高血压。作者手稿；PMC 2019年11月1日提供。
以最终编辑形式发布为：
预防性维修识别码：项目经理6824419
尼姆斯：美国国立卫生研究院140889
抗纤维化作用N个-乙酰-丹毒-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸对醛固酮盐性高血压大鼠心脏和肾脏的影响
密歇根州底特律亨利福特医院生物统计和研究流行病学部（A.K.）高血压和血管研究部（H.P.，O.A.C.，F.Y.，N.-E.R.）；明尼苏达大学医学院（明尼阿波利斯）退伍军人事务医疗中心。
通信地址：Nour-Edine Rhaleb，PhD，高血压和血管研究部，Henry Ford Hospital，2799 West Grand Blvd，Detroit，MI 48202-2689。1belahrn处的gro.shfh 摘要
N个-乙酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）在体外不仅抑制造血细胞增殖，还抑制成纤维细胞增殖和胶原合成。Ac-SDKP还可防止肾血管性高血压（肾素依赖性）大鼠左心室（LV）胶原沉积和细胞增殖。然而，尚不清楚Ac-SDKP在肾素非依赖性高血压（醛固酮盐）模型中是否具有类似的作用。利用循环醛固酮（ALDO）水平慢性升高所造成的高血压大鼠心脏和肾脏纤维化模型，我们检测了Ac-SDKP对血压、心脏和肾脏的纤维化和肥大以及左心室和左肾中增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。未行肾切除的大鼠分为4组：（1）对照组饮用自来水，（2）大鼠饮用ALDO（0.75μg/h SC）和饮用水中1%NaCl/0.2%KCl（ALDO-盐），（3）接受ALDO-盐类+Ac-SDKP 400的大鼠μ克·千克–1·天–1SC和（4）接受ALDO-盐+Ac-SDKP 800的大鼠μ克·千克–1·d日–1SC.治疗6周后，发现ALDO-盐组血压显著升高，体重和血浆肾素浓度降低(对<0.05），左心室和肾脏肥大以及肾损伤，心室和肾脏中的胶原含量显著增加，左心室中的胶原体积分数增加(对<0.0001），LV和肾脏的间质和血管周围PCNA阳性细胞显著增加(对<0.0001). 800时的Ac-SDKPμ克·千克–1·d日–1显著预防心脏和肾脏纤维化(对<0.005），不影响血压或器官肥大。它还以剂量依赖的方式抑制了左心室和肾脏中PCNA的表达。我们得出的结论是，Ac-SDKP可防止ALDO盐高血压大鼠心脏和肾脏中胶原沉积和细胞增殖增加。由于ACE抑制剂增加血浆和组织Ac-SDKP，减少心脏和肾脏纤维化，我们推测Ac-SDKP可能参与ACE抑制剂的抗纤维化作用。
关键词：醛固酮、高血压、盐皮质激素、胶原蛋白、心脏、肾脏
N个-乙酰-芳基-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）是多能干细胞增殖的天然抑制剂1,2通常存在于人体血浆和循环单核细胞中三被NH裂解成非活性形式2-ACE的末端催化域。4有报道称，服用卡托普利（ACE抑制剂，ACEi）可防止内源性Ac-SDKP降解，并提高其循环和尿液浓度。4–6然而，Ac-SDKP的抗增殖作用并不局限于造血细胞。我们发现，Ac-SDKP不仅在体外抑制成年大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成，而且还减少了增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞的数量，并阻止了2肾1夹高血压大鼠左心室（LV）胶原沉积增强。