肌上皮细胞的起源及其在乳腺形态发生和肿瘤中的作用

摘要

简介

人类乳腺包含由两种上皮细胞组成的分支导管网络：内层为极化管腔上皮细胞，外层为肌上皮细胞，由富含层粘连蛋白的基底膜与胶原基质分离。导管网络以小叶单位终止，通常称为终末导管小叶单位（TDLUs）(1). TDLUs由包含腺泡的小叶组成，腺泡在哺乳期间发挥分泌乳汁的功能，由管状上皮结构通过一个称为分支形态发生的过程形成，这是一个在动物界广泛存在的高度保守的发育过程。这个过程产生了肺部的气道、尿液收集管、前列腺和唾液腺以及乳房的功能单位(2). 小鼠和人类都有充分的证据表明，构成TDLU的两种不同上皮细胞，腔上皮细胞和肌上皮细胞，来自共同的祖先，即位于腔上皮室中的乳腺上皮前体细胞(三,4). 虽然尚未明确确定，但乳腺上皮干细胞被认为在整个生殖期负责持续的细胞更新、生长和分支，以及妊娠期间出现的大量上皮扩张（综述于(5,6)).

因为乳腺癌主要发生在TDLU的管腔上皮室(7)直到最近，对周围肌上皮细胞的研究还很少。肌上皮细胞位于管腔上皮细胞和基质之间，理想的位置是它们与两个腔室沟通。此外，最近的研究表明，肌上皮细胞可以通过维持组织极性来保护人类乳房的组织完整性(8,9). 肌上皮细胞，存在于正常和癌前乳腺中，通常继续围绕浸润前乳腺就地癌，很少转化；然而，当它们发生转化时，通常会产生恶性程度较低的肿瘤(10). 在乳腺癌进展过程中，完全分化的肌上皮细胞数量超过癌细胞，并逐渐消失（见下文讨论）(11). 这种损失与完全分化的肌上皮细胞是天然肿瘤抑制剂的假设一致。此外，两者都是在体外和体内研究证实了肌上皮细胞抑制肿瘤生长和侵袭的能力(10,12). 因此，随着人们认识到肌上皮细胞参与正常乳腺形态发生和肿瘤抑制的重要性，对肌上皮细胞生物学的整体兴趣正在迅速增加。在这篇综述中，我们重点介绍了成人乳腺肌上皮细胞的起源及其在维持上皮细胞极化中的作用，但首先我们简要介绍了肌上皮细胞。

乳腺髓鞘细胞一瞥

体内肌上皮细胞通过半桥粒附着在基底膜上，通过桥粒附着到邻近的管腔上皮细胞和肌上皮细胞上(13). 导管内的肌上皮细胞是平行于导管长轴的纺锤形细胞，呈连续层。TDLUs中的肌上皮细胞不连续，呈星状，并在腺泡周围形成一个网篮状网络，允许一些管腔上皮细胞直接接触BM(11,14). 肌上皮细胞表达分层上皮基底层的细胞角蛋白（CK）特征，如CK 5、CK 14和CK 17(1,15). CK 5和14在肌上皮细胞的细胞构筑中起着重要作用，因为它们分别与桥粒和半桥粒相连，桥粒和半桥粒分别介导肌上皮细胞与邻近细胞和底层BM的连接(8,16). 肌上皮细胞的质膜以胞饮小泡的存在为特征(17)现在被归类为caveolae(18). 有趣的是，汉珀尔在他1970年的综述中提出，肌上皮细胞可能控制管腔上皮细胞和基底膜之间分子的运输和代谢(19). 肌上皮细胞细胞质中充满肌动蛋白和肌球蛋白，这是泌乳期间催产素介导的收缩表型的原因(20,21). 事实上，肌上皮细胞最显著的肌分化表型是丝状细胞的表达α-平滑肌肌动蛋白(α-sm-actin）和重链肌球蛋白（hc-myosin）(22,23). 肌上皮细胞通过纤维连接蛋白、IV型胶原、巢蛋白和生物活性层粘连蛋白的表达和沉积显著促进基底膜的生成(9,11,24). 它们还拥有BM受体，包括整合素，介导细胞与BM的粘附，偶尔也介导细胞间的相互作用(25). 特别地，β4和α1整合素在肌上皮细胞中表达(23,26). 此外，许多肿瘤抑制蛋白，包括p63、p73、14-3-3 sigma、maspin和Wilms tumor，优先在肌上皮细胞中检测到(27–29)与肌上皮细胞明显的内源性抑癌功能相一致。上述描述主要针对完全分化的肌上皮细胞，但最近的数据表明存在形态不同的肌上皮上皮细胞，该细胞缺乏α-sm肌动蛋白，在某些情况下也缺乏CK5、14和17(28)表明肌上皮谱系中可能存在层级分化模式。有人认为，这些分化程度最低或部分分化的肌上皮细胞可能会影响邻近上皮细胞的功能和生物学行为(28)强调需要更好地了解人类乳腺肌上皮细胞的起源和谱系发育。

