未预料到的是,与对照细胞相比,AS小干扰RNA处理的内皮细胞的活性显著降低。台盼蓝排除分析表明,存活能力的丧失不是因为坏死。Bcl-2表达减少和caspase活性增加这两个指标与AS表达减少直接相关,表明生存能力的丧失是因为凋亡。细胞接触NO供体可阻止与AS表达降低相关的凋亡。总的来说,这些结果证明了AS对内皮细胞NO生成和细胞活力的重要作用。

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