7此外，Ac-SDKP为10–7到10–5mol/L显著降低血清诱导的肾成纤维细胞增殖。100 nmol/L卡托普利（ACEi）或10–8mol/L Ac-SDKP，但通过联合治疗显著降低。8在其他研究中，ACEi显著减轻了心肌梗死所致心力衰竭大鼠的心肌纤维化，9在自发性高血压大鼠中，10醛固酮（ALDO）盐处理大鼠11并通过脱氧皮质酮醋酸盐治疗预防大鼠肾纤维化12单侧输尿管梗阻。13因此，人们可能推测ACEi在心脏和肾脏中的抗纤维化作用部分由Ac-SDKP介导；然而，缺乏这方面的直接证据。
大鼠ALDO-盐性高血压的特点是心脏和肾脏间质胶原显著沉积，14,15与间质细胞增殖有关。16为了验证我们的假设，即Ac-SDKP可防止心脏和肾脏中的胶原蛋白沉积和细胞增殖，我们研究了其对ALDO-盐性高血压（肾素非依赖性）大鼠血压和肾脏损伤以及心脏和肾脏肥大、胶原蛋白沉积以及细胞增殖（PCNA表达）的影响。
方法
动物与实验设计
12周龄雄性Sprague-Dawley大鼠（SD；350至375 g；Charles River）用甲氨蝶呤钠（50 mg/kg IP；Breviate，Lilly）麻醉，并切除左肾。d日-醛固酮（ALDO，0.75μ克/小时；Sigma Chemical Co）单独或联合Ac-SDKP通过渗透微型泵（Alzet 2 ML4）皮下注射6周。将ALDO溶解于0.9%NaCl和5 mL/L乙醇中，给接受ALDO的大鼠1%NaCl/0.2%KCl饮用。对照组大鼠也进行了单肾切除。动物分为4组：（1）对照组饮用自来水(n个=12），（2）ALDO-盐+车辆(n个=13），（3）ALDO-盐+Ac-SDKP（400μ克·千克–1·d日–1)(n个=13）和（4）ALDO-盐+Ac-SDKP（800μ克·千克–1·d日–1)(n个=12）。在我们之前的研究中，Ac SDKP为400μ克·千克–1·d日–1显著预防2肾1夹大鼠心脏纤维化；此外，血浆Ac-SDKP在Ac-SDKP中几乎增加了一倍（400和800μ克·千克–1·d日–1)-治疗组大鼠与溶媒比较，仅在800时达到显著水平μ克·千克–1.d日–1因此，在本研究中，我们选择了这两种剂量。这项研究得到了亨利·福特医院实验动物护理委员会的批准。
收缩压测量和样本采集
每周两次测量收缩压（SBP），共6周。治疗6周后，用50 mg/kg戊巴比妥钠麻醉动物，并在肝素化管中收集主动脉血；它在2000年被离心分离克在4°C下保存15分钟，血浆在-70°C下储存，直到测量血浆肾素浓度（PRC）。心脏在舒张期停止，脑室内注射15%KCl，然后与右肾一起迅速切除。称重左心室加室间隔（LV）、右心室（RV）、左、右心房和肾脏，从心尖到基底横切成3层。将一片切片快速冷冻在液氮中预冷的异戊烷中，并存储在-70°C下；另一个固定在10%福尔马林溶液中进行形态计量学研究；第三种保存在-20°C下，直到进行羟脯氨酸测定。将肾脏的四分之一固定在4%多聚甲醛溶液中进行组织学研究，并将其余四分之三的湿重≈50 mg冷冻并用于测量羟脯氨酸。
中华人民共和国
血浆（60μ五十） 在37°C的缓冲液（0.1 mol/L磷酸钠、0.02 mol/L Na2EDTA和0.05%PMSF pH 6.5）中与羊血管紧张素原孵育2小时。立即在水中煮沸10分钟，停止培养，并在1680离心混合物克15分钟，上清液在-20°C下保存，直到检测。用临床放射免疫试剂盒（DiaSorin）测量生成的血管紧张素I，结果表示为ng-Ang-I·mL血浆–1·小时–1.