髓鞘生殖细胞的起源

鉴于越来越多的研究发现，肌上皮细胞在乳腺组织的发育和维持中起着关键作用，并且可能发挥重要的抑癌作用，肌上皮上皮细胞如何在乳腺中产生的问题引起了越来越多的关注（综述于(30)). 细胞分离技术的引入和改进是成功研究乳腺内各种细胞类型的谱系关系和功能的基石。为了让研究人员明确识别肌上皮前体细胞，有必要从人类乳腺中分离不同的细胞系，并在保持观察到的表型标记谱的条件下分别培养它们就地基于针对谱系特异性细胞表面标记物的抗体，许多实验室已成功地从啮齿动物乳腺和人类乳腺中纯化出初级管腔上皮细胞和肌上皮细胞(三,15,31–35).

我们已经表明，管腔上皮细胞和肌上皮细胞可以在无血清培养基（分别为CDM6和CDM4）中培养长达七代，而不会失去其谱系特异性特征；例外是肌上皮细胞下调α-sm-actin和CALLA在文化中的应用(三). 然而，肌上皮细胞会重新表达α-在汇合处添加血清后的肌动蛋白(三). 使用纯化的细胞群，可以通过切换培养基来解决哪种细胞类型产生另一种细胞。添加CDM6后，肌上皮细胞在进入衰老之前保持其原始表型。相反，当纯化的管腔上皮细胞在CDM4中培养时，一个亚群的分化模式逐渐向肌上皮谱系转化。通过监测CK 18和19的逐渐丢失以及波形蛋白、CALLA和血清诱导物的增加来判断这种转换α-肌动蛋白((三); 已在中审阅(36)).

这些数据得到其他实验室结果的支持(34,37,38). 斯莫利等。证明分选的小鼠肌上皮细胞只产生单一类型的克隆，而分选的管腔上皮细胞产生三种形态不同的克隆类型，显示肌上皮标记物的逐渐获得(34,37). 在另一项研究中，尽管没有使用细胞分离协议，Kao等。通过克隆稀释培养确定了两种乳腺上皮细胞类型。I型细胞能够分化为其他类型的细胞，并在重组基底膜（rBM）上形成出芽结构，从而表达管腔上皮标记物和干细胞特征。II型细胞在rBM中表现出肌上皮表型并形成球形器官样体(38). 有趣的是，只有I型细胞才能转化为II型细胞，而不是II型细胞转化为I型细胞(38). 因此，可以合理地得出这样的结论：管腔上皮和肌上皮细胞谱系是相关的，管腔上皮细胞产生肌上皮细胞，至少在成人腺体中是如此。这反过来表明，双功能祖细胞可能位于管腔上皮室中。

人类乳腺内假性干细胞室的鉴定

许多实验室，包括我们的实验室，都投入了大量精力来鉴定乳腺内可能存在的干细胞隔室。这种干细胞生态位被认为是腔上皮细胞和肌上皮细胞最终起源的关键，并为乳腺癌的起源提供了可能的细胞群（综述于(5,6,39)).

