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药物学报。2015年12月；36(12): 1462–1472.
2015年11月23日在线发布。 数字对象标识：10.1038/aps.2015.98
预防性维修识别码：项目经理4816241
PMID：26592515

血脂康胶囊中的异黄酮和植物甾醇调节高脂饮食小鼠的胆固醇稳态

东风,1 孙建国,1,三 周日跑步,1 冰镇欧阳,1 蓝瑶,1 Ji-ye Aa公司,1,三，* 方舟,1,三 张靖伟,1,三 张健（Jian Zhang）,2和王广济1,*
作者信息 文章注释 版权和许可信息 PMC免责声明

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补充资料

摘要

目标：

血脂康（XZK）是一种红曲米提取物，在中医药中广泛用于治疗心血管疾病。从血脂康胶囊中提取出三个组分F1、F2和F3（主要分别含有异黄酮、monacolins或植物甾醇）。在本研究中，我们评估了这些组分的降脂效果，并探讨了潜在的作用机制。

方法：

用高脂饮食（HFD）治疗的小鼠口服洛伐他汀（10 mg·kg−1·d日−1)、XZK（1200 mg·kg−1·d日−1)，F1（27.5 mg·kg−1·d日−1)，F2（11.3 mg·kg−1·d日−1)或F3（35毫克·千克−1·d日−1)持续10周。使用商业酶试剂盒测量脂质，并分别使用qRT-PCR和Western blot分析评估胆固醇和胆汁酸稳态相关基因的mRNA和蛋白质水平。

结果：

XZK可增加脂类和胆汁酸的排泄，使血清TC、TG和LDL-C水平分别降低40%、55%和46%，并使血清HDL-C升高31%。服用F1后，血清TC和TG分别降低24%和52%，CYP7A1的肝脏合成增加。它还通过上调BSEP和下调NTCP，使肝脏排泄物中胆汁酸的清除量增加79%。服用F3后，血清TC、TG和LDL-C水平分别降低了33%、29%和39%，血清HDL-C增加了28%，通过抑制NPC1L1的转录显著降低了胆固醇的肠道吸收，TC、FC和CE的排泄量分别增加了96%、72%和101%。服用F2显示出与洛伐他汀类似的药理作用。

结论：

XZK中的异黄酮和植物甾醇通过不同于洛伐他汀的机制对HFD小鼠发挥降胆固醇作用。异黄酮和植物甾醇的作用是互补的：分别通过促进胆汁酸的消除和减少肠道胆固醇的吸收。

关键词：高脂血症、降胆固醇药物、红曲米、血脂康、洛伐他汀、异黄酮、植物甾醇、胆固醇、胆汁酸、中药

介绍

尽管在抗击心血管疾病（CVD）方面做出了努力，但它仍是国内外发病率和死亡率的主要原因。高脂血症被认为是CVD的主要诱因1,2饮食、运动和药物被视为调节血脂的关键因素。市场上有几种降胆固醇药物，包括他汀类药物，可以单独服用或与其他药物联合服用。然而，据报道，这些药物的临床副作用增加，因此有必要对补充或替代疗法进行进一步研究。例如，使用功能性食品作为降低血浆胆固醇的替代疗法，引起了人们极大的兴趣。

红酵母大米（RYR），一种发酵大米，通常使用一种称为紫色红曲霉，已被用作食品补充剂，以改善血液循环和降低血清胆固醇水平三,4,5,6,7,8,9,10Monacolin K，也称为洛伐他汀，是RYR的保守活性成分11,12,13除Monacolin K外，RYR还含有其他monacolins和色素、不饱和脂肪酸、植物甾醇、氨基酸、异黄酮、生物碱和微量元素13,14,15,16,17有趣的是，RYR含有约2-7.5毫克的洛伐他汀，其降低胆固醇的功效相当于20毫克的洛伐他汀7,18,19,20,21该数据表明，RYR中的其他成分可能与洛伐他汀联合发挥添加剂和/或协同药理作用17.