羟脯氨酸测定
用羟脯氨酸法测定心肌和肾组织胶原含量。17为此，组织被冻干并称重，然后在0.1 mol/L NaCl和5 mmol/L NaHCO中均质三，用相同的溶液洗涤5次，并在110°C下用6N HCl水解16小时。样品经过过滤和真空干燥，然后溶解在蒸馏水中。羟脯氨酸含量用比色法和0至5的标准曲线测定μg羟脯氨酸。数据表示为μg胶原蛋白/mg干重，假设胶原蛋白平均含有13.5%的羟脯氨酸。18
左心室间质胶原体积分数的组织化学分析
10节μ在用3.3 U/mL V型神经氨酸酶（Sigma Chemical Co）预处理后，从每个冷冻切片上切下m厚的切片，分别用（1）荧光素标记的花生凝集素（Vector Laboratories）染色，以描绘肌细胞横截面积（肌细胞体积的指标）和间质空间（由胶原和毛细血管组成）和（2）罗丹明标记单叶灰树凝集素I（GSL I）仅显示毛细血管，因为GSL I选择性地与毛细血管结合。19,20从每个切片上切下两个切片，从每个切片中随机选择4个径向显微视野，并在放大×100倍的条件下用35mm胶片拍摄。用计算机辅助视频密度测定法（JAVA；Jandel）测量总表面积（显微镜视野）、间质空间（胶原+毛细血管）和仅毛细血管所占面积。间质胶原分数的计算方法为间质空间所占的总表面积百分比减去毛细血管所占的总表面积百分比。使用从所有8个领域获得的数据计算平均间质胶原分数。21
左心室和肾皮质PCNA的免疫组织化学染色
第4节μ将m厚的石蜡脱蜡，再水化，并在0.2%柠檬酸（pH 6.0）中煮沸10分钟，以回收抗原。在PBS中洗涤3次，每次5分钟，用封闭血清（1%正常血清）预培养30分钟，然后在室温下用抗PCNA的小鼠单克隆抗体（1:250稀释；Chemicon）培养30分钟。每个切片在PBS中清洗3次，PCNA用Vectastain ABC试剂盒（Vector Laboratories）进行分析。切片用二氨基联苯胺底物（载体）处理并用苏木精复染。对于每个样本，在高倍镜下（×400）检查左心室和肾脏皮质区的12个随机选择的区域。计算具有深棕色细胞核的增殖细胞，并将其表示为每个场PCNA阳性细胞的数量。
肾组织学
右肾用缓冲多聚甲醛（4%）固定，并用Masson三色和周期性酸-Schiff染色。作者之一（L.R.）以盲法对冠状切片进行组织学评估。肾小球损伤采用如上所述的半定量评分方法进行评估，根据肾小球受累的百分比，严重程度从0到4+分级。22肾小球损伤评分（GIS）是通过将严重程度评分的乘积与显示相同严重程度的肾小球百分比相加来计算的。22,23还测定了小管间质损伤（TII）。管腔扩张、间质纤维化和单核细胞浸润的半定量分级为0至5+，平均每节3至5个区域。22,23
统计分析
各组给予ALDO-salt+车辆，Ac-SDKP为400μ克·千克–1·d日–1，Ac-SDKP为800μ克·千克–1·d日–1使用Student的t吨对收缩压、心率、PRC、体重（BW）、左心室重量、心房重量、右心室重量、左心室和右心室胶原、胶原体积分数、左心室PCNA和肾脏PCNA等变量进行测试。由于进行了多次比较，Hochberg的方法用于调整α显著性水平。使用非参数方法分析异常分布变量：Wilcoxon双样本检验。这些变量包括肾脏重量、肾脏胶原蛋白和肾脏损伤评分。再一次α用Hochberg方法进行多重比较，调整显著性水平。数值表示为平均值±SEM。
结果
收缩压、心率、PRC、体重和器官重量
ALDO-salt治疗两周后，ALDO-salt/vehicle组的SBP(n个=13）与对照组相比显著增加(n个=12），在第三周达到最高水平，并在该平台上保持3周。400时的Ac-SDKP(n个=13）或800μ克·千克–1·d日–1(n个=12）持续6周对ALDO-盐治疗大鼠的高血压发展没有影响(). 所有4组的心率均无变化。治疗6周后，与对照组相比，ALDO盐治疗组的PRC显著降低，且不受Ac-SDKP的影响(). 对照组的体重明显高于其他3组(对<0.001) (). ALDO-盐/溶媒组LV重量显著增加，Ac-SDKP没有抑制这种增加。ALDO盐高血压大鼠的肾脏重量也显著增加，但不受Ac-SDKP的影响。4组间心房重量或右心室重量无显著差异().
