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美国国家科学院院刊。1991年4月15日;88(8): 3460–3464.
数字对象标识:10.1073/pnas.88.8.3460
预防性维修识别码:项目51467
PMID:2014265

与紧密连接蛋白ZO-1结合的160-kDa多肽的鉴定。

摘要

ZO-1是一种210-220kDa的外周膜蛋白,与上皮紧密连接的细胞质表面相关。因为ZO-1可能与其他未经鉴定的紧密连接蛋白相互作用,所以我们寻找了与ZO-1结合的其他多肽。从代谢标记的Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞的洗涤剂提取物中鉴定出一种160-kDa多肽与ZO-1共免疫沉淀。从几个标准来看,这种多肽似乎与ZO-1不同,而不是降解产物。它缺乏单克隆抗体和ZO-1多克隆血清识别的ZO-1表位,因为它在全细胞提取物或ZO-1免疫沉淀的免疫印迹中都无法检测到。此外,它在一维“克利夫兰凝胶”上显示出与ZO-1不同的肽图。此外,由于新合成的160-kDa多肽在抗ZO-1免疫沉淀物中的出现动力学比ZO-1慢得多,它在免疫沉淀物中的存在不能简单地用细胞溶解过程中ZO-1的降解来解释。与ZO-1一样,160-kDa多肽似乎是一种细胞质外周膜蛋白。它不能被两种不同的细胞表面标记试剂标记。在没有洗涤剂的情况下,可以通过高盐浓度从膜中提取。正如预期的蛋白质复合物,160-kDa多肽和ZO-1以类似的动力学翻转。我们认为160-kDa多肽是紧密连接的组成部分。

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