斯廷格尔等。之前在培养基中发现一种双功能人类乳腺上皮细胞，MUC1为阴性或弱阳性，MUC1是分化腔上皮细胞的标记(40). 根据上皮特异性抗原（ESA）的强表达，这种细胞类型被认为起源于管腔上皮室，ESA是一种仅在乳腺管腔上皮细胞上表达的基底外侧标记物(40). 如上所述，从对培养细胞进行的研究中，越来越多的证据表明，具有双重特征的祖细胞，即能够分化为管腔上皮细胞和肌上皮细胞，来源于管腔上皮室中MUC1阴性的细胞。似乎有理由相信，这些MUC1阴性细胞确实是管腔上皮谱系的完整成员，因为它们表达管腔上皮标记物，如简单角蛋白和ESA，而不表达肌上皮分化标记物(4).

先前对啮齿类动物的研究导致了一个广为接受的假设，即上皮干细胞具有基底位置（在(41,42)). 最初，对大鼠乳腺的超微结构研究确定了三种细胞类型，管腔上皮细胞、肌上皮细胞和基底透明细胞，后者被认为构成干细胞群(43–45). 史密斯等。描述了人类乳腺中基底透明细胞向完全分化的肌上皮细胞的逐渐过渡，但没有观察到基底透明细胞和管腔上皮细胞之间的任何关系(46). 相反，在小鼠乳腺中，也由Smith实验室进行的超微结构表征导致了一个拟议的谱系进化模型，并鉴定了假定的干细胞（小轻细胞，SLC）、一级祖细胞（与SLC没有超微结构上的区别）、，二级祖细胞仍然是多功能的（未分化大轻细胞，ULLC），以及两个由非分裂、管腔前和前肌上皮细胞组成的细胞室，逐渐成熟为完全分化的谱系(41). 在超微结构水平上，SLC从未到达腺泡腔，只有一小部分ULLC达到。

与上述研究一致，我们发现基底上MUC1阴性、ESA阳性和α-人乳腺中的sm-actin阴性细胞(4). 胰蛋白酶消化的未培养细胞涂片中MUC1阴性、ESA阳性细胞的频率为8%，这与之前的小鼠数据一致，根据这些数据，干细胞和祖细胞的估计频率也约为8-12%(42). 分离MUC1阴性和ESA阳性基底上细胞产生了少量细胞，然后使用含有人类乳头状瘤病毒16的E6和E7癌基因的逆转录病毒构建物使其永生化(4). 基底上衍生的上皮细胞系能够产生分化的管腔上皮细胞和肌上皮细胞，这由MUC1和thy-1的表达决定，因此表明它们具有如上所述的双电位性质。此外，基底上衍生的细胞系类似于一个亚群就地正常乳腺管腔上皮细胞中CK19的限制表达。从基底上衍生的上皮细胞系中纯化thy-1阳性细胞，产生表达α-sm肌动蛋白mRNA和蛋白。当在3D lrECM中测试干细胞特性时，基底上衍生细胞系产生了复杂的结构，使人想起功能单元，即TDLU(图1)内层为CK19阳性管腔样细胞，外层为CK14阳性肌上皮样细胞。因此，当综合考虑时，有强有力的证据表明TDLU中的管腔上皮和肌上皮细胞来源于基底上细胞类型，这是管腔上皮室的真正成员。

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图1

基底上上皮细胞系在富含层粘连蛋白的细胞外基质（lrECM）中形成精细的TDLU样结构。基底上上皮细胞作为单个细胞嵌入lrECM中，形成复杂的结构，使人想起TDLU体内.巴，50μ米。左上方，显示管腔上皮细胞的TDLU示意图(红色)被肌上皮细胞包围(黄色的)和基底膜(黑线). （由Gudjonsson提供等(4)).

