美国人类遗传学杂志。2001年4月；68(4): 884–894.
黑素皮质素-1受体基因变异独立于白皙皮肤和红发决定非黑色素瘤皮肤癌的风险
,1 ,1 ,1 ,1 ,2 ,1和1,*
马尔滕·巴斯蒂安
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
珍妮特·特尔·休恩
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
克里斯汀·基利希
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
内列克·格鲁伊斯
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
鲁迪·G·J·韦斯特多普
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
伯特·扬·维米尔
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
简·尼科·布韦斯·巴文克
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
以下部门1皮肤病学和2荷兰莱顿莱顿大学医学中心临床流行病学
*莱顿皮肤癌研究小组的成员有Nathalie van Amsterdam、Wilma Bergman、Marjo Berkhout、Ingeborg Boxman、RenéBroer、Jan Anthonie Bruijn、Marianne Crijns、Mariet Feltkamp、Sofie De Hertog、Juliette Hoefnagel、Kees Kennedy、Iris Kuijken、Sjan Lavrijsen、Linda Mulder、Marloes Polderman、Marinus van Praag、Jan ter Schegget，凯撒·斯特克（Caesar Sterk）、琳达·斯特鲁伊克（Linda Struijk）和克里斯蒂安·温斯文（Christianne Wensveen）。
2000年10月11日收到；2001年1月22日接受。
摘要
黑素皮质素-1受体（MC1R）基因变异与白皙皮肤和红发相关，并且与皮肤恶性黑色素瘤无关。MC1R基因变异与非黑色素瘤性皮肤癌的相关性尚不清楚。本研究共纳入838名受试者：453名非黑色素瘤皮肤癌患者和385名非皮肤癌患者。人类MC1R基因的编码序列通过单链构象多态性分析进行测试，然后对未知变异体进行测序。使用暴露比值比估计依赖于各种MC1R基因变体的皮肤癌风险。我们调查了MC1R变异等位基因受试者患非黑色素瘤皮肤癌的风险是否增加，如果是，这种风险的增加是否是由白皙的皮肤和红发介导的。共发现27个MC1R基因变体。一个、两个或三个MC1R基因变体的携带者数量分别为379（45.2%）、208（24.8%）和7（0.9%）。MC1R基因变异体与白皙皮肤和红发之间建立了强有力的关联，尤其是变异体Arg151Cys和Arg160Trp(P（P）<.0001). 两种变异等位基因携带者患皮肤鳞状细胞癌（比值比3.77；95%置信区间[CI]2.11-6.78）、结节性基底细胞癌（比值比2.26；95%置信区间1.45-3.52）和浅表多灶性基底细胞癌（比值比3.43；95%置信区间1.92-6.15）的风险增加，与两个野生型等位基因携带者进行比较。携带一个变异等位基因的人有一半的风险。Asp84Glu、His260Pro和Asp294His变异等位基因的携带者患非黑色素瘤皮肤癌的相对风险最高，而Val60Leu、Val92Met、Arg142His、Arg151Cys和Arg160Trp变异等位携带者的风险仅略低。当受试者按皮肤类型和头发颜色分层时，分析表明这些因素并没有实质性改变相对风险。这些发现表明，MC1R基因变异是非黑色素瘤皮肤癌的重要独立危险因素。
介绍
皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌，共同被称为“非黑色素瘤皮肤癌”，是白人最常见的癌症之一（普雷斯顿和斯特恩1992). 基底细胞癌可细分为结节性和浅表性多灶性基底细胞癌，两者的分布因年龄、性别和部位而异（Bastiaens等人。1998). 紫外线（UV）辐射是非黑色素瘤皮肤癌的主要环境风险因素（Kricker等人。1994)而白皙的皮肤和红色的头发被认为是最重要的遗传决定的风险因素（Kricker等人。1991).
黑素皮质素-1受体（MC1R）基因变体（MC1R[MIM155555])尤其是Arg151Cys、Arg160Trp和Asp294His变体与白皙皮肤和红发（Valaverde1995; Box等人。1997). 白皙的皮肤和红发也与皮肤恶性黑色素瘤的风险增加有关（Kricker等人。1991; Bliss等人。1995). 携带不同MC1R基因变异等位基因的受试者患恶性黑色素瘤的风险增加（Valverde等人。1996; Healy等人。1999; Palmer等人。2000). Valverde及其同事报告的一项研究发现，携带Asp84Glu变异等位基因的人患恶性黑色素瘤的风险增加(1996)但同一研究小组后来的研究（Healy等人。1999)以及其他研究小组（Ichii-Jones等人。1999; Palmer等人。2000)无法确认此关联。最近，Arg151Cys、Arg160Trp和Asp294His变异等位基因似乎与恶性黑色素瘤风险增加有关（Palmer等人。2000). MC1R变异与恶性黑色素瘤之间的关联表明，MC1R基因是这种皮肤恶性肿瘤的易感基因（Rees和Healy1997). 然而，MC1R基因变体在调节非黑色素瘤皮肤癌风险中的作用尚不清楚。在一小群患有非黑色素瘤皮肤癌的英国患者中，发现Asp294His变异等位基因的过度表达（Smith等人。1998). 然而，在一项对基底细胞癌患者的研究中，这种过度表达无法得到证实（Ichii-Jones等人。1999).
黑色素沉着在保护皮肤免受紫外线辐射的伤害方面起着重要作用。在人类中，α-黑素细胞刺激激素（α-MSH）和其他原-黑素皮质素（POMC）肽，如ACTH，通过MC1R调节色素代谢（铃木等人。1996; Thody和Graham1998). UVB照射后皮肤色素沉着增强可能也通过α-MSH和MSH受体介导（Abdel-Malek等人。1999). 在人类皮肤中发现了两种色素：黑色真黑色素和红色酚醛色素（Thody等人。1991). 由α-MSH通过MC1R作用刺激的黑素细胞合成黑色真黑素色素，而不是红色酚醛色素（Hunt等人。1995). 真黑色素具有光保护作用，但pheomelanin可能通过对紫外线辐射产生自由基而导致皮肤癌变（Ranadive等人。1986). 红头发和白皙皮肤的人主要合成黑色素，这可能解释了他们对阳光的敏感性和不能晒黑的原因（Thody等人。1991). 除了在色素代谢中的功能外，α-MSH和其他POMC肽也具有免疫调节和抗炎活性（Wintzen和Gilchrest1996; Luger等人。1998). 此外，α-MSH影响黑素细胞的增殖和分化（Lunec等人。1990,1992; De Luca等人。1993; 铃木等人。1996)和角质形成细胞（Slominski等人。1991).
