大鼠肝癌-人成纤维细胞杂交细胞系WIF-B9稳定地表现出正常分化肝细胞的结构和功能特征。研究了这些细胞合成胆汁酸并将其与甘氨酸和牛磺酸酰胺化的能力。用气相色谱-质谱法评估胆汁酸在72小时内释放到培养基中的情况。WIF-B9细胞能够合成胆汁酸（1.10+/-0.17 nmol/mg蛋白质），但比原代培养的大鼠肝细胞效率低（2.19+/-0.19 nmol/mg蛋白质；P<0.01）。两种细胞产生的主要胆汁酸种类的模式也不同。胆酸（CA；72%）和β-鼠胆酸（19%）是大鼠肝细胞产生的主要胆汁酸，而鹅去氧胆酸（CDCA）仅占总胆汁酸的4.5%。相反，鼠胆酸缺乏，而CA（62%）和CDCA（34%）是WIF-B9细胞合成的最丰富的胆汁酸。利用逆转录聚合酶链反应和胆汁酸合成关键酶的基因和物种特异性引物，在WIF-B9细胞中发现了人而非大鼠CYP7A1、CYP27、CYP8B和CYP7B1的同源序列的表达。血清剥夺诱导的细胞应激并没有改变这些细胞合成的总胆汁酸的数量，但发现CA-CDCA比率从1.8反转到0.3，同时与酸性途径相关的中间代谢物的比例显著增加。使用500μM放射性标记CA和2 mM牛磺酸或甘氨酸，通过高效液相色谱法测定48小时内CA酰胺化的能力。大鼠肝细胞将90%以上的CA与任一氨基酸结合，而在WIF-B9细胞中这种能力很差（<2%）。关于酶和胆汁酸合成产物的表达，可以得出结论，在WIF-B9细胞中，人类表型比大鼠表型占优势。此外，这些细胞几乎完全无法进一步结合初级胆汁酸，这有助于在分析程序中操作这些类固醇。这些特性使WIF-B9细胞成为一个合适的体外模型，用于通过“类人”代谢途径进行胆汁酸合成的研究。