肌上皮细胞作为组织极性调节器

肌上皮细胞并列在管腔上皮细胞和周围富含胶原蛋白的基质之间。因此，它们不仅位于这两个隔间之间进行沟通的理想位置，而且也处于为维持正常乳房结构提供重要调节信号的理想位置(8,9). 随着从正常乳腺组织中分离肌上皮细胞技术的发展，现在可以进行消融实验来探索肌上皮细胞在乳腺形态发生中的功能(9). 我们之前已经证明，小鼠和人类腔上皮细胞在富含层粘连蛋白的凝胶中培养时会形成极化的腺泡(47–49). 由于肌上皮细胞负责许多基底膜蛋白的表达，包括层粘连蛋白，因此可以合理地确定肌上皮细胞是否负责腺泡极化体内使用基于消融的方法，我们证实了在三维I型胶原凝胶中单独培养的管腔上皮细胞形成固体腺泡状结构(50)，但后来我们发现这些结构缺乏管腔(9). 胶原和lrECM培养的管腔上皮细胞的比较特征显示了一个根本性的差异：在lrECM中培养的管腔内上皮细胞在基底极形成腺泡和有组织的BM，而在胶原凝胶中培养的管腔上皮细胞表现出相反的极性。对MUC1和ESA以及MUC1和紧密连接成分闭塞素的双重染色显示，当细胞生长在胶原蛋白中时，细胞内外极性和无BM沉积。重要的是，这种异常的管腔上皮极化可以通过添加肌上皮细胞来纠正。通过将肌上皮细胞和管腔上皮细胞以1:1的比例混合，然后将其嵌入胶原蛋白I凝胶中，管腔形成和管腔表皮细胞的正确顶基外侧极性得以挽救(图2). 肌上皮细胞的这种作用是细胞类型特异性的，因为腔上皮细胞与其他乳腺细胞（常驻乳腺成纤维细胞）或非乳腺细胞（骨肉瘤细胞）共同培养不会导致内-外极性的逆转。I型胶原测定的一个重要特征是腔上皮和肌上皮细胞形成双层腺泡结构的能力(9)腔上皮细胞和肌上皮细胞的旋转共培养也证明了这一特征(8).

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图2

通过添加肌上皮细胞逆转内外腺泡。（A） 内壁细胞在胶原蛋白中形成内向外的腺泡。对管腔上皮细胞进行MUC1双重染色(红色)和ESA(绿色). （B） 在肌上皮存在的情况下，腺泡极性被MUC1的顶端表达所证明(红色)和ESA(绿色). 酒吧，25μm.（由Gudjonsson提供等(9)).

因为Matrigel最初被证明足以形成腺泡(49)，我们测试了在乳腺上皮BM中发现的层粘连蛋白亚型，即层粘连素-1（Matrigel中的主要层粘连蛋白质亚型）、层粘连酶-5和层粘连肽10/11是否可以替代i型胶原分析中的肌上皮细胞。据报道，这些层粘连蛋白存在于许多组织形态发生的不同方面（有关综述，请参阅(51)). 事实上，当加入胶原蛋白凝胶时，层粘连蛋白-1和基质（最终培养基浓度的10%）都可以逆转管腔上皮细胞的极性，而层粘连素-5和层粘连蛋白质-10/11却无法做到这一点。这些数据可以预测：（a）管腔上皮上皮细胞在胶原蛋白凝胶中不能产生足够的层粘连肽-1，使其极化；（b）正常肌上皮细胞通过合成层粘连蛋白-1而成为极化原理的来源。为了验证这一观点，我们通过RT-PCR分析了肌上皮细胞和管腔上皮细胞合成BM成分的情况。这些实验表明，肌上皮细胞和管腔上皮细胞在生成BM成分方面的唯一差异是后者缺乏层粘连蛋白-1的表达，免疫细胞化学也证明了这一点(9). 这些数据与其他器官的报告结果一致。之前已经表明α层粘连蛋白1链与肾脏上皮细胞极化有关(52)和肺(53). 此外，层粘连蛋白-1已被证明在人类颌下腺上皮细胞中极化并诱导腺泡形成(54,55)和人类前列腺上皮细胞(56). 霍夫曼等。已经证明从α层粘连蛋白1链可诱导人颌下腺细胞的腺泡样结构(55). 贝洛·德奥坎波等。比较了Matrigel、层粘连蛋白-1、IV型胶原和纤维连接蛋白在前列腺上皮细胞中诱导腺泡形成的能力，发现Matrigel和层粘连素-1是同样有效的腺泡形成诱导剂，而IV型胶原或纤维连接到蛋白则没有影响(56).