MC1R是一种由317个氨基酸组成的七程跨膜G蛋白偶联受体，在多种细胞类型中表达，包括黑素细胞和角质形成细胞（Mountjoy等人。1992; 查克拉博蒂和巴韦列克1993; Chakraborty等人。1999b条). 铃木等人(1996)然而，无法通过northern blot分析证实人类表皮角质形成细胞表达MC1R mRNA。人类MC1R基因已被克隆并定位于染色体16q24.3（Gantz等人。1993; Magenis等人。1994). 在MC1R基因中，已鉴定出常见的多态性（Valverde等人。1996; Box等人。1997; Koppula等人。1997). 在爱尔兰人群中，超过75%的受试个体具有一个或多个MC1R基因变体（Smith等人。1998)其中一些能够改变受体的功能。在小鼠中，导致受体功能丧失的MC1R基因变体导致嗜铬细胞蛋白的过度生产，从而导致黄毛（Cone等人。1996)，而显性变体延长了黑色色素的数量，减少了黄色的数量（Robbins等人。1993). 在人类中，已经鉴定出功能丧失变体（Val60Leu、Arg142His、Arg151Cys、Arg160Trp和Asp294His），它们不能像野生型受体那样强烈刺激cAMP的产生，以响应α-MSH刺激（Frändberg等人。1994,1998; Schiöth等人。1999). 其中一些变异等位基因也被发现与红发相关，并且在白皙皮肤的个体中过度表达（Box等人。1997; Smith等人。1998; Flanagan等人。2000; Palmer等人。2000).
本研究的目的是比较患有非黑色素瘤皮肤癌的个体与没有皮肤癌病史的对照受试者，并关注MC1R基因变体的存在。我们检测了MC1R基因变异与白皙皮肤和红发的相关性。然后，我们研究了具有任何MC1R变异等位基因的受试者患皮肤鳞状细胞癌、结节性基底细胞癌或浅表性多灶性基底细胞癌的风险是否增加，如果是，这种风险的增加是否是由白皙的皮肤和红发介导的。最后，我们评估了单个MC1R变异等位基因携带者患非黑色素瘤皮肤癌的相对风险。
主题和方法
研究人群
莱顿皮肤癌研究（LSS）是一项始于1997年的广泛研究，旨在研究荷兰人群中各种皮肤癌的环境和遗传风险因素。莱顿大学医学中心（LUMC）和其他相关医学中心的医学伦理委员会批准了该方案，所有参与者均表示知情同意。
研究对象为30–80岁、组织学证实的皮肤鳞状细胞癌或结节性或浅表性多灶性基底细胞癌患者；1985年1月至1997年12月，LUMC皮肤科或与LUMC位于同一地区的三家医院（鹿特丹圣方济各会医院、莱德多普Rijnland医院和海牙Westeinde医院）新诊断出肿瘤。
从LUMC眼科门诊选择与患者年龄相同的对照受试者。他们没有皮肤癌病史，排除了有眼内黑色素瘤病史的患者。器官移植受者和患有色素性干皮病或痣样基底细胞癌（戈林综合征）的患者被排除在外，因为这些人患皮肤癌的风险大大增加。在这部分研究中，我们还排除了所有有皮肤恶性黑色素瘤病史的人。只有Fitzpatrick定义的I型至IV型皮肤的患者和对照受试者(1988)，包括在内。
面试和体检
通过邮件邀请符合研究条件的患者参与，并在前往眼科门诊就诊时收到一封信，要求对照组受试者参与。通过电话联系所有受试者，安排在皮肤科门诊进行面谈、体检和血样采集。
经过培训的面试官进行了标准化的个人面试。邀请函要求参与者在面试和体检时不要提及他们是否接受过皮肤癌治疗。皮肤类型评估如下：总是晒伤、从不晒黑（I型）、总是晒伤，然后晒黑（II型）、一直晒黑、有时晒伤（III型），以及总是晒黑、从不晒伤（IV型）。头发在20岁时被评估其颜色，并被分为四类：红色、浅金色、深金色、棕色或黑色。
皮肤科医生按照标准方案进行体检。眼睛的颜色分为棕色、淡褐色/灰色、绿色或蓝色。如果在对照组中发现非黑色素瘤性皮肤癌，则在随后的所有分析中将其与患者分组。
MC1R基因变异的检测
使用常规方法从外周血白细胞中分离基因组DNA（Miller等人。1988). MC1R基因编码序列(GenBank（基因银行）加入编号{“类型”：“entrez-notide”，“属性”：{“文本”：“X65634”，“term_id”：“34790”}}X65634型)PCR扩增反应如下：200 ng基因组模板DNA；60 mM Tris HCl（pH 10.0）；2.0 mM氯化镁2; 15毫米（NH4)2SO公司4; dGTP、dTTP、dATP和dCTP各100μM；1微升α-[32P] dCTP（3000 Ci mM−1); 每个PCR引物500 ng；2 U放大器塔克（应用生物系统）；和10%二甲基亚砜，总体积为100μl。样品被矿物油覆盖，在92°C下变性4分钟，并通过33个扩增周期，包括在92°C下变性50秒，在58°C下引物退火50秒，以及在72°C下延伸2分钟。扩增在0.5毫升试管中进行（Applied Biosystems）。引物的DNA序列为：正向5′-CAACGACTCCTCCCCTGCTTC-3′和反向5′-TGCCCCACACTTAAAGC-3′。得到的1018-bp PCR片段被两个U的南非兰特我或消息传递程序通过SSCP分析对I和进行突变筛查（Orita等人。1989)在含有10%甘油的6%聚丙烯酰胺凝胶上。凝胶分析在室温下28 W下进行6 h或20 W下进行16 h消息传递程序我和南非兰特我分别消化。
序列分析
如上所述，用以下M13尾MC1R基因引物通过PCR获得测序DNA样本：M13MC1R-F（5′-TGTAAACGACGGCCAGTCAACTCCTCTCTCTC-3′）和M13MC1-IR（5′-CAGGAAACAGCTACCATACCATGAGAGTGCTGTGGTAGC-3′，引物M13MC1R-IF（5′-GACGTGTAAACGACGGCCAGTACGCCATGCTGTC-3′）和M13MC1-R（5′-CAGGAAACAGCTATGACACTAAAGC-3′），得到661-bp的片段。
根据制造商的协议，使用Big-Dye Terminator循环测序试剂盒（Applied Biosystems）在ABI 377自动DNA测序仪上进行序列分析。
统计分析和分析策略