Ac-SDKP治疗ALDO-盐性高血压SD大鼠的收缩压。Ac-SDKP对治疗后1至6周的SBP升高没有影响*对<0.001, †对与ALDO-盐+载体相比，所有组均<0.05。
表
6周后测量的收缩压、左心室重量、右心室重量、心房重量、肾脏重量、PRC和体重
| ALDO-Salt集团 | |
|---|
| |
|
|---|
| 参数 | 控制组 | 车辆 | Ac-SDKP（400
μ克·千克–1·d日–1) | Ac-SDKP（800
μ克·千克–1·d日–1) |
|---|
|
|---|
| 收缩压（毫米汞柱） | 122.9±1.3 | 186.0±4.9* | 188.5±8.7* | 176.8±7.2* |
| LV重量，mg | 949.8±85.0 | 1139.2±133.3* | 1154.4±144.2* | 1134.8±90.9* |
| RV重量，mg | 245.4±44.0 | 211.0±31.3 | 215.7±31.4 | 212.6±38.4 |
| 心房重量，mg | 63.7±10.1 | 63.9±9.6 | 64.3±16.2 | 64.9±11.3 |
| 肾重，mg | 2192.5±53.2 | 3618.0±192.9* | 3388.2±116.6* | 3383.0±123.3* |
| PRC，ng·mL−1·小时−1 | 12.8±2.2 | 3.5±0.8* | 2.1±0.6* | 4.0±0.4* |
| 体重，g | 504.9±26.1 | 374.9±72.9* | 372.9±44.8* | 398.4±32.9* |
左心室、右心室和肾脏的胶原蛋白含量
ALDO-盐/载体组的心室胶原显著增加（LV 12.0±1.5μg/mg干燥左心室，右心室11.0±1.1μg/mg干RV）与对照组（LV 7.1±1.1，RV 7.8±0.7）比较(对<0.0001），并且在800μ克·千克–1·d日–1（LV 9.4±2.1，RV 8.8±0.9；对<0.005) (). 我们还观察到溶媒组肾胶原显著增加（27.6±0.8μg/mg干肾）与对照组相比（21.2±0.7）(对<0.005），800时Ac-SDKP完全阻止μ克·千克–1·d日–1(20.1±1.1) (对<0.005) ().
Ac-SDKP治疗6周后，对照组和ALDO-盐性高血压大鼠（A）LV、（B）RV和（C）肾脏中的胶原沉积，以及LV的（D）胶原体积分数。载体组LV、RV和肾脏中的胶原蛋白含量显著增加。800时的Ac-SDKPμ克·千克–1·d日–1完全阻断肾脏胶原沉积增加，但仅部分阻断左室和右室胶原沉积。Ac-SDKP对LV胶原体积分数的影响与LV胶原含量的变化规律相同*对与对照组相比<0.005†对<0.005 vs ALDO-盐+车辆对<0.05 vs ALDO-盐+载具。
左心室间质胶原体积分数
组织化学分析表明，未经治疗的ALDO-salt大鼠左心室间质胶原体积分数显著增加(对<0.0001). 在接受Ac-SDKP治疗的ALDO-salt大鼠中显著降低（800μ克·千克–1·d日–1)(对<0.0001) ()确认胶原蛋白含量数据。
PCNA在左室和肾皮质的表达
对照组左心室间隙PCNA阳性细胞较少；然而，在ALDO盐处理的大鼠中，它们广泛分布在间质和血管周围空间。同样，在肾皮质中，对照组的肾小管上皮中也检测到少量PCNA阳性细胞，而在ALDO盐处理的大鼠中，它们很容易在肾小管内皮和间质中发现(). 肾小球中未发现PCNA阳性细胞。ALDO-盐/载体组LV和肾脏中PCNA阳性细胞显著增加(对<0.0001). Ac-SDKP治疗组LV间质、血管周围间隙和肾皮质中PCNA阳性细胞较少(对<0.01），尽管其发生频率仍高于对照组().