尽管层粘连蛋白-1无疑是组织形态发生和维持乳腺及其他器官适当极性的关键调节因子，但其他肌上皮衍生分子也被证明对乳腺组织极性至关重要。Runswick及其同事已经证明桥粒粘附分子在乳腺腺泡定位中的作用(8). 桥粒钙粘蛋白由桥粒结合蛋白（Dsc）和桥粒蛋白（Dsg）组成。内腔乳腺上皮细胞仅表达Dsc2和Dsg2，而肌上皮细胞也表达Dsc3和Dsg 3。当在旋转培养中分离和重组时，管腔上皮细胞和肌上皮细胞进行位置分选，形成优雅的双层结构，使人想起它们体内相对应的人。用功能阻断肽治疗肌上皮特异性Dsc3和Dsg3破坏了双层结构及其极性(8,57). 这些数据表明桥粒细胞-细胞相互作用在乳腺肌上皮诱导的极性中也很重要。这两种形态发生事件之间的关系，以及它们在确定腺泡极性方面的相对等级仍需确定(58).

肿瘤中的髓鞘细胞

乳腺的形状和功能是密不可分的(59)，而乳腺癌进展的标志之一是正常组织结构的丧失，包括极性。也有人假设并普遍接受，原发性乳腺癌的管腔与肌上皮细胞的比率显著增加，许多浸润性乳腺癌基本上完全缺乏肌上皮细胞(60). 如果肌上皮细胞的鉴定标准是完整分化程序的表达，那么这种坚定的信念是合理和正确的。然而，许多早期的研究只关注完整BM的存在，特别是层粘连蛋白-1的表达，在所用抗体的限制下，层粘连蛋白-1在侵袭性乳腺癌中通常不存在(9,11,61). 然而，在目前的文献中，肌上皮标记物在乳腺癌中的报道更为频繁。因此，在20-33%的侵袭性乳腺癌中检测到CK14、CK17和波形蛋白(62,63). 在乳腺癌中发现了类似频率的超微结构鉴定的肌上皮细胞（参见(64)). 最近的微阵列研究表明，在乳腺癌中观察到的表型多样性与独特的基因表达模式相关，这些基因表达模式可用于将乳腺癌划分为至少四个主要亚组，即正常型、管腔型、ERBB2-过表达型和基底型，所有这些亚组的临床结果都不同(65). 预后最差的是基底样乳腺癌，这是一种雌激素受体阴性的癌症，表现为管腔和肌上皮标记物的表达(66,67). 然而，尽管存在部分肌上皮分化的细胞，管腔上皮细胞仍基本上处于紊乱状态(9,62,68).

在阐明了正常肌上皮细胞在乳腺形态发生中的功能作用后，我们询问癌相关肌上皮细胞是否缺乏向管腔上皮细胞发出极性信号的能力，以及这种缺乏是否与它们不能合成层粘连蛋白-1有关。最初我们使用的是乳腺癌细胞系（HMT-3909S13）(69,70)这似乎是一个前体细胞系，在裸鼠肿瘤的基质-上皮交界处产生肌上皮细胞。通过对波形蛋白和角蛋白的人类特异性抗体进行双重染色，这些肿瘤类似于双相/基底人类乳腺癌。

通过免疫磁性细胞分选，使用α1整合素抗体，可以从HMT-3909S13细胞中纯化肌上皮细胞。这些癌源性肌上皮细胞被称为HMT-3909S16，其标记物表达与正常肌上皮细胞相似(71). 然而，即使细胞数量比正常肌上皮细胞所需的细胞数量高出10倍，他们也完全无法纠正胶原凝胶中管腔上皮细胞的极性(9,71). 由于这些细胞是永生的，而胶原蛋白分析中使用的正常肌上皮细胞则不是，我们询问它们不能逆转极性是否与永生有关。因此，我们使用了正常的乳腺源性E6/E7永生化肌上皮细胞系；当使用这些细胞时，I型胶原蛋白凝胶试验中的共培养仍能产生正确的极化(9,71).

