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图4

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酵母npl4号机组变种人被监管机构拯救UFA途径和蛋白酶体。(A) 抑制npl4-1号机组npl4-2号机组温度灵敏度通过高拷贝表达有机发光二极管1,SPT23标准,MGA2公司、和RPN4.npl4-1(PSY2340,顶部)和npl4-2号机组(PSY2341,底部)菌株转化为空向量,或2μ向量包含NPL4号机组,有机发光二极管1,MGA2公司(aa1-914),MGA2公司,SPT23标准,或RPN4号机组被连续稀释到YEPD媒体。显示每个稀释液中发现的细胞数在底部。将培养皿在指定温度下培养24–48小时(B)npl4-1号机组拉紧被转座子插入等位基因外源性抑制SPT23标准野生型增长(WT;FY23),npl4-1号机组(PSY2373),以及npl4-1 SPT23::Tn3::LEU2Leu上的(PSY2377)菌株指示温度下的板。FY23和PSY2373菌株转换为空LEU2级允许增长的向量脱落板。(C) 的示意图美国。酿酒Mga2p和Spt23p蛋白。这些部分冗余因素有38%相同,54%相似。序列特征包括假定的基本核定位信号(NLS),假定的富含亮氨酸的核输出信号(NES)和两个锚蛋白重复序列。这个TIG结构域是一种存在于细胞表面的类Ig折叠结构域受体和包括NF-κB在内的细胞内转录因子。显示C末端跨膜结构域(TM)。坚固的块没有指定或预测功能的氨基酸保存用白色方框表示。隔震层中的截断位置毫克2显示高拷贝抑制克隆(pPS2019)由Mga2p示意图中的箭头指示。转座子的位置(电话::LEU2级)插入npl4-1号机组基因外抑制等位基因SPT23标准(PSY2377)如Spt23p示意图所示。(D) 酵母的温度敏感性npl4号机组突变体是通过用UFA补充生长培养基,部分得到拯救。野生型(重量),机油1Δ,npl4-1号机组、和npl4-2号机组YEPD板上出现应变未补充(左侧)或补充(右侧)0.5 mM UFA(0.25 mM棕榈油酸[16:1],0.25 mM油酸[18:1],1%特吉醇)。将平板在指定温度下孵育48小时。

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