血之康是一种红曲米提取物，两千多年来一直作为一种功能性食品广泛应用于中药治疗心血管疾病患者。今天，推荐使用血脂康治疗血脂异常22,23在随机对照试验中，服用血脂康治疗血脂异常的冠心病（CHD）患者也记录了使用血脂康的临床益处24,25临床试验也表明血脂康具有抗炎活性26改善内皮功能27.

身体中的大部分胆固醇是在肝脏中合成的。已知HMG-CoAR分子对该催化反应执行速率限制步骤18NPC1L1介导的外源性胆固醇的肠道吸收可能是另一个来源21当生物体内的胆固醇水平过高时，过量的胆固醇会被SR-BI主动带入肝脏28,29是高密度脂蛋白的受体。胆固醇随后在肝脏中被CYP7A1转化为胆汁酸30,31,32BSEP33,34和NTCP35,36调节胆汁酸的排泄和再吸收。

尽管有几项研究报告了RYR的功效和机制，但很少有人提供关于RYR中其他成分是否具有附加药理作用的信息。此外，RYR通过影响胆固醇或胆汁酸稳态来降低胆固醇的具体机制尚不清楚，参与这些机制的其他成分的贡献也不清楚。为了解决这个问题，本研究对血脂康进行了研究。根据不同的极性分离出三个富含异黄酮、monacolins或植物甾醇的组分。然后使用高胆固醇血症小鼠模型探讨其降血脂活性和潜在作用机制。

材料和方法

XZK提取

XZK粉末由WBL北京大学生物技术公司提供，中国北京。用95%乙醇（每个1000 mL）提取两次XZK粗粉（100.0 g）。回流后，过滤并浓缩混合溶液，得到6.7 g的主要提取物重量。

将主要提取物溶解在25%乙醇（30倍体积）中，形成样品溶液。将湿的预处理树脂（床层体积（BV）1600 mL）填充在玻璃柱中。吸附过程通过将样品溶液加载到树脂上过夜进行。然后用乙醇-水梯度溶液以25 mL/90 s的流速洗脱吸附质柱。梯度洗脱如下：首先，用蒸馏水（5 BV）清洗吸附质柱，并用不同比例（30/70、50/50、70/30、90/10、95/5、，v（v）/v（v）)并依次具有不同的体积（6、8、8、8BV）。经HPLC鉴定（日本京都岛津），获得了三个含有异黄酮（F1）、monacolins（F2）和甾醇（F3）的组分，相对于一级提取物的收率分别为34%、14%和44%。

饮食

膳食从中国南通TROPHIC动物饲料高科技有限公司购买。对照饮食（对照）是通过混合以下成分（g/kg饮食）制备的：酪蛋白，140；玉米淀粉465.69；麦芽糊精，155；蔗糖，100；大豆油，40；纤维素，59；矿物混合物，35；维生素混合物，10；L（左）-胱氨酸，1.8；酒石酸胆碱，2.5；TBHQ为0.008。高脂饮食（HFD）如下（g/kg饮食）：酪蛋白，198.21；麦芽糊精，219.99；蔗糖，90.63；大豆油，34.04；猪油，306.37；纤维素，70.79；矿物混合物，49.55；维生素混合物14.16；L（左）-胱氨酸，2.55；酒石酸胆碱，3.54；TBHQ，0.068；胆固醇，10。

动物和实验

从南京医科大学动物中心购得6周龄无甲状腺特异性（SPF）雄性C57BL/6小鼠。动物研究获得中国药科大学动物实验伦理委员会批准。所有小鼠均在25°C下饲养，光暗循环12小时。实验开始前，给小鼠喂食一周的控制饮食。56只（18±1 g）雄性小鼠随机分为7组(n个=8）：对照组（对照组）、高脂饮食组（HFD）、HFD+洛伐他汀（Lv，10 mg/kg）、HFD+XZK（1200 mg/kg，相当于10 mg/kg洛伐他丁）、HFD1组分1（F1，27.5 mg/kg），HFD+组分2（F2，11.3 mg/kg）和HFD+第3组分（F3，35.0 mg/kg）。在接下来的10周内，按照小组分配给小鼠进行治疗。向老鼠提供饲料和自来水随意每周测量一次食物摄入量并记录体重。