为了测试永生化正常来源和癌源性肌上皮细胞之间的差异是否在于它们产生层粘连蛋白-1的能力，我们对这些细胞进行染色，以获得一些肌上皮分化标记物。所测试的标记物的主要差异显然是层粘连蛋白-1的生成能力。RT-PCR进一步证实了这种差异。但是，由于桥粒蛋白等其他标记物也异常（未发表），我们从三个原发性乳腺癌中纯化了新鲜的肌上皮细胞，因为我们很清楚这些细胞可能含有残留的正常肌上皮细胞。然而，在三分之二的样本中，癌源性肌上皮细胞的行为与已建立的癌源性肌上皮细胞系相似。一个癌源性肌上皮细胞样本能够在合理水平上极化管腔上皮细胞，层粘连蛋白-1染色呈阳性。此外，沉积了一个BM，尽管碎片化，并且β4整合素靶向基底细胞表面(9).

测试从培养的肿瘤源性肌上皮细胞获得的数据是否证实了观察结果体内我们进一步用层粘连蛋白-1对12例浸润性导管癌进行了染色。7例癌层粘连蛋白-1完全阴性。其他5例乳腺癌表现为片状层粘连蛋白-1染色灶，明显低于正常乳腺组织(图3). 肌上皮标记物maspin、CK17或细胞角蛋白相关BG3C8和层粘连蛋白-1的双重染色显示，肿瘤相关肌上皮细胞层粘连素-1呈阴性或弱阳性。另一方面，只要癌内或癌旁存在正常结构，就可以在正常残留乳腺组织周围观察到层粘连蛋白-1的强阳性染色(9).

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图3

层粘连蛋白-1在人类乳腺癌中的染色减少。导管癌TDLU（a）的冷冻切片就地（b） 和四种不同的浸润性导管乳腺癌（IDC）（c–f）用层粘连蛋白-1免疫过氧化物酶染色并用苏木精复染。注意（a）中TDLU基底膜层粘连蛋白-1的强染色，将基质（S）和上皮（E）分隔开。在癌中，层粘连蛋白-1染色局限于基质（S）-癌上皮（C）界面，但不连续且不太明显。酒吧，25μm.（由Gudjonsson提供等(9)).

我们的发现是，一些癌源性肌上皮细胞存在功能缺陷，其特征是层粘连蛋白-1缺乏表达，并且不能极化管腔上皮细胞，提供了一个似是而非的解释，解释了为什么显示部分肌上皮分化的乳腺癌不能为患者提供更好的预后(68). 因此，在一些乳腺癌中，存在肿瘤性肌上皮细胞，并且似乎具有功能。此例为腺样囊性癌，预后较好，不会转移到远处(72). 在这些癌中，层粘连蛋白沉积，瘤腔上皮细胞正确极化。这一结果可以解释为正常或“接近正常”的肌上皮细胞通过BM的产生和沉积诱导和/或保持癌细胞极化的能力。因此，I级癌预后良好，通常极化正确(73)，描述了碎片化的BM(11,61)并且，在超微结构水平上，有报道称存在肌上皮细胞(74). 在这种情况下，我们很容易推测，能够产生功能性层粘连蛋白-1的肌上皮细胞的存在可能使恶性细胞中发生的遗传改变得到了控制（关于基因型和表型之间的关系，也请参阅(75,76)). 因此，肌上皮细胞在理论上可以起到屏障的作用，阻止非侵袭性肿瘤转化为侵袭性癌症，尽管这种假设的证据最多也不多。

值得注意的是，一般来说，肌上皮细胞本身对癌症的发展具有高度抵抗力，在这些情况下，当肌上皮细胞系发生癌症时，其恶性程度一般较低，但恶性肌上皮瘤除外，它是一种罕见的乳腺癌(77). 这一发现与我们的数据一致，我们的数据表明，即使在注射了10倍于母系肿瘤细胞数量的细胞（0/6只小鼠与11/12只小鼠相比）后，癌源性肌上皮细胞系在裸鼠中也不致肿瘤(9).