对照组、给予ALDO-salt+载体的大鼠和给予ALDO-salt+Ac-SDKP（400或800）的大鼠LV（A）和肾皮质（B）中PCNA阳性细胞（棕色）的免疫组织化学染色μ克·千克–1·d日–1)治疗后6周。苏木精复染，放大×400。
Ac-SDKP对ALDO-盐治疗6周的大鼠（A）LV间质和（B）肾皮质PCNA阳性细胞数量的影响。ALDO盐处理的LV和肾脏中PCNA阳性细胞明显多于对照组。与ALDO-盐+载体相比，Ac-SDKP以剂量依赖性方式降低PCNA阳性细胞的数量*对<0.0001 vs对照组†对<0.001 vs ALDO-盐+车辆对与ALDO-盐+载具相比，<0.01。
肾小球和肾小管间质损伤
ALDO-salt/vehicle大鼠肾小球和肾小管间质损伤的严重程度分别是对照组的62倍和1.6倍(对<0.005). Ac-SDKP倾向于以剂量依赖的方式预防这些损伤，尽管差异不显著().
Ac-SDKP对ALDO-盐性高血压大鼠（A）肾小球和（B）肾小管间质损伤的影响。ALDO盐诱导的肾小球和肾小管间质损伤(*对与对照组相比<0.001）。Ac-SDKP倾向于预防ALDO盐诱导的损伤，但差异不显著。
讨论
据报道，单侧肾切除大鼠循环中ALDO慢性过量，再加上高盐饮食，会导致高血压、左心室和肾脏肥大，心室和肾脏中的胶原蛋白沉积显著。15,16该模型以广泛的心脏和肾脏纤维化为特征，循环肾素-血管紧张素系统受到抑制，ACEi对心脏和肾脏具有抗纤维化作用，而对大鼠血压或心脏和肾脏肥大没有影响，11,24这一发现归因于组织肾素-血管紧张素系统被阻断。然而，其他因素如Ac-SDKP不应排除在这个过程中，因为Ac-SDKP抑制成纤维细胞增殖7,8；此外，它存在于ACE存在的组织中，并且几乎完全由ACE水解。4,5,25然而，缺乏Ac-SDKP参与的直接证据。
在本研究中，Ac-SDKP为800μ克·千克–1·d日–1在不影响血压或左室肥厚的情况下，显著预防了右室和左室纤维化。左心室间质胶原体积分数也证实了我们的发现。LV胶原沉积减弱而LV重量无变化不是新现象；其他人报道了螺内酯（一种ALDO受体拮抗剂），26卡托普利（一种ACEi）和坎地沙坦（一种AT1受体拮抗剂）24能够预防盐皮质激素高血压患者的心脏纤维化，但不能预防左室肥厚。我们的结果表明，胶原蛋白仅代表左心室干重的一小部分，这表明胶原蛋白含量的变化不应显著影响左心室重量。Brilla等人27据报道，在压力超负荷后，不仅肥厚的左心室中发现纤维化，而且在血压正常、非肥厚的右心室中也发现纤维化，因此，在该模型中，不考虑血压对胶原蛋白含量增加的贡献。在本研究中，只有高剂量Ac-SDKP（800μ克·千克–1·d日–1)阻止左心室胶原沉积增强；这是用于钝化2肾1夹高血压大鼠增加的LV胶原的两倍剂量。7这种差异的原因尚不清楚。Sun等人11结果表明，ALDO盐治疗4周后，主动脉内皮、主动脉瓣和两心室心肌内冠状动脉的ACE结合增加。6周时，两心室心肌离散区域的ACE活性也显著增加；这些部位对应于显微镜下的疤痕。这些数据表明Ac-SDKP脱分化不仅发生在血管系统中，也发生在间质中。有效剂量的增加可能是由于ALDO-盐性高血压大鼠ACE活性升高所致。11,28
如预期，观察到肾肥大和纤维化。ALDO-salt/vehicle大鼠肾小球和肾小管间质损伤的严重程度分别是对照组的62倍和1.6倍。Ac-SDKP显著抑制肾脏胶原沉积，但对肾脏肥大无影响。Yoshioka等人8据报道，Ac-SDKP（10–7到10–5摩尔/升）。因此，Ac-SDKP可能是肾成纤维细胞增殖的内源性调节剂。Ac-SDKP的肾脏保护作用可能部分归因于抑制肾脏中的细胞增殖和胶原沉积。