实验结束前12小时取出食物。然后处死小鼠，收集血清/组织样本。从视网膜静脉采集血液，并以5000×克凝固后在4°C下保持10分钟。收集血清以测定脂质和脂蛋白。立即取出肝脏和肠道，用盐水冲洗，称重并储存在液氮中，直到用于测量脂质或用于基因或蛋白质表达的分析。仔细取出肝脏的一部分，用生理盐水冲洗数次以清除血液，然后浸入10%福尔马林原液中进行组织学分析。在实验结束前的最后一周收集粪便颗粒，并在−80°C下储存，直至分析。

血清、肝脏和粪便中脂质的测定

使用商业酶试剂盒（Biosino Bio-Technology&Science Inc，中国北京）测定血清脂质水平，标记物包括总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆甾醇（LDL-C）。使用商用试剂盒（中国北京Applygen Technologies Inc）测定肝脏和粪便样品中的TC、游离胆固醇（FC）和胆固醇酯（CE）浓度。

肝脏和粪便中胆汁酸池、粪便胆汁酸组成的测定

为了测量胆汁酸池的大小，从肝脏和粪便中提取总胆汁酸，并使用商业检测试剂盒（中国南京建成生物工程研究所）进行定量。

如前所述，为了测定粪便颗粒中的胆汁酸成分，使用LC-MS/MS API4000和Agilent ZORBAX SB-Aq柱（2.1×150 mm，3.5μm）提取样品并进行测量37.

肝脏组织学

收集肝脏组织以研究组织学变化。在10%福尔马林固定后，将组织包埋在石蜡中，并对小切片进行苏木精-伊红（H&E）染色。为了进行肝脏脂质染色，冷冻肝组织，在10%福尔马林中短暂固定，并用油红O染色。

实时PCR分析

根据制造商的说明，使用TRIzol plus RNA纯化试剂盒（Invitrogen，Life Technologies，USA）从肝脏中提取总RNA。使用PrimeScript从RNA合成第一链cDNA™第一链cDNA合成试剂盒（TaKaRa Bio Inc，日本）。使用SYBR Premix Ex Taq通过定量反转录（qRT）-PCR测定mRNA水平™（日本TaKaRa Bio Inc）在Bio-Read实时PCR机器中。在95°C下初始变性5分钟，然后在94°C下40次循环15秒，60°C下15秒，68°C下30秒。本研究使用的引物序列如所示表S1结果归一化为GAPDH表达。

蛋白质印迹分析

根据之前描述的方法提取肝脏和回肠中的总蛋白38通过8%SDS-PAGE对膜蛋白和细胞质蛋白进行电泳，然后转移到0.22μm聚偏二氟乙烯膜上。5%阻塞后(w个/v（v）)脱脂奶、膜与抗SR-BI抗体（美国加利福尼亚州圣克鲁斯圣克鲁斯生物技术公司）、抗HMG-CoAR抗体（美国纽约州普莱西德湖上游）、抗CYP7A1（圣克鲁斯生技公司）、抗CYP27A1或抗GAPDH抗体（美国圣克鲁斯圣克鲁斯生物科技公司）在4°C下培养过夜。清洗步骤后，在室温下用辣根过氧化物酶结合的山羊抗兔IgG孵育斑点1小时。在TBS-T中清洗后，使用ECL增强化学发光剂（美国Millipore公司）检测信号。使用BioRad Quantity One软件量化密度测定。SR-BI、CYP7A1和CYP27A1丰度值归一化为GAPDH。

统计分析

数据表示为平均值±标准偏差（SD）。使用Student’st吨-测试和显著性设置为P（P）<0.05.

结果

体重和食物摄入

体重和食物摄入(表S2)HFD组的小鼠数量显著高于对照组(P（P）<0.05). 与HFD组相比，Lv对小鼠的体重和食物摄入量没有影响。

XZK抑制HFD引起的体重升高(P（P）<0.01）与HFD组相比，不影响食物摄入(P（P）>0.05).

