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.2002年4月1日;195(7):953-8.
doi:10.1084/jem.20020045。

小鼠浆细胞样树突状细胞前体的发育受FLT3-ligand和粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子的差异调节

附属公司

小鼠浆细胞样树突状细胞前体的发育受FLT3-ligand和粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子的差异调节

米歇尔·吉列特等。 实验医学杂志. .

摘要

最近在小鼠中发现了浆细胞样前体细胞或1型干扰素(IFN)产生细胞(IPC)。虽然已经建立了产生不同鼠树突状细胞亚群的培养系统,但鼠浆细胞样IPC的发育调控以及导致其产生的培养条件仍然未知。在这里,我们表明,从含有FLT3-ligand的小鼠骨髓培养物中可以生成大量超过40%的纯CD11c(+)CD11b(-)B220(+)Gr-1(+)IPCs。相比之下,促进CD11c(+)CD11b(+)B220(-)髓样DC生成的GM-CSF或TNF-α完全阻断了IPC的发展。生成的IPC显示出与人类IPC相似的特征,例如浆细胞形态,对单纯疱疹病毒产生大量IFN-α的能力,以及对Toll样受体9配体(TLR-9;CpG ODN 1668)的反应能力,但对TLR-4配体(脂多糖[LPS])没有反应能力。与产生少量IL-12p70的人类IPCs不同,小鼠IPCs在对CpG ODN 1668和单纯疱疹病毒的反应中产生IL-12p70。本研究表明,FLT3-ligand和粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子对小鼠CD11c(+)CD11b(-)B220(+)Gr-1(+)IPCs和CD11c。人类IPC和小鼠IPC产生IL-12p70的能力不同。现在可以从全骨髓培养中获得大量小鼠IPC。

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数字

图1。
图1。
(A) CD3的百分比+,CD19+,DX5型+,GR1/CD11c和CD11c+流式细胞术分析细胞。在培养的前5天,B细胞(CD19)迅速丢失+)、T细胞(CD3+),NK细胞(DX5+)和粒细胞(GR1+CD11c公司)观察到。然而,CD11c的百分比急剧增加+细胞。(B) 在第0天、第5天、第10天、第15天和第20天从补充FLT3和BM培养物中获得的总细胞数。在细胞培养的第5天出现了初始细胞丢失。然而,细胞数量在第10天恢复,之后减少。表示为三个独立实验的平均值±SD。
图2。
图2。
CD11c的生成+CD11b型第220页+IPC和CD11c+CD11b型+第220页来自FLT3和补充BM细胞培养物的髓样DC。三色荧光流式细胞术分析显示CD11c+CD11b型细胞在用FTL3配体(A)培养前占总BM细胞的1%,在第5天占16%,在第10天占45%,在第15天占21%。CD11c+CD11b型细胞表现出小鼠IPC的典型表型,即B2202+CD45RB2+Ly6c型2+等级-12+CD80型CD86型MHC II级低的(B) ●●●●。CD11c+CD11b型+培养前细胞占总BM细胞的0.2%,用FTL3-ligand(A)培养第5天时占13%,第10天时占32%,第15天时占49%。CD11c+CD11b型+细胞表现出与脾髓样树突状细胞相似的表型,即B220CD45RB+赖氨酸6c+等级-1+-CD80型+CD86型+MHC II级高的(B) ●●●●。所示数据代表了六个实验。
图3。
图3。
CD11c产生细胞因子+CD11b型第220页+IPC和CD11c+CD11b型+第220页含有培养基、LPS、CpG ODN 1668和HSV的培养物中的髓系DC。每个实心圆代表一个单独的供体。ELISA检测每种细胞因子的敏感性:IFN-α(<12.5 pg/ml)、TNF-α(<25 pg/ml。
图4。
图4。
GM-CSF和TNF-α促进CD11c的生成+CD11b型+第220页髓样树突状细胞并抑制FLT3-ligand介导的CD11c生成+CD11b型第220页+IPC。将新鲜分离的BM细胞与FLT3-ligand、GM-CSF或FLT3-legand+GM-CSF、FLT3-lig+TNF-α或GM-CSF+TNF--α培养10天。三种颜色的荧光流式细胞术分析表明CD11c+CD11b型第220页+IPC(42%)和CD11c+CD11b型+第220页如图2所示,骨髓培养第10天用FLT3-ligand生成髓样DC(30%)。添加TNF-α导致CD11c降低+CD11b型第220页+IPC从42%增至6%,CD11c增加+CD11b型+第220页髓样树突状细胞从30%到60%。添加GM-CSF导致完全阻断CD11c的生成+CD11b型第220页+IPCs和CD11c的增加+CD11b型+第220页髓样树突状细胞占30%至80%。在含有GM-CSF或GM-CSF+TNF-α的BM培养物中,只有CD11c+CD11b型+第220页髓系DC,但不是CD11c+CD11b型第220页+生成了IPC。所示数据代表了三个实验。

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