在纤维组织形成过程中，间质中富含成纤维细胞和浸润的单核细胞（巨噬细胞）。16,29在ALDO盐性高血压大鼠中，ALDO输注3至6周时，两个心室的间质细胞增殖，并且早在ALDO-盐治疗4周后，间质细胞就与随后的纤维化相关。16此外，据报道，输尿管梗阻所致损伤后肾间质细胞增殖增加，伴有胶原沉积增加。30PCNA是DNA聚合酶δ的一种36-kDa辅助蛋白，在整个细胞周期的细胞内以不同浓度存在，在S期达到最大值。31因此，它是细胞生长S期的指标，使其成为细胞增殖的标志。32在本研究中，我们在ALDO盐治疗的大鼠左心室中观察到弥漫性间质和血管周围PCNA阳性细胞，而在对照组中很少发现阳性细胞。同样，在对照组的肾小管上皮中检测到少量PCNA阳性细胞，而在ALDO盐处理的大鼠中，在肾小管内皮和间质中都很容易发现PCNA阳性的细胞。Ac-SDKP降低了接受ALDO-盐治疗的大鼠LV和肾皮质中PCNA染色阳性的细胞核数量，这可能表明它减弱了该模型中增强的心脏和肾脏细胞增殖。这些结果表明Ac-SDKP不仅阻止多能干细胞和肝细胞的增殖33也包括心脏成纤维细胞和肾细胞。ALDO-盐性高血压大鼠心脏和肾脏中观察到成纤维细胞增殖增加，并与心脏和肾脏纤维化相关。16,32Ac-SDKP的抗纤维化作用可能是由于抑制成纤维细胞增殖和胶原合成，因为在以前的体外研究中，我们发现Ac-SDKP不仅阻止成纤维细胞的增殖（根据三H-胸腺嘧啶掺入试验），但也通过羟脯氨酸试验评估胶原合成减弱（表示为μg胶原蛋白/mg蛋白质）和三H-脯氨酸掺入（以胶原合成百分比表示）。7
总之，通过Ac-SDKP治疗，大鼠慢性ALDO盐治疗导致的心脏和肾脏纤维化得到改善。在ALDO盐性高血压大鼠模型中，心脏和肾脏间质中的间质和血管周围PCNA阳性细胞明显增多，而心脏和肾脏纤维化明显。Ac-SDKP显著减少PCNA阳性细胞的数量并阻止胶原沉积，类似于在2肾1夹高血压大鼠（肾素依赖性高血压）中发现的有益作用。我们的研究强烈表明，Ac-SDKP通过抑制ALDO-盐性高血压中胶原蛋白的生成和细胞增殖来预防心脏和肾脏纤维化。因为ACEi增加血浆5和组织Ac-SDKP34减少心脏和肾脏纤维化，9–13我们推测Ac-SDKP可能参与ACEi的抗纤维化作用。
致谢
这项研究得到了AHA科学家发展基金0130128N和NIH基金HL-2898219的支持。
工具书类
1Lenfant M、Wdzieczak-Bakala J、Guittte E、Prome JC、Sotty D、Frindel E。造血多能干细胞增殖抑制剂的纯化及其结构测定.美国国家科学院程序. 1989;86: 779–782.[PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 2Bonnet D、Lemoine FM、Pontvert Delucq S、Baillou C、Najman A、Guigon M。四肽乙酰基-N-Ser-Asp-Lys-Pro（Seraspenide）对人CD34+亚群生长的直接可逆抑制作用.血液.1993年；82:3307–3314. [公共医学][谷歌学者] 3Pradelles P、Frobert Y、Créminon C、Liozon E、MasséA、Frindel E。酶免疫分析法检测人白细胞和血浆中多能干细胞增殖的负调控因子.生物化学-生物物理研究委员会. 1990;170:986–993. [公共医学][谷歌学者] 4阿齐兹·M、卢梭·A、埃赞·E、古伊内·T-T、米歇莱特·S、格罗内特·J-M、伦芬特·M、科尔沃·P、梅纳德·J。急性血管紧张素转换酶抑制增加血浆中天然干细胞调节剂N-乙酰基-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸的水平.临床研究杂志. 1996;97:839–844.[PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 5Azizi M、Ezan E、Nicolet L、Grognet JM、Menard J。血浆高水平N-乙酰基-芳基-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸：慢性血管紧张素转换酶抑制的新标志物.高血压. 1997;30:1015–1019. [公共医学][谷歌学者] 6Junot C、Menard J、Gonzales M-F、Michaud A、Corvol P、Ezan E。