F1和F3的作用与HFD+XZK组相似。

与HFD组相比，F2对体重和食物摄入没有影响。

XZK对血脂和动脉粥样硬化指标的影响

与对照组相比，HFD组的血清TC（84%）和LDL-C（95%）显著增加(P（P）<0.05,图1). HFD组的血清HDL-C和TG略有增加，但不显著(P（P）>0.05). LDL与HDL-C的比值明显增加了1.9倍，HDL-C与TC的比值显著降低(P（P）与对照组相比，HFD组<0.01）(表S3).

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连续10周分别口服洛伐他汀（Lv）10 mg/kg、血脂康（XZK）1200 mg/kg、F1（异黄酮）27.5 mg/kg、F2（monacolins）11.3 mg/kg或F3（甾醇）35.0 mg/kg后，高脂饮食治疗C57BL/6雄性小鼠血清胆固醇（总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白）和甘油三酯的定量。平均值±标准差。n个=8.c（c）P（P）<0.01与控制；e（电子）P（P）<0.05,（f）P（P）<0.01与HFD。小时P（P）<0.05,我P（P）< 0.01与HFD+低HFD，高脂肪饮食。

与HFD组相比，Lv显著降低血清TG和HDL-C水平，分别降低25%和33%，适度降低血清TC和LDL-C水平分别降低22%和19%(图1). 正如预期的那样，低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白聚糖比率在接触低密度脂细胞后显著提高(P（P）<0.05时，表S3).

与单纯HFD组相比，XZK强烈抑制HFD诱导的TC、TG和LDL-C水平的升高，分别为40%、55%和46%(图1). XZK还显著提高了血清HDL-C水平31%。XZK显著降低了LDL-C/HDL-C和TG/HDL-C比率(P（P）<0.05,表S3)并提高了HDL-C/TC比率(P（P）<0.01).

与HFD组相比，F1显著抑制TC和TG水平，分别为24%和52%(图1). F1还降低了LDL-C/HDL-C和TG/HDL-C比率(P（P）<0.05,表S3).

HFD+F2组对血清TC、LDL-C、TG和HDL-C水平的影响与HFD+Lv组相似。

F3不仅显著降低血清TC、TG和LDL-C水平，分别降低33%、29%和39%；它还将血清HDL-C水平提高了28%(图1)显著降低LDL-C/HDL-C和TG/HDL-C比值(P（P）<0.05,表S3). 在HFD+F3组中观察到HDL-C/TC比率增加(P（P）<0.01).

肝脏脂质与组织病理学

HFD治疗导致肝脏重量显著增加(P（P）<0.01,表S2)与对照组相比，脂肪堆积更大(图2). 与对照组相比，HFD使肝脏TC、FC和CE的血清水平分别显著升高116%、83%和167%(图3A).

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高脂饮食处理的C57BL/6雄性小鼠口服洛伐他汀（Lv）10 mg/kg、血脂康（XZK）1200 mg/kg、F1（异黄酮）27.5 mg/kg、F2（monacolins）11.3 mg/kg或F3（甾醇）35.0 mg/kg后10周肝切片的H&E染色和油红O染色。

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高脂饮食处理的C57BL/6雄性小鼠在口服洛伐他汀（Lv）10 mg/kg、血脂康（XZK）1200 mg/kg、F1（异黄酮）27.5 mg/kg、F2（monacolins）11.3 mg/kg或F3（甾醇）35.0 mg/kg 10周后的肝脏和粪便脂质浓度。（A） 肝脏脂质；（B） 粪便脂质。平均值±标准偏差。n个=8。b条P（P）<0.05,c（c）P（P）<0.01与控制；e（电子）P（P）<0.05,（f）P（P）<0.01与HFD；小时P（P）<0.05,我P（P）<0.01与HFD+低HFD，高脂肪饮食。

与HFD组相比，Lv组的肝脏重量显著降低(P（P）<0.01,表S2). HFD+LV小鼠肝脏的脂质积累略有改善(图2). Lv导致TC肝脏水平显著下降（下降38%），FC和CE肝脏水平略有下降(图3A).