使用Logistic回归分析比较患者和对照组受试者的MC1R基因变异与皮肤类型和头发颜色无关。计算95%置信区间（CI）的暴露比值比（ORs），以估计MC1R基因变体依赖的非黑色素瘤皮肤癌类型的相对风险和数量。根据以下假设进行进一步分层。
假设1
第一个假设是MC1R-基因状态决定皮肤类型和红头发，红头发决定皮肤癌的风险。根据这一推理，皮肤类型和头发颜色被认为是混杂因素，MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌之间的关联预计将在皮肤类型（I/II型和III/IV型）和红发（红色和非红色）层消失。计算Mantel-Haenszel加权OR，根据皮肤类型和头发颜色调整MC1R基因变异的OR。
假设2
第二个假设是，白皙的皮肤和红发只是MC1R基因变异存在的标志，而基因变异才是皮肤癌的真正危险因素。如果这个假设是真的，皮肤类型和非黑色素瘤皮肤癌之间的关联，以及红发和非黑素瘤皮肤癌的关联，将在MC1R基因变体的层中消失。
我们决定首先分析任何MC1R变异等位基因（即所有变异等位序列）与非黑色素瘤皮肤癌的相关性。在后期，我们分析了单个MC1R变异等位基因对非黑色素瘤皮肤癌风险的相对贡献。
假设3
第三个假设是白皙皮肤、红发和MC1R基因变异是非黑色素瘤皮肤癌的独立危险因素。如果这个假设是正确的，MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌之间以及上述地层中白皙皮肤、红发和非黑色素癌皮肤癌之间的关联将持续存在。
结果
研究人群的构成
共有889名参与者在LUMC皮肤科门诊接受了采访和检查。在同意参与研究的受试者中，有51人被排除在外，因为他们不符合纳入标准。其中，26人仅有基底细胞癌亚型的病史，而非结节型和浅表型，4人的MC1R基因分型不成功，因为不能获得DNA或PCR产物。
最后一组分析包括838名受试者：153名鳞状细胞癌受试者，284名结节性基底细胞癌，142名浅表多灶性基底细胞瘤受试者；研究了385名对照受试者。在453例皮肤癌患者中，103例仅为鳞状细胞癌，182例仅为结节性基底细胞癌，57例仅为浅表性多灶性基底细胞瘤。共有111名受试者患有多种类型的皮肤癌：26名患者患有鳞状细胞癌合并结节性基底细胞癌，9名患者患有扁平细胞癌合并浅表多灶性基底细胞瘤，15名患者患有两种类型的基底细胞癌，结节伴浅表多灶性基底细胞癌61例。在分析中，患者组包括患有某种皮肤癌的受试者，而不考虑任何其他皮肤癌的病史；当对仅由一种皮肤癌患者组成的患者组进行分析时，得出了类似的相对风险。
显示了研究人群的特征。正如所料，鳞状细胞癌与皮肤类型显著相关(P（P）=0.0002）和头发颜色(P（P）<.0001). 结节性基底细胞癌与皮肤类型显著相关(P（P）=0.008），并且P（P）该值接近一个表明与头发颜色相关的水平(P（P）=.08). 浅表多灶性基底细胞癌与两种皮肤类型均显著相关(P（P）=.007）和头发颜色(P（P）=.04).
表1
| 特性 | 控件(n个= 385) | 任何类型的皮肤癌一(n个= 453) | 鳞状细胞癌(n个= 153) | 结节性基底细胞癌(n个= 284) | 浅表多灶基底细胞癌(n个= 142) |
| 性别（编号[%]） | | | | | |
| 男性 | 163 [42.3] | 254 [56.1] | 99 [64.7] | 162 [57.0] | 74 [52.1] |
| 女性 | 222 [57.7] | 199 [43.9] | 54 [35.3] | 122 [43.0] | 68 [47.9] |
| 面试年龄（岁）： | | | | | |
| 平均值 | 58.5 | 63 | 66.2 | 63.3 | 60.4 |
| 范围 | 28.6–79.9 | 31.6–78.2 | 36.9–78.2 | 31.6–78.2 | 31.7–78.2 |
| 皮肤类型（编号[%]）：b条 | | | | | |
| 四： 棕色，永不燃烧 | 24 [6.2] | 24 [5.3] | 7 [4.6] | 16 [5.6] | 9 [6.3] |
| 三： 棕褐色，有时烫伤 | 181 [47.0] | 167 [36.9] | 46 [30.1] | 107 [37.7] | 50 [35.2] |
| 二： 先晒黑，然后晒黑 | 155 [40.3] | 202 [44.6] | 76 [49.6] | 123 [43.3] | 61 [43.0] |
| 一： 烧伤，永不晒黑 | 25 [6.5] | 60 [13.2] | 24 [15.7] | 38 [13.4] | 22 [15.5] |
| 20岁时的头发颜色（编号[%]）：c（c） | | | | | |
| 黑色 | 27 [7.1] | 22 [4.8] | 5 [3.3] | 16 [5.6] | 7 [4.9] |
| 棕色 | 97 [25.3] | 79 [17.4] | 13 [8.5] | 58 [20.4] | 28 [19.7] |
| 深金色 | 143 [37.3] | 162 [35.8] | 55 [35.9] | 94 [33.1] | 46 [32.4] |
| 浅金色 | 96 [25.1] | 148 [32.7] | 58 [37.9] | 93 [32.8] | 44 [31.0] |
| 红色 | 20 [5.2] | 42 [9.3] | 22 [14.4] | 23 [8.1] | 17 [12.0] |
MC1R基因变异及其与皮肤类型和发色的关系
共发现27个MC1R基因变体(). 18个变异体显示频率<总等位基因的.5%。在1676个等位基因中，只有8个在同一等位基因内表现出两种变体，这一结果在8个个体中观察到。在这八个个体中，有七个在其他等位基因中也表现出变异，其中一个个体的其他等位是野生型。在178个（10.6%）等位基因中发现了由核苷酸942的A→G同义取代引起的多态性。由于这种替换不会改变氨基酸，因此A942G在分析中没有用作MC1R基因变体。Val92Met变体总是与A942G多态性一起被观察到。
表2
