图4

ER Ca增加²⁺在中检测到内容C9或72诱导多能干细胞（iPSC）衍生的MN以及线粒体改变和Bcl-2蛋白失衡。（A）：TG刺激前后iPSC衍生神经元的图像（B）它们的代表性荧光痕迹。（C）：TG诱发ER Ca的测量²⁺释放表明ER Ca显著升高²⁺与OX3‐9相比，C9‐T2和C9‐7245品系中的水平（***，第页 < .001; *,第页 < .05; 单因素方差分析（带Dunnet事后检验）；n个 = 3个独立的差异，米 = 每个基因型记录150-200个神经元。（D）：免疫印迹显示所有患者的GRP78/BiP水平均升高，C9‐7245‐1和C8‐7245-3（*，第页 < .05，采用Dunnet事后检验的单向方差分析）（E）.n个 = 3个独立的差异，米 = 每个基因型每个分化记录142-200个神经元。（F）：抗凋亡Bcl‐2蛋白的免疫印迹显示患者细胞系和（G）与对照组OX3-9、AH017-13和OX1-61（*，第页<。05; **,第页 < .01，采用Dunnett事后检验的单向方差分析）；n个 = 3个独立的区别(n个 = AH017‐13和OX1‐61的2个独立区分），米 = 3-4次技术复制。（H）：定量聚合酶链反应证实Bcl-X的下调_L（左）和上调（一）BAK，特别是C9‐7245和C902‐2 MN线路（*，第页 < .05; **,第页 < .01; ***,第页 < .001，采用Dunnett事后检验的单向方差分析）；n个 = 2个独立的微分；米 = 3份技术副本。（J）：装载有MitoTracker Red CMXRos并用Islet1和Tuj1进行免疫染色的OX3-9的代表性图像。（K）：胰岛MitoTracker平均荧光强度的量化1⁺/Tuj1号机组⁺神经元在所有患者系中显示出降低的线粒体膜电位（***，第页 < .001，带有Dunnett事后检验的单向方差分析）；n个 = 2个独立的微分；米 = 每个基因型分析17-31个神经元。（左）：电子显微镜（EM）显示，与健康对照组（OX3-9）相比，患者细胞系C902‐2和C9‐7245‐3中的线粒体和线粒体增大。箭头指向线粒体。（百万）：线粒体改变的EM图像定量显示88%C9或72线粒体肿胀的神经元（**，第页 < .01，使用Dunnet的事后检验进行方差分析）。（N）：细胞色素c（c）C9‐7245‐1（*，第页 < .05，使用Dunnett的事后检验进行单因素方差分析）。n个 = 2个独立的微分，米 = 各2份技术副本。（O）：CNs显示凋亡标记细胞色素水平升高c（c）在C902‐10（*，第页 < .05; **,第页 < .01，单因素方差分析与Dunnett的事后检验）。n个 = 2个独立的差异。比例尺=20微米（J），1微米（L）。数据表示为平均值±SEM。缩写：CNs，皮层神经元；内质网；MNs，运动神经元；TG、thapsigargin。