XZK抑制HFD诱导的肝重量增加(P（P）<0.01,表S2). 从HFD+XZK组收集的肝脏显示正常(图2). XZK显著降低HFD引起的TC、FC和CE血清水平升高，分别降低50%、42%和58%(图3A). 与HFD组相比，XZK还降低了肝脏中总胆汁酸的积累47%(图4A).

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连续10周分别口服洛伐他汀（Lv）10 mg/kg、血脂康（XZK）1200 mg/kg、F1（异黄酮）27.5 mg/kg、F2（monacolins）11.3 mg/kg或F3（甾醇）35.0 mg/kg后，高脂饮食处理C57BL/6雄性小鼠的肝脏和粪便总胆汁酸（TBA）浓度。平均值±标准偏差。n个=8.b条P（P）<0.05,c（c）P（P）<0.01与控制。e（电子）P（P）<0.05,（f）P（P）<0.01与HFD。小时P（P）<0.05,我P（P）<0.01与HFD+级HFD：高脂肪饮食。

F1还降低了肝脏重量(P（P）<0.01,表S2)和脂质积累(图2)与HFD组相比。HFD+F1使肝胆汁酸池减少46%(图4A).

与HFD组相比，HFD+F2组的脂质积累减少(图2). F2以类似于Lv的方式影响肝脏脂质和胆汁酸池(图3A和​和4A4A级).

F3降低肝脏重量(P（P）<0.01,表S2)和脂质积聚(图2)与HFD组相比。HFD+F3组HFD诱导的TC、FC和CE水平升高分别降低了53%、43%和63%(图3A).

脂质和BA排入粪便

与对照组相比，HFD使TC和FC的粪便排泄量分别显著增加37%和61%(图3B). HFD组的粪便胆汁酸池增加了1.1倍(图4B). 与对照组相比，HFD组粪便中各类胆汁酸排泄量增加(图S1).

与HFD组相比，服用Lv的小鼠粪便中总胆汁酸的排泄量增加了30%(图4B).

TC、FC和CE的排泄(图3B)HFD+XZK组分别显著增加207%、175%和183%。与HFD组相比，XZK还将总胆汁酸的排泄量增加了71%(图4B). 与HFD组相比，XZK暴露导致各种胆汁酸的粪便排泄量显著增加(图S1).

接受F1的小鼠粪便中总胆汁酸的排泄量增加了79%(图4B). 与HFD组相比，施用F1会导致所有类型胆汁酸的粪便排泄增加(图S1). F2对粪脂变化的影响与HFD+Lv组相似。F3使排入粪便的TC、FC和CE分别增加96%、72%和101%(图3B).

胆固醇和胆汁酸稳态相关酶的转录和翻译调控

肝ABCG5和ABCG8上调(P（P）<0.05）和下调肠道NPC1L1(图5,P（P）与对照组相比，HFD组观察到<0.05）。HFD不影响CYP7A1和CYP27A1的肝脏mRNA水平(P（P）>0.05），但它显著增加了BSEP(P（P）<0.01）和肠道OSTα(P（P）<0.05). 与HFD组相比，Lv组HMG-CoAR和肠道OSTα/β表达显著下调(图6,P（P）<0.01).

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分别口服洛伐他汀（Lv）10 mg/kg、血脂康（XZK）1200 mg/kg、F1（异黄酮）27.5 mg/kg、F2（monacolins）11.3 mg/kg或F3（甾醇）35.0 mg/kg 10周后，高脂饮食处理C57BL/6雄性小鼠胆固醇合成和转运相关基因的mRNA表达。平均值±标准偏差。n个=8.b条P（P）<0.05,c（c）P（P）<0.01与控制。e（电子）P（P）<0.05,（f）P（P）<0.01与HFD。小时P（P）<0.05,我P（P）<0.01与HFD+级HFD：高脂肪饮食。