总结意见和未来方向

在这篇综述中，我们引用了一些证据，证明小鼠和人类乳腺中的肌上皮细胞来源于成人乳腺腔内上皮细胞室中的基底上细胞类型。此外，我们讨论了正常肌上皮细胞对管腔上皮细胞的正确极性至关重要的观察结果，很可能是通过层粘连蛋白-1的产生。另一方面，肿瘤中的肌上皮细胞与正常肌上皮细胞有许多共同特征，但显示层粘连蛋白-1完全缺失或表达减少，因此无法诱导管腔上皮细胞的极化。

未来的任务是探索肌上皮细胞在正常功能中的潜在功能以及异常功能在乳腺癌分化中的后果。Polyak实验室最近的重要工作表明，从导管癌中分离出的肌上皮细胞就地（DCIS）被彻底改变并分泌许多细胞因子和其他潜在的促肿瘤分子(78). 除了那些正在研究的分子（另请参阅本期杂志），还需要确定那些导致BM生成和信号传导普遍消失的因素，特别是DCIS和癌源性肌上皮细胞中的层粘连蛋白-1。阐明调节正常乳腺干细胞和乳腺癌“干细胞”所作细胞命运决定的分子机制也很重要，这两种细胞能够进行完全与不完全的肌上皮分化。在我们试图了解肌上皮和管腔上皮的关系及其对乳腺癌可塑性的各自贡献时，我们需要了解在大多数乳腺癌中，哪些因素决定了乳腺癌细胞沿肌上皮途径分化失败；因此，不能显示分化的肌上皮细胞的抑瘤特性。从以上引用的最新数据来看，肌上皮细胞的抑瘤能力可能取决于其完全分化，其表达模式的改变可能导致其功能的逆转，即未分化的肌上皮细胞实际上可能促进而不是抑制肿瘤的进展。值得注意的是，这是肿瘤抑制分子（如p53）的经典模式，似乎一旦器官完整性被破坏，上皮细胞的细胞伙伴可能会改变其信号分子，使其发挥致癌基因的作用。在这种情况下，改进和简化的纯化方案将是分离显示不同分化程度的亚群的不可或缺的工具，以配合小鼠乳腺上皮细胞不同群体的超微结构特征(79). 除了在培养中寿命有限的原代上皮细胞外，迫切需要具有良好特征的永生肌上皮细胞系，以代表肌上皮谱系的各种分化状态。在这方面，我们认为基底上源性上皮干细胞系(4)有潜力提供有关肌上皮细胞在正常乳腺发育和癌症进展中的作用的宝贵信息。

数据表明，肌上皮细胞起源于管腔上皮室内的祖细胞(三,40)以及（一种或多种）外源性因子可能触发管腔细胞亚群转化为肌上皮细胞，这可以部分解释为什么大多数乳腺癌表达管腔表型。如果外部信号不存在或细胞失去对微环境作出适当反应的能力(80)，干/祖细胞继续沿着管腔上皮细胞系扩张，从而避免或部分绕过肌上皮途径，如Rudland之前根据大鼠细胞系的行为所假设的那样(81,82). 然而，尽管乳腺癌细胞主要表达管腔上皮表型，但一些癌细胞保留了转换为肌上皮程序的能力，尽管只是部分。这些观察结果可能为未来的分化治疗提供了可能性，在这种分化治疗中，癌细胞被迫沿着肌上皮途径分化，从而制造出恶性程度较低的细胞或那些能够抑制恶性程度较高的细胞的侵袭行为的细胞。

总之，尽管还有很多需要了解，但肌上皮细胞作为可能的肿瘤抑制剂的作用可能包括它们作为“正常”的守护者的功能，作为早期乳腺癌的旁分泌侵袭抑制剂，以及通过诱导恶性肿瘤细胞沿肌上皮途径分化为破坏性较小的细胞类型来进行分化治疗的靶点。

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