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第二信使亚家族丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的分子克隆和鉴定。
摘要
分离出编码蛋白激酶rac（与A和C激酶相关）的部分cDNA。该cDNA随后用于筛选来自人类细胞系MCF-7和WI38的文库，并导致全长cDNA克隆的分离。DNA序列分析确定了1440个碱基对的开放阅读框，编码480个氨基酸的蛋白质（Mr，55716）。这一结果得到了在体外翻译系统中合成Mr 58000蛋白的支持，该系统使用从克隆cDNA转录的RNA和SP6 RNA聚合酶。预测的蛋白质包含具有蛋白激酶催化结构域特征的一致序列，与蛋白激酶C和cAMP依赖性蛋白激酶的相似性分别为73%和68%。Northern（RNA）分析显示，单个mRNA转录物的碱基为3.2千，不同细胞系之间的差异高达300倍。制备了针对rac蛋白激酶羧基末端的特异性抗血清，并用于鉴定用rac特异性抗血制备的免疫沉淀物中磷酸化的几种底物。
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