突触结合蛋白结合域在突触蛋白上的定位

突触结合蛋白是突触小泡中一种丰富的钙和磷脂结合蛋白，被认为可以调节神经末梢的神经递质释放。为了更好地理解神经递质释放的生化机制，我们研究了突触素I和突触前质膜上突触小泡受体亚单位syntaxin 1a之间的钙依赖性和非依赖性蛋白-蛋白质相互作用。可溶性syntaxin 1a与突触结合蛋白谷胱甘肽S-转移酶（GST）融合蛋白结合，在钙的存在下结合降低。含有第二个C2重复序列（Syt3-5）的突触结合蛋白片段与整个细胞质结构域具有相同的结合特征；然而，含有第一个C2重复序列的片段（Syt1-3和Syt2-3）显示出钙依赖性结合syntaxin。此外，突触结合蛋白的可溶性全长细胞质域以钙依赖的方式与突触结合素GST融合蛋白结合。钙依赖性和非钙依赖性突触结合蛋白结合所需的突触蛋白结构域通过突触蛋白缺失突变体定位。突触结合蛋白钙非依赖性结合需要突触结合素C末端的241–266氨基酸。突触结合蛋白与突触结合素钙依赖性结合所需的最小结构域定位于氨基酸220-266。突触结合蛋白结合所需的突触蛋白结构域与囊泡相关膜蛋白（或VAMP）和α-可溶性N-乙基-马来酰亚胺敏感融合蛋白连接蛋白（或αSNAP）相互作用的结构域重叠。数据表明，突触球蛋白在调节突触小泡释放和/或再循环中具有钙依赖性和非依赖性作用。