血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利选择性的体内评估：乙酰-Ser-Asp-Lys-Pro和血管紧张素I水解的差异抑制.药理学实验医学杂志. 1999;289:1257–1261. [公共医学][谷歌学者] 7Rhaleb N-E、Peng H、Harding P、Yang X-P、Carretero OA。心脏成纤维细胞增殖抑制剂Ac-SDKP.高血压. 1998;32:609摘要。[谷歌学者] 8Yoshioka T、Iwamoto N、Nitta K、Irie K、Xiao H-J、Ito K、Muraki T。AcSDKP是一种新型的抗肾成纤维细胞增殖肽.Naunyn-Schmiedebergs病理学档案. 1998;358：R742摘要。[谷歌学者] 9Liu Y-H、Yang X-P、Sharov VG、Nass O、Sabbah HN、Peterson E、Carretero OA。血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂对心力衰竭大鼠的作用：激肽和血管紧张肽Ⅱ2型受体的作用.临床研究杂志. 1997;99: 1926–1935.[PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 10Brooks WW、Bing OH、Robinson KG、Slawsky MT、Chaletsky DM、Conrad CH。血管紧张素转换酶抑制对自发性高血压大鼠肥厚和衰竭心肌纤维化及功能的影响.循环. 1997;96：4002–4010。[公共医学][谷歌学者] 11Sun Y、Ratajska A、Zhou G、Weber KT。血管紧张素转换酶与接受血管紧张素II或醛固酮的大鼠心肌纤维化.临床医学实验室杂志.1993年；122:395–403. [公共医学][谷歌学者] 12Kim S、Ohta K、Hamaguchi A、Omura T、Yukimura T、Miura K、Inada Y、Wada T、Ishimura Y、Chatani F、Iwao H。血管紧张素II在脱氧皮质酮醋酸盐高血压大鼠肾损伤中的作用.超张力. 1994;24:195–204. [公共医学][谷歌学者] 13Kaneto H、Morrissey J、McCracken R、Reyes A、Klahr S。依那普利减少大鼠梗阻肾脏IV型胶原合成和间质扩张.肾脏Int. 1994;45:1637–1647. [公共医学][谷歌学者] 14Young M、Fullerton M、Dilley R、Funder J、，矿物质皮质激素、高张力和心脏纤维化.临床研究杂志. 1994;93:2578–2583.[PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 15孙毅、张杰、张JQ、拉米雷斯FJA。局部血管紧张素II和转化生长因子-β1在大鼠肾纤维化中的作用.高血压. 2000;35:1078–1084. [公共医学][谷歌学者] 16Campbell SE、Janicki JS、Weber KT。慢性给予血管紧张素II或醛固酮后成纤维细胞增殖和表型表达的时间差异.J Mol Cell心脏病学.1995年；27: 1545–1560. [公共医学][谷歌学者] 17Cleutjens JP、Verluyten MJ、Smiths JF、Daemen MJ。大鼠心肌梗死后胶原重构.美国病理学杂志.1995年；147:325–338.[PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 18Chiariello M、Ambrosio G、Cappelli-Bigazzi M、Perrone-Filardi P、Brigante F、Sifola C。