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图3。

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β1整合素的抑制可在膀胱形成过程中逆转根尖极性,并降低α3整合素表达。(A-F)在没有(A,A′,C,E和E′)或存在(B,B′,D,F和F′)8μg/ml AIIB2的情况下生长的囊肿,用红色标记根尖(gp135,高尔基和闭塞素),基底外侧膜标记物β-连环蛋白(A′和B′)或肌动蛋白(C,D,E′和F′)为绿色,细胞核为蓝色。紧密连接标记物闭塞素在E′和F′中被染成红色,在E和F中仅为清晰显示。在未经治疗的囊肿中,顶端标记物gp135(A)、高尔基体标记物GM130(C)和闭塞素(E和E′)定位于腔内表面或朝向腔内表面,而基底外侧膜标记物β-连环素(A′)染色仅限于细胞间接触和外周表面,不包括在管腔表面(A和A′代表同一囊肿)。此外,管腔周围(C和E′)观察到强烈的肌动蛋白染色。这些染色模式表明存在正常极化。相反,AIIB2治疗的囊肿极性反转,如gp135(B)的外周染色、β-catenin从外周表面(B′)被排除、高尔基体在外周表面下方的方位(D)以及闭塞素(F和F′)外周染色所示。箭头显示,在AIIB2治疗的囊肿(B和B′)中,gp135发生在外周表面,β-catenin从这些区域消失。箭头指向连接复合体,在对照囊肿(E和E′)中,连接复合体朝向内腔,在AIIB2治疗的囊肿(F和F′)中则朝向外围。(G和H)囊肿的电子显微照片。在没有AIIB2的情况下生长的囊肿中,细胞与细胞接触处的紧密连接(箭头)靠近内腔,微绒毛(箭头)朝向内腔。在AIIB2存在的情况下,连接面朝向胶原蛋白。(一) 添加大鼠IgG作为对照抗体并不影响膀胱生成。(J) 大鼠抗整合素α6抗体治疗不会改变囊肿的表型。(K) Western blot分析表明,在AIIB2治疗的囊肿中,β1整合素水平没有改变(双链底部带代表β1整合素的前体形式),但α3整合素降低。β-管蛋白水平用作负荷控制。棒材,10μm(A-F、I和J)和2μm(G和H)。

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