PAT4与高尔基体上的Rab1A和mTORC1相互作用。A类HEK-293细胞中的GFP-PAT4融合蛋白（绿色）在转高尔基体上显示出与HCT116细胞相似的亚细胞定位（TGN46；红色）。在图8D中，用相同的标记物对具有更高分辨率的替代细胞进行染色。B类，Rab1A（蓝色）主要定位于顺高尔基体上，由GM130标记（红色）标记。C类,就地邻近连接分析（PLA；红色）揭示了Rab1A（蓝色）和GFP-PAT4（绿色）之间的相互作用，主要与含有GFP-PAT_4的隔间有关（GFP-PAT3和PLA信号之间的重叠在合并图中为黄色，右上角；箭头）。PLA信号也与Rab1A集中在Rab1A和PLA合并处的隔间相邻并部分重叠，右下面板。Rab1A/PAT4 PLA信号仅在GFP-PAT4表达细胞中观察到（参见补充图S5B).D类，一些GFP-PAT4/Rab1a PLA阳性相互作用小室（红色）也部分或全部被转高尔基体网络标记TGN46（蓝色；箭头）标记，但不是缺少GFP-PAT_4的转高尔基区域。E类，PLA（红色）显示mTOR（蓝色）和GFP-PAT4（绿色）之间的相互作用，部分与包含GFP-PAT_4的隔间重叠（黄色表示包含绿色和红色通道的合并，包括右上面板中的放大图像；箭头）。在低倍合并图像中，不表达GFP-PAT4的两个上部细胞没有发出PLA信号，表明该分析专门检测GFP-PAT_4/mTOR相互作用。蓝色和红色通道合并（右下方面板）显示，mTOR染色通常与PLA信号非常接近，但也在细胞内的许多其他位置发现。F类，PLA（红色）显示了Raptor和GFP-PAT4（绿色）之间的交互作用（红色），位于包含GFP-PAT3的隔间及其附近（绿色和红色通道合并中的黄色重叠，包括右上面板中的放大图像；箭头和箭头）。蓝色和红色通道合并（右下方面板）显示，一些PLA信号与trans-Golgi相邻或部分同位（TGN，蓝色；箭头），而其他信号则不相邻（箭头）。Raptor/GFP-PAT4 PLA信号仅在表达GFP-PAT4的细胞中观察到（参见补充图S5C). DAPI标记合并中A（蓝色）和B-F（白色）的细胞核。合并图像中的共焦通道如下所示：绿色（G）、蓝色（B）和红色（R）。比例尺为5μm。