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分别口服洛伐他汀（Lv）10 mg/kg、血脂康（XZK）1200 mg/kg、F1（异黄酮）27.5 mg/kg、F2（monacolins）11.3 mg/kg或F3（甾醇）35.0 mg/kg 10周后，高脂饮食处理C57BL/6雄性小鼠胆汁酸合成和转运相关基因的mRNA表达。平均值±标准偏差。n个=8。b条P（P）<0.05,c（c）P（P）<0.01与控制。e（电子）P（P）<0.05,（f）P（P）<0.01与HFD。小时P（P）<0.05时，我P（P）<0.01与HFD+级HFD：高脂肪饮食。

与HFD组相比，XZK组HMG-CoAR显著下调，肝脏SR-BI显著上调(图5,P（P）<0.01). 蛋白质水平也呈类似趋势(图7). HFD+XZK显著抑制肠道NPC1和上调肝脏LDL-R(P（P）<0.05). HFD+XZK组肝FXRα、NTCP和肠OSTα/βmRNA水平较低，而肝CYP7A1、CYP27A1和BSEP的mRNA水平较高(图6,P（P）<0.05).

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在高脂饮食处理的C57BL/6雄性小鼠中，分别口服洛伐他汀（Lv）10 mg/kg、血脂康（XZK）1200 mg/kg、F1（异黄酮）27.5 mg/kg、F2（monacolins）11.3 mg/kg或F3（甾醇）35.0 mg/kg 10周后，肝脏蛋白表达与胆固醇和胆汁酸代谢的稳态相关。平均值±标准偏差。n个=8.b条P（P）<0.05,c（c）P（P）<0.01与控制。e（电子）P（P）<0.05,（f）P（P）<0.01与HFD。小时P（P）<0.05,我P（P）<0.01与HFD+级HFD：高脂肪饮食。

与HFD相比，F1代SR-BI和CYP7A1显著增加(P（P）<0.01），其蛋白质水平也呈类似趋势(图5和​和7）。7). HFD+F1处理的小鼠BSEP mRNA水平较高(P（P）<0.01). F1强烈抑制肠道OSTα/βmRNA水平(P（P）<0.01）和肝脏NTCP(图6,P（P）<0.05).

F2显著降低mRNA(P（P）<0.01）和HMG-CoAR蛋白水平与HFD组相比。它还强烈抑制肠道OSTα/β的mRNA水平(图5和​和7，7,P（P）<0.01).

F3显著降低HMG-CoAR mRNA水平(图5,P（P）<0.01），蛋白质水平也呈类似趋势(图7). F3显著抑制肠道NPC1L1和肝脏NTCP的mRNA水平(图5,P（P）<0.05).

讨论

XZK是RYR的提取物，已被证明在临床和临床前均能有效降低血脂异常。在本研究中，使用HFD喂养的小鼠模型来验证XZK的抗高脂血症作用。结果表明，XZK治疗可使血清TC、TG和LDL-C水平分别降低41%、55%和46%，并使血清HDL-C水平升高31%(图1). HDL-C被描述为“好”胆固醇；它介导胆固醇从外周向肝脏的逆向转运（RCT）39,40作为阳性对照，Lv使血清TG和HDL-C水平分别降低25%和33%，而血清TC和LDL-C水平则分别适度降低17%和19%。这些结果表明，与洛伐他汀等效物相比，XZK对改善血脂异常的作用更大(表1)，这与之前的研究一致7.

表1

与洛伐他汀相比，徐志康的三个组分（F1、F2、F3）改变了脂质水平和相关基因。
生化指标血脂康F1（异黄酮）F2（莫那可林）F3（甾醇）
血脂
总胆固醇（TC）↓↓––↓
甘油三酯（TG）↓↓↓↓––
低密度脂蛋白胆固醇↓↓––↓↓
高密度脂蛋白胆固醇↑↑↑–↑↑
肝脏脂质
总胆固醇（TC）––––
游离胆固醇（FC）–––↓
胆固醇酯（CE）––––
总胆汁酸（TBA）↓↓↓↓–↓
粪便脂类
总胆固醇（TC）↑↑––↑
游离胆固醇（FC）↑↑––↑
胆固醇酯（CE）↑––↑
总胆汁酸（TBA）↑↑↑––
分子机制
胆固醇途径相关基因
HMG-CoAR公司↓↓↓––
SR-BI公司↑↑↑↑––
NPC1L1型↓––↓
胆汁酸途径相关基因
CYP7A1公司↑↑↑↑–↑↑
NTCP公司↓↓↓–↓↓
BSEP公司↑↑↑↑–↓