| 变体（核苷酸变化） | 皮肤类型I–IV级(n个= 1,676) | 皮肤类型四、(n个= 96) | 皮肤类型三(n个= 696) | 皮肤类型二(n个= 714) | 皮肤类型我(n个= 170) | P（P）一 |
| 皮肤类型患者的数量（%）一
| |
| Val60Leu（178G→T） | 156 | 9 (9.4) | 59 (8.5) | 72 (10.1) | 16 (9.4) | .04 |
| Asp84Glu（252C→A） | 24 | 1 (1.0) | 6 (.9) | 14 (2.0) | 3 (1.8) | .10 |
| Val92Met（284G→A） | 146 | 6 (6.3) | 58 (8.3) | 62 (8.7) | 20 (11.8) | .004 |
| Arg142His（425G→A） | 13 | 0 (.0) | 4 (.6) | 7 (1.0) | 2 (1.2) | .41 |
| Arg151Cys（451C→T） | 133 | 1 (1.0) | 27 (3.9) | 60 (8.4) | 25 (14.7) | <.0001 |
| Arg160Trp（478C→T） | 189 | 7 (7.3) | 53 (7.6) | 97 (13.6) | 32 (18.8) | <.0001 |
| Arg163Gln（488G→A） | 75 | 4 (4.2) | 29 (4.2) | 34 (4.8) | 8 (4.7) | .22 |
| His260Pro（779A→C） | 13 | 1 (1.0) | 5 (.7) | 5 (.7) | 2 (1.2) | .61 |
| Asp294His（880G→C） | 19 | 0 (.0) | 6 (.9) | 8 (1.1) | 5 (2.9) | .02 |
| 其他b条 | 67 | 5 (5.2)
| 27 (3.9)
| 31 (4.3)
| 4 (2.4)
| .58 |
| | 频率（%）
| |
| 全部 | | 35.5 | 39.2 | 54.7 | 68.8 | |
在838名参与者中，244人（29.1%）没有MC1R基因变异，379人（45.2%）有一个MC1R变异，208人（24.8%）有两个MC1R基因变异，7人（0.9%）有三个MC1R-基因变异。具有两个变异等位基因的组包括29个纯合子和179个复合杂合子。在具有两个变异等位基因的受试者中，MC1R基因变异组合的频率与根据变异的等位基因频率计算的预期频率没有实质性差异（数据未显示）。因此，在研究中发现的MC1R基因变体可以被视为独立变体，因此，进行了分析。
Arg151Cys和Arg160Trp变异等位基因与白皙皮肤密切相关(P（P）<.0001). 变异体Val60Leu、Val92Met和Asp294His与皮肤类型弱相关(). Arg142His、Arg151Cys、Arg160Trp和Asp294His与红发密切相关(P（P）<.0001），而Asp84Glu和His260Pro与红发的相关性较小(P（P）=.004和P（P）分别为.008）。未发现任何MC1R基因变异与眼睛颜色之间的关联（数据未显示）。
所有MC1R基因变异组合与非黑色素瘤皮肤癌的相关性
显示了MC1R基因变体在三个非黑色素瘤皮肤癌组和对照组中的分布。大多数变异在皮肤癌组中的比例过高。因此，我们对MC1R基因变体和非黑色素瘤皮肤癌组进行了首次分析，并将所有变体合并。
MC1R基因变体在对照组和三个非黑色素瘤皮肤癌组中的分布。黑色条表示对照受试者；阴影条表示鳞状细胞癌患者；斜线条表示结节性基底细胞癌患者；而未填充的条表示患者患有浅表多灶性基底细胞癌。
计算暴露ORs，以探讨是否存在一个或两个MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌风险升高相关。显示MC1R基因变异与鳞状细胞癌、结节性和浅表性多灶性基底细胞癌相关。
表3
根据皮肤类型分层的MC1R基因变异对非黑色素瘤皮肤癌风险的影响
| 癌症和基因型或比较一 | 皮肤类型I–IV | 皮肤类型 I和II | 皮肤类型 III和IV | 合并OR（95%CI） b条 |
| 个人数量
| |
| 控制
| 患者
| 控制
| 患者
| 控制
| 患者
| |
| 鳞状细胞癌： | | | | | | | |
| 重量/重量 | 137 | 26 | 50 | 15 | 87 | 11 | |
| 重量/变化 | 174 | 74 | 79 | 44 | 95 | 30 | |
| 无功/无功 | 74
| 53
| 51
| 41
| 23
| 12
| |
| OR（95%置信区间）
| |
| 重量/变量vs.重量/重量 | 2.24 (1.32–3.81) | 1.86 (.89–3.91) | 2.50 (1.12–5.67) | 2.13 (1.25–3.68) |
| Var/Var与WT/WT | 3.77 (2.11–6.78)
| 2.68 (1.25–5.80)
| 4.13 (1.47–11.70)
| 2.91 (1.62–5.58) |
| 个人数量
| |
| 控制
| 患者
| 控制
| 患者
| 控制
| 患者
| |
| 结节性基底细胞癌： | | | | | | | |
| 重量/重量 | 137 | 72 | 50 | 30 | 87 | 42 | |
| 重量/变化 | 174 | 124 | 79 | 65 | 95 | 59 | |
| 无功/无功 | 74
| 88
| 51
| 66
| 23
| 22
| |
| OR（95%置信区间）
| |
| WT/Var与WT/WT | 1.36 (.92–1.99) | 1.37 (.76–2.49) | 1.29 (.76–2.17) | 1.32 (.89–1.95) |
| Var/Var与WT/WT | 2.26 (1.45–3.52)
| 2.16 (1.16–4.03)
| 1.98 (.94–4.19)
| 1.98 (1.23–3.19) |
| 个人数量
| |
| 控制
| 患者
| 控制
| 患者
| 控制
| 患者
| |
| 浅表多灶性基底细胞癌： | | | | | | | |
