美国国家科学院院刊。1996年8月20日；93(17): 9067–9072.
具有选择性整合的单拷贝转基因小鼠。
美国北卡罗来纳大学病理学系，教堂山27599-7525。
摘要
我们描述了一种将转基因导入小鼠生殖系的一般方法，用于比较不同的序列，而不会出现拷贝数和插入位置变化的并发症。该方法使用胚胎干细胞（ES）中的同源重组来生成具有整合到基因组中选定位置的转基因单拷贝的小鼠。为了测试该方法，通过可直接选择的同源重组事件，将由鸡β-肌动蛋白启动子或人β-肌动蛋白启动子驱动的单拷贝小鼠bcl-2 cDNA立即插入X连锁次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因座5'。在具有相同启动子的独立分离同源重组体中，靶向bcl-2转基因在ES细胞中的表达水平相同，但不同启动子之间的表达水平不同。相反，当具有相同启动子（鸡β-肌动蛋白）的bcl-2转基因在随机插入位点独立整合时，其表达变化剧烈。这两个启动子都直接在来自各自靶向ES细胞的小鼠中广泛表达单拷贝转基因。在体外和体内，人β-肌动蛋白启动子的转基因表达水平始终高于鸡β-肌动蛋白启动子。
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