↑↑, 诱导的(P（P）<0.01); ↓, 压抑的(P（P）<0.05); ↓↓, 被压抑的(P（P）<0.01); –, 无显著差异。

在本研究中，进一步探索了XZK相对于洛伐他汀改善药理作用的来源。富含monacolins（F2）的组分诱导了与Lv相似的作用。与HFD组相比，富含异黄酮（F1）的组份显著抑制TG血清水平52%。富含植物甾醇的F3不仅显著降低TC、TG和LDL-C水平，分别降低33%、30%和32%；它还使血清HDL-C水平提高了29%。将XZK和XZK衍生物的药理作用与Lv进行比较，结果如下表1F1有助于XZK的血清TG降低作用。F3有助于XZK降低TC和LDL-C的作用。重要的是，F3有助于XZK的HDL-C增加效应。

进一步探讨了XZK的作用机制以及三种组分对降低胆固醇水平的贡献(图5,​,66,​,7).7). XZK和F1通过上调肝脏SR-BI，增加多余胆固醇从外周向肝脏的逆向转运。XZK与F3通过显著抑制NPC1L1的转录水平，减少食物中外源性胆固醇的肠道吸收。XZK和F1增加了胆汁酸合成酶（CYP7A1）的水平，导致胆固醇向胆汁酸的转化增加。XZK和F1通过增加肝脏BSEP和降低NTCP抑制BA重吸收来增加BA胆汁分泌。这些结果共同表明，XZK调节胆固醇-胆汁酸稳态，减少脂质吸收，增加脂质排泄，从而有助于降低血清和肝脏脂质浓度。F1降低了肝脏浓度，增加了BA的粪便浓度。F3降低了肝脏脂质，同时增加了粪便脂质的排泄。据报道，植物甾醇也有类似的作用41,42,43,44,45我们的结果表明，F1和F3分别通过调节胆汁酸和胆固醇稳态来促进XZK的降胆固醇作用(图8).

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血脂康（XZK）和F1（异黄酮）、F2（monacolins）或F3（甾醇）的降脂作用机制。

总之，本研究表明，XZK中的异黄酮和植物甾醇通过不同于Lv诱导的机制具有降低胆固醇的作用(表1). F1和F3分别通过调节胆汁酸和胆固醇稳态，促进XZK对血脂异常的影响。我们的研究结果为这两种物质作为新功能食品的开发提供了基础。

作者贡献

东风为实验的设计和性能做出了贡献；王广济和纪谊AA为项目和实验设计的发展做出了贡献；孙瑞彬完成了脂质和胆汁酸的分析；冰岑欧阳和蓝瑶进行了Western blot分析和qRT-PCR；张健提取血脂康；孙建国、周芳和张靖伟参与了数据分析并撰写了手稿。所有作者阅读并批准了最终手稿。

致谢

本研究得到了国家自然科学基金（81373481）、江苏省药物代谢与药代动力学重点实验室促进基金（No个BM2012012）和中国“新药创制”重点技术项目（No个2015ZX09501001）。

脚注

补充信息可在《药理学学报》网站上查阅。

补充信息

补充信息，图S1

C57BL/6雄性小鼠粪便中的BA成分。

补充信息，表S1

用于实时PCR扩增mRNA的引物列表

补充信息，表S2

C57BL/6雄性小鼠的体重、食物摄入量和肝脏重量。

补充信息，表S3

C57BL/6雄性小鼠血浆动脉粥样硬化指数的变化。

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文章来自中国药理学学报由以下人员提供自然出版集团