| 重量/重量 | 137 | 27 | 50 | 10 | 87 | 17 | |
| 重量/变化 | 174 | 65 | 79 | 31 | 95 | 34 | |
| 变量/变量 | 74
| 50
| 51
| 42
| 23
| 8
| |
| OR（95%置信区间）
| |
| 重量/变量vs.重量/重量 | 1.90 (1.12–3.23) | 1.96 (.83–4.71) | 1.83 (.91–3.70) | 1.87 (1.09–3.21) |
| Var/Var与WT/WT | 3.43 (1.92–6.15) | 4.12 (1.76–9.86) | 1.78 (.61–5.09) | 2.82 (1.45–5.22) |
测试假设1
对白皙和深色皮肤以及有红头发和无红头发的受试者进行分层分析，以验证MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌之间的关联是通过白皙皮肤和红头发介导的这一假设。MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌之间的正相关关系通常在白皙和深色皮肤层中都存在()在有和无红头发的地层中（数据未显示），结果表明MC1R基因变体的存在是非黑色素瘤皮肤癌的风险因素，与白皙皮肤和红头发无关。然而，与浅色皮肤相比，深色皮肤的受试者患浅表性多灶性基底细胞癌的风险似乎更低（即，分别为1.78和4.12）(). 不幸的是，在这个亚组分析中，广泛的CI表明，个体数量太少，无法得出结论，即MC1R基因变异与浅表多灶性基底细胞癌之间的联系在皮肤白皙和深色的受试者中是不同的。也不可能得出基底细胞癌与鳞状细胞癌的行为不同的结论。可以想象，在皮肤较深的受试者中，携带两种MC1R基因变体的浅表多灶性基底细胞癌的相对风险较低是偶然造成的。使用Mantel-Haenszel测试调整皮肤类型的合并OR仅略低于粗OR()，这也有力地支持了MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌之间的关联与皮肤类型无关的结论。
测试假设2
白皙皮肤（I型和II型皮肤）与深色皮肤（III型和IV型皮肤）相比，患鳞状细胞癌的风险为2.15（95%可信区间1.43–3.23）。对于结节性基底细胞癌和浅表性多灶性基底细胞瘤，这些数字分别为1.49（1.08–2.05）和1.60（1.07–2.41）。在所有三个MC1R-gene层中，白皙的皮肤仍然是非黑色素瘤皮肤癌的风险因素，这表明白皙皮肤是非黑素瘤皮肤癌独立于MC1R基因变异的风险因素。对红头发受试者进行的分析显示出类似的结果（数据未显示）。
测试假设3
通过分析MC1R基因变异与不同类型非黑色素瘤皮肤癌之间的相关性，以及白皙皮肤、红发和非黑色素癌之间的关系，我们得出结论，MC1R的基因变异、白皙肌肤和红发是非黑色素肿瘤皮肤癌的独立危险因素。
不同MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌的关系
显示了对单个MC1R变异等位基因的单独分析。列出了杂合子、复合杂合子和纯合子与野生型等位基因纯合子受试者相比的皮肤癌风险。一般来说，所有MC1R基因变异都与非黑色素瘤皮肤癌风险增加相关，尽管并没有达到所有比较的统计显著性，尤其是在检测不太流行的等位基因时。总的来说，Asp84Glu、His260Pro和Asp294His变异等位基因的携带者患非黑色素瘤皮肤癌的相对风险最高。Val60Leu、Val92Met、Arg142His、Arg151Cys和Arg160Trp变异等位基因携带者的风险稍低。Arg163Gln变异等位基因携带者的相对风险最低，在任何比较中均未达到统计学意义。
表4
MC1R-V变异等位基因杂合子、复合杂合子和纯合子与野生型等位基因纯合子比较鳞癌、结节性和浅表性多灶性基底细胞癌的相对风险[注]
| 患有以下疾病的个体的风险（95%CI）
|
| 鳞状细胞癌
| 结节性基底细胞癌
| 浅表多灶基底细胞癌
|
| 等位基因 | 杂合子 | Cpd杂合子和纯合子 | 杂合子 | Cpd杂合子和纯合子 | 杂合子 | Cpd杂合子和纯合子 |
| WT纯合子 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| Val60亮氨酸 | 1.3 (.52–3.0) | 5.0 (2.2–11.4) | 1.1 (.61–2.1) | 3.4 (1.8–6.7) | 1.6 (.70–3.5) | 4.3 (1.9–10.0) |
| 天冬氨酸84Glu | 7.0 (1.2–42.6) | 7.9 (1.0–71.9) | 4.4 (.99–22.4) | 5.7 (1.0–42.1) | 3.4 (.37–26.6) | 10.2 (1.5–84.7) |
| Val92Met公司 | 2.4 (1.0–5.4) | 3.1 (1.3–7.5) | 1.4 (.70–2.6) | 2.8 (1.4–5.4) | 1.5 (.58–3.7) | 3.5 (1.5–8.1) |
| Arg142His公司 | 0 (0–12.6) | 3.5 (.39–27.7) | 0 (0–4.4) | 1.9 (.30–12.2) | 0 (0–12.1) | 6.8 (1.2–41.0) |
| Arg151Cys（精氨酸151Cys） | 2.2 (.79–6.1) | 5.6 (2.4–12.9) | 1.8 (.84–3.9) | 2.8 (1.4–5.6) | 2.4 (.89–6.4) | 4.5 (1.9–10.7) |
| 精氨酸160Trp | 2.2 (1.1–4.6) | 4.4 (2.1–9.1) | 1.2 (.68–2.2) | 1.5 (.77–2.8) | 2.3 (1.1–4.6) | 3.6 (1.7–7.6) |
| Arg163Gln公司 | 1.8 (.56–5.3) | 1.2(.31–4.1) | 0.95 (.37–3.4) | 1.2 (.48–2.8) | 2.0 (.67–5.6) | 2.0 (.67–5.6) |