实验性冠状动脉闭塞后心肌瘢痕定量的生化方法.J Mol Cell心脏病学. 1986;18:283–290. [公共医学][谷歌学者] 19Hansen-Smith FM、Watson L、Lu DY、Goldstein I。单叶灰树I：未灌注薄肌肉和切片肌肉中微循环血管的荧光示踪剂.微血管研究. 1988;36:199–215. [公共医学][谷歌学者] 20莱廷L。灰树花凝集素与小鼠组织中的内皮细胞和一些上皮细胞特异性结合.组织化学J. 1987;19: 225–234. [公共医学][谷歌学者] 21Sabbah HN、Sharov VG、Lesch M、Goldstein S。心力衰竭进展：间质纤维化的作用.分子细胞生物化学.1995年；147:29–34. [公共医学][谷歌学者] 22Raij L、Azar S、Keane W。Dahl大鼠系膜免疫损伤、高血压和进行性肾小球损伤.肾脏Int. 1984;26: 137–143. [公共医学][谷歌学者] 23Hayakawa H，Raij L。一氧化氮合酶活性与遗传性高血压肾损伤.高血压. 1998;31:266–270. [公共医学][谷歌学者] 24Brown L、Duce B、Miric G、Sernia C。肾素-血管紧张素系统抑制对醋酸脱氧皮质酮盐性高血压大鼠心脏纤维化的逆转作用.J Am Soc肾病. 1999;10：S143–S148。[公共医学][谷歌学者] 25卢梭A、米绍德A、乔维特M-T、伦芬特M、科沃尔P。血液调节肽N-乙酰-Ser-Asp-Lys-Pro是人类血管紧张素转换酶N-末端活性位点的天然特异性底物.生物化学杂志.1995年；270:3656–3661. [公共医学][谷歌学者] 26Brilla CG、Matsubara LS、Weber KT。螺内酯预防系统性动脉高压心肌纤维化的作用.美国心脏病杂志.1993年；71：12A–16A。[公共医学][谷歌学者] 27Brilla CG、Pick R、Tan LB、Janicki JS、Weber KT。实验性高血压大鼠左右心室重构.循环研究. 1990;67: 1355–1364. [公共医学][谷歌学者] 28Nakagawa M，Nasjletti A。脱氧皮质酮盐性高血压患者的血浆激肽浓度.高血压. 1988;11:411–415. [公共医学][谷歌学者] 29Ishidoya S、Morrissey J、McCracken R、Reyes A、Klahr S。血管紧张素II受体拮抗剂改善单侧输尿管梗阻引起的肾小管间质纤维化.肾脏Int.1995年；47:1285–1294. [公共医学][谷歌学者] 30Klahr S，Pukerson ML公司。梗阻性肾病的病理生理学：血管活性化合物在梗阻肾血流动力学和结构异常中的作用.美国肾脏病杂志. 1994;23: 219–223. [公共医学][谷歌学者] 31Bravo R、Frank R、Blundell PA、Macdonald-Bravo H。细胞周期蛋白/PCNA是DNA聚合酶δ的辅助蛋白.自然. 1987;326: 515–517. [公共医学][谷歌学者] 32Coltrera医学博士，Gown AM。PCNA/cyclin表达和BrdU摄取定义了不同细胞系中的不同亚群.组织化学与细胞化学杂志. 1991;39:23–30. [公共医学][谷歌学者] 33Lombard M-N、Sotty D、Wdzieczak-Bakala J、Lenfant M。N-乙酰-Ser-Asp-Lys-Pro四肽对大鼠肝细胞G1-S转变的体内作用.细胞组织激动剂. 1990;23：99–103。[公共医学][谷歌学者] 34Junot C、Nicolet L、Ezan E、Gonzales M-F、Menard J、Azizi M。抑制血管紧张素转换酶对大鼠血浆、尿液和组织中血液调节肽乙酰-Ser-Asp-Lys-Pro浓度的影响.心血管药理学杂志. 1999;291:982–987. [公共医学][谷歌学者] 