| His260专业版 | 7.9 (1.0–71.9) | 5.2 (.0–200.4) | 2.9 (.38–25.0) | 7.6 (.78–182.2) | 2.5 (.0–37.7) | 5.1 (.0–192.7) |
| Asp294His公司 | 4.0 (.65–22.7) | 26.4 (2.8–621.5) | 0.95 (.12–6.2) | 7.6 (.78–182.2) | 1.3 (.20–7.2) | 10.2 (.69–294.0) |
只有Arg151Cys和Arg160Trp变异等位基因与白皙皮肤强相关，而Val60Leu、Asp84Glu、Val92Met、Arg142His、His260Pro和Asp294His变异等位蛋白与白嫩皮肤弱相关或不相关(). 然而，所有这些变异等位基因都与皮肤癌相关()这是另一个有力的论点，即皮肤类型和非黑色素瘤皮肤癌风险是MC1R基因变异存在的独立结果。对于红头发，也有类似的观点。
MC1R基因变异与多发性皮肤肿瘤的关系
为了研究MC1R基因变异携带者是否增加了罹患多发性非黑色素瘤皮肤癌的风险，将所有患者分组，不考虑肿瘤类型，并根据肿瘤数量将其分为三组：一个肿瘤组、两到四个肿瘤组，以及患有五个或五个以上肿瘤的患者。MC1R基因变异的存在与较高数量的皮肤肿瘤显著且独立相关(). 随后对每种类型的皮肤癌分别进行的分析表明，这种影响主要是由鳞状细胞癌和浅表多灶性基底细胞癌的发生引起的（数据未显示）。
表5
基于MC1R基因变异的一种或多种非黑色素瘤皮肤癌风险
| 一个皮肤肿瘤 | 2到4个皮肤肿瘤 | 五种或更多皮肤肿瘤 |
| 个人数量
|
| 基因型或比较 | 控制 | 患者 | 控制 | 患者 | 控制 | 患者 |
| 重量/重量 | 137 | 69 | 137 | 30 | 137 | 8 |
| 重量/变化 | 174 | 112 | 174 | 73 | 174 | 20 |
| 变量/变量 | 74
| 69
| 74
| 48
| 74
| 24
|
| OR（95%置信区间）
|
| 重量/变量vs.重量/重量 | 1.28 (.86–1.89) | 1.92 (1.15–3.19) | 1.97 (.79–5.03) |
| Var/Var与WT/WT | 1.85 (1.17–2.94) | 2.96 (1.68–5.25) | 5.55 (2.24–14.22) |
讨论
迄今为止，白皙的皮肤和红色的头发被认为是非黑色素瘤皮肤癌和恶性黑色素瘤风险增加的最重要的基因决定指标（Kricker等人。1991; Bliss等人。1995). 然而，在本研究中，我们证明了MC1R基因变体的存在在调节个人罹患所研究的三种非黑色素瘤皮肤癌中任何一种的风险方面也很重要。虽然可以令人信服地证实MC1R基因变异与白皙皮肤和红发之间的紧密联系，但我们的分析也表明，这些因素并没有实质性影响MC1R变异与非黑素瘤皮肤癌之间的联系，这一结果破坏了假设1：非黑色素瘤皮肤癌风险的增加是通过色素沉着表型介导的。
另一方面，白皙皮肤和红发与非黑色素瘤皮肤癌的相关性不受MC1R基因变异的影响。这排除了假设2的可能性，即白皙的皮肤和红色的头发仅仅是MC1R基因变异存在的指示器，而后者才是皮肤癌的真正危险因素。
因此，我们得出结论，MC1R基因变异、白皙皮肤和红发是非黑色素瘤皮肤癌的独立危险因素（从而验证假设3）。这一结论与最近的一项研究一致，在该研究中，发现MC1R基因变体Arg151Cys、Arg160Trp和Asp294His与澳大利亚人群中的皮肤恶性黑色素瘤相关，并且这种关联在中等肤色或橄榄色/深色肤色的个体中持续存在（Palmer等人。2000).
目前的数据表明，MC1R不仅在皮肤恶性黑色素瘤的发病机制中起着重要作用，而且在皮肤鳞状细胞癌和所研究的两种类型的基底细胞癌的发病机理中也起着重要的作用。皮肤较深（皮肤类型III和IV）的受试者中携带两种MC1R基因变体的患者，与皮肤较浅（皮肤类型I和II）的患者相比，患浅表多灶性基底细胞癌的风险较低。不幸的是，该亚组分析中的个体数量太少，无法确定观察到的两种皮肤类型之间的差异是否代表真正的差异，还是偶然发生的差异。
对单个MC1R变异等位基因的单独分析表明，所有更常见的变异等位蛋白都与非黑色素瘤皮肤癌风险增加有关。Asp84Glu、His260Pro和Asp294His变异等位基因的携带者患非黑色素瘤皮肤癌的相对风险最高，而Val60Leu、Val92Met、Arg142His、Arg151Cys和Arg160Trp变异等位携带者的风险仅略低。除Arg151Cys和Arg160Trp变异等位基因外，这些等位基因与白皙皮肤弱相关或不相关，这进一步说明白皙肌肤和非黑素瘤皮肤癌是MC1R基因变异的独立结果。类似的论点也适用于红发。
一些MC1R基因变体与白皙的皮肤和红发有关，具有这种色素沉着表型的个体在α-MSH刺激后，主要在黑素细胞中合成酚黑素而非真黑素（Thody等人。1991). 真黑色素具有光保护作用，但黑色素可能通过产生自由基对紫外线辐射作出反应而导致皮肤致癌（Ranadive等人。1986). 自由基和其他活性氧物种被发现会导致多种类型的DNA损伤，包括单链和双链DNA断裂，这与癌症等病理过程有关（Shackelford等人。2000). 然而，我们的研究表明，非黑色素瘤皮肤癌风险的增加可能不是通过色素沉着表型介导的。因此，除色素代谢外，MC1R基因变异与非黑色素瘤皮肤癌易感性之间的关系还必须涉及其他机制。
大量文献表明，α-MSH和其他POMC肽具有免疫调节和抗炎功能（Wintzen和Gilchrest，1996; Luger等人。1997). 在小鼠模型中，α-MSH能够抑制接触性超敏反应的诱导，并诱导半抗原特异性耐受（Luger等人。1999). 此外，α-MSH已被证明在调节转录因子NFκB中发挥作用，该转录因子调节参与免疫和炎症反应的基因产物的表达，如细胞因子及其受体（Kalden等人。1999). 紫外线诱导α-MSH和其他POMC肽的释放，并上调表皮中MC1R的表达（Chakraborty等人。1995和1996)表明α-MSH可能在调节紫外线辐射和炎症刺激的反应中起作用，并且α-MSH可能有助于紫外线介导的免疫抑制（Luger等人。1999).
研究表明，α-MSH和其他POMC肽影响黑素细胞和黑色素瘤细胞的生长和发育（Lunec等人。1990; Lunec等人。1992; De Luca等人。1993; Suzuki等人。1996)以及人类角质形成细胞（Slominski等人。1991). 角质形成细胞中的分化驱动热休克蛋白70被α-MSH下调，使其对氧化应激更敏感（Orel等人。1997). 最近，还发现在角质形成细胞分化过程中，POMC肽及其特异性受体的表达上调，这可能表明α-MSH是介体网络的一部分，不仅调节皮肤炎症，而且在过度增殖性皮肤病中发挥作用（Chakraborty等人。1999一). 总之，我们已经表明MC1R基因变体的存在是一个重要的独立遗传风险因素，有助于皮肤癌的风险。
致谢
我们感谢所有自愿、热情参与本研究的患者和对照组受试者，感谢Viña Williams-Snijders批判性地审阅了手稿。这项工作得到了荷兰Zorg Onderzoek的资助。
工具书类
Abdel-Malek Z，Suzuki I，Tada A，Im S，Akcali C（1999）黑素皮质素-1受体与人类色素沉着。纽约州科学院年鉴885:117–133[公共医学][谷歌学者] Bastiaens MT、Hoefnagel JJ、Bruijn JA、Westendorp RGJ、Vermeer BJ、Bouwes Bavinck JN（1998）结节性和浅表性基底细胞癌的年龄、部位分布和性别差异表明肿瘤类型不同。《皮肤病投资杂志》110:880–884[公共医学][谷歌学者] Bliss JM、Ford D、Swerdlow AJ、Armstrong BK、Cristofolini M、Elwood JM、Green A、Holly EA、Mack T、MacKie R、Østerlind A、Walter SD、Peto J、Easton DF（1995）与色素沉着特征和雀斑相关的皮肤黑色素瘤风险：10项病例对照研究的系统综述。国际癌症杂志62:367–376[公共医学][谷歌学者] Box NF，Wyeth JR，O'Gorman LE，Martin NG，Sturm RA（1997），红头发双胞胎中黑素细胞刺激激素受体变异等位基因的特征。《人类分子遗传学》6:1891–1897[公共医学][谷歌学者] Chakraborty AK、Funasaka Y、Pawelek JM、Nagahama M、Ito A、Ichihashi M（1999年一)正常人角质形成细胞分化过程中黑素皮质素-1受体（MC1R）表达增强：表皮基底层附近POMC肽表达增加的证据。投资皮肤杂志112:853–860[公共医学][谷歌学者] 查克拉博蒂AK、福纳萨卡Y、斯洛明斯基A、博洛尼亚J、索迪S、一桥M、帕韦列克JM（1999）b条)紫外线和MSH受体。纽约科学院安855:100–116[公共医学][谷歌学者] Chakraborty A，Funasaka Y，Slominski A，Ermak G，Hwang J，Pawelek J，Ichihashi M（1996）培养中的人类黑素细胞和角质形成细胞产生和释放原阿片黑皮素（POMC）衍生肽：紫外线B的调节。生物化学学报1313:130–138[公共医学][谷歌学者] Chakraborty A，Pawelek J（1993）永生化人类表皮角质形成细胞中的MSH受体：表皮黑色素单位协调调节的潜在机制。细胞生理杂志157:344–350[公共医学][谷歌学者] Chakraborty A、Slominski A、Ermak G、Hwang J、Pawelek J（1995）紫外线B和黑素细胞刺激激素（MSH）刺激小鼠黑色素瘤细胞和转化角质形成细胞中α-MSH受体和前阿片黑皮素衍生肽的mRNA生成。皮肤病学杂志105:655–659[公共医学][谷歌学者] Cone R、Lu D、Chen W、Koppula S、Vage DI、Klungland H、Boston B、Orth DN、Pouton C、Kesterson RA（1996）《黑素皮质激素受体：激动剂、拮抗剂和色素沉着的激素控制》。记录程序Horm Res 51:287–318[公共医学][谷歌学者] De Luca M、Siegrist W、Bondanza S、Mathor M、Cancedda R、Eberle AN（1993），α-黑素细胞刺激激素（α-MSH）通过与高亲和力受体结合刺激正常人类黑素细胞生长。细胞科学杂志105:1079–1084[公共医学][谷歌学者] Fitzpatrick TB（1988）I型至VI型阳光反应性皮肤的有效性和实用性。Arch Dermatol 124:869–871[公共医学][谷歌学者] Flanagan N、Healy E、Ray A、Philips S、Todd C、Jackson IJ、Birch-Machin MA、Rees JL（2000）黑素皮质素1受体（MC1R）基因对人类色素沉着的多效性作用。Hum Mol基因9:2531–2537[公共医学][谷歌学者] Frändberg PA，Muceniece R，Prusis P，Wikberg J，Chhajlani V（1994）α-MSH及其立体异构体[Nle4，Dphe7]-α-MSH-在黑素皮质素-1受体上交替附着点的证据。生物化学与生物物理研究通讯202:1266–1271[公共医学][谷歌学者] Frändberg PA，Doufexis M，Kapas S，Chhajlani V（1998）人类色素沉着表型：点突变产生非功能性MSH受体。生物化学与生物物理研究通讯245:490–492[公共医学][谷歌学者] Gantz I、Konda Y、Tashiro T、Shimoto Y、Miwa H、Munzert G、Watson SJ、DelValle J、Yamada T（1993）新型黑素皮质激素受体的分子克隆。生物化学杂志268:8246–8250[公共医学][谷歌学者] Healy E、Todd C、Jackson IJ、Birch-Machin M、Rees JL（1999）《皮肤类型、黑色素瘤和黑素皮质素1受体变体》。投资皮肤杂志112:512–513[公共医学][谷歌学者] Hunt G、Kyne S、Wakamatsu K、Ito S、Thody AJ（1995）Nle4DPhe（DPhe）7α-MSH增加培养的人类黑素细胞中的真黑素：黑色素比率。投资皮肤杂志104:83–85[公共医学][谷歌学者] Ichii-Jones F、Ramachandran S、Lear J、Smith A、Bowers B、Ollier WER、Jones P、Fryer AA、Strange RC（1999）《黑素细胞刺激激素受体多态性：V92M和A294H等位基因与基底细胞癌的关联》。《临床医学杂志》282:125–134[公共医学][谷歌学者] Kalden DH，Scholzen T，Brzoska T，Luger TA（1999）α-MSH抗炎作用的机制：转录因子NfκB的作用和粘附分子的表达。纽约州科学院年鉴885:254–261[公共医学][谷歌学者] Koppula SV、Robbins LS、Lu DS、Baack E、White CR、Swanson NA、Cone RD（1997）人类MSH受体（MC1R）编码序列中常见多态性的鉴定及其可能的生物效应。Hum变种9:30–36[公共医学][谷歌学者] Kricker A、Armstrong BK、English DR、Heenan PJ（1991）非黑色素细胞性皮肤癌的色素和皮肤风险因素：一项病例对照研究。国际癌症杂志48:650–662[公共医学][谷歌学者] Kricker A，Armstrong BK，English DR（1994）太阳照射和非黑色素细胞皮肤癌。癌症原因控制5:367–392[公共医学][谷歌学者] Luger TA、Scholzen T、Grabbe S（1997）《α-黑素细胞刺激激素在皮肤生物学中的作用》。《调查皮肤症状杂志》第2期第87–93页[公共医学][谷歌学者] Luger TA、Scholzen T、Brzoska T、Becher E、Slominski A、Paus R（1998），皮肤免疫调节和α-黑素细胞刺激激素对皮肤应激反应的协调。纽约科学院年鉴840:381–394[公共医学][谷歌学者] Luger TA、Schwartz T、Kalden H、Scholzen T、Schwarz A、Brzoska T（1999）表皮细胞衍生的α-黑素细胞刺激激素在紫外线介导的局部免疫抑制中的作用。纽约州安学院科学885:209–216[公共医学][谷歌学者] Lunec J，Pieron C，Sherbet GV，Thody AJ（1990），黑色素瘤细胞中α-黑素细胞刺激激素免疫反应。病理生物学58:193–197[公共医学][谷歌学者] Lunec J，Pieron C，Thody AJ（1992）B16黑色素瘤中MSH受体的表达及其与黑色素生成和转移活性的关系。黑色素瘤研究2:5-12[公共医学][谷歌学者] Magenis RE、Smith L、Nadeau JH、Johnson KR、Mountjoy KG、Cone RD（1994）小鼠和人类ACTH、MSH和神经（MC3和MC4）黑素皮质激素受体的定位。哺乳动物基因组5:503–508[公共医学][谷歌学者] Miller SA、Dykes DD、Polesky HF（1988）从人类有核细胞中提取DNA的简单盐析程序。核酸研究16:1215[PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] Mountjoy KG、Robbins LS、Mortrud MT、Cone RD（1992）编码黑素皮质素受体的基因家族的克隆。科学257:1248–1251[公共医学][谷歌学者] Orel L、Simon MM、Karsleder J、Bhardwaj R、Trautinger F、Schwarz T、Luger TA（1997），α-黑素细胞刺激激素下调角质形成细胞中分化驱动的热休克蛋白70的表达。《皮肤病杂志》108:401–405[公共医学][谷歌学者] Orita M，Suzuki Y，Sekiya T，Hayashi K（1989）使用聚合酶链反应快速、敏感地检测点突变和DNA多态性。基因组学5:874–879[公共医学][谷歌学者] Palmer JS、Duffy DL、Box NF、Aitken JF、O'Gorman LE、Green AC、Hayward NK、Martin NG、Sturm RA（2000）黑素皮质素-1受体多态性和黑色素瘤风险：这种关联仅由色素沉着表型解释吗？美国人类遗传学杂志66:176–186[PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] Preston DS，Stern RS（1992），皮肤非黑色素瘤癌。《新英格兰医学杂志》327:1649–1662[公共医学][谷歌学者] Ranadive NS，Shirwadkar S，Persad S，Menon IA（1986）黑色素诱导的自由基对分离的大鼠腹腔肥大细胞的影响。J投资皮肤病86:303–307[公共医学][谷歌学者] Rees JL、Healy E（1997），黑素皮质激素受体、红发和皮肤癌。《调查皮肤症状杂志》2:94–98[公共医学][谷歌学者] Robbins LS、Nadeau JH、Johnson KR、Kelly MA、Roselli-Rehfush L、Baack E、Mountjoy KG、Cone RD（1993），可变延伸位点等位基因的色素沉着表型是由改变MSH受体功能的点突变引起的。手机72:827–834[公共医学][谷歌学者] Schiöth HB、Phillips SR、Rudzish R、Birch-Machin MA、Wikberg JES、Rees JL（1999）人类黑素皮质素1受体的功能缺失突变很常见，并且与红发有关。生物化学与生物物理研究通讯260:488–491[公共医学][谷歌学者] Shackelford RE，Kaufmann WK，Paules RS（2000）氧化应激和细胞周期检查点功能。自由基生物医药28:1387–1404[公共医学][谷歌学者] Slominski A，Paus R，Wortsman J（1991）一些黑色素营养素能调节角质形成细胞增殖吗？投资皮肤杂志97:747[公共医学][谷歌学者] Smith R、Healy E、Siddiqui S、Flanagan N、Steijlen PM、Rosdahl I、Jacques JP、Rogers S、Turner R、Jackson IJ、Birch Machin MA、Rees JL（1998）《爱尔兰人群中的黑色素沉着素1受体变体》。投资皮肤杂志111:119–122[公共医学][谷歌学者] 铃木一世、Cone RD、Sungbin IM、Nordlund J、Abdel-Malek ZA（1996），促黑素激素与人类黑素细胞上的黑素皮质激素受体MC1R的结合刺激增殖和黑素生成。内分泌137:1627–1633[公共医学][谷歌学者] Thody AJ，Graham A（1998）α-MSH是否在调节人类皮肤色素沉着中起作用？色素细胞研究11:265–274[公共医学][谷歌学者] Thody AJ、Higgins EM、Wakamatsu K、Ito S、Burchill SA、Marks JM（1991）人类表皮中存在黑色素和真黑素。《皮肤病杂志》97:340–344[公共医学][谷歌学者] Valverde P、Healy E、Jackson I、Rees JL、Thody AJ（1995），黑素细胞刺激激素受体基因的变体与人类的红发和白皙皮肤有关。《自然遗传学》11:328–330[公共医学][谷歌学者] Valverde P，Healy E，Sikkink S，Haldane F，Thody AJ，Carothers A，Jackson IJ，Rees JL（1996）黑素皮质素1受体（MC1R）的Asp84Glu变体与黑色素瘤有关。人类分子遗传学5:1663–1666[公共医学][谷歌学者] Wintzen M，Gilchrest BA（1996），前阿片白素皮质素及其衍生肽和皮肤。《皮肤病杂志》106:3–10[公共医学][谷歌学者] 
