图2

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SASP生产依赖于MTOR。()HCA2细胞感染表达GFP shRNA的慢病毒(对照)或三种不同的靶向猛禽的shRNA之一。然后照射细胞;7天后,收集条件培养基并用ELISA分析IL6。(b条)HCA2细胞感染表达GFP shRNA的慢病毒(对照)或三种不同靶向MTOR的shRNA之一。然后照射细胞;7天后,收集条件培养基并用ELISA分析IL6。(c(c))用ELISA在PSC27细胞条件培养基中定量IL8,其中S6K被siRNA耗尽,或4EBP1通过转染4EBP1-编码质粒过度表达。显示用雷帕霉素(Rapa)处理的细胞进行比较。(d日)在电离辐射诱导衰老后,通过western blotting分析转染S6K siRNA或trans-4EBP1或雷帕霉素处理的PSC27细胞的蛋白提取物中指示的SASP因子。未处理的斑点原始扫描如所示补充图9. (e(电子))通过western blotting分析非基因(NS)或衰老(电离辐射;Sen(IR))HCA2细胞(经雷帕霉素处理或未经处理)的提取物中的指示蛋白质。β-actin作为负荷控制。未处理的斑点原始扫描如所示补充图9。对于c(c),所示为两个独立实验的一个代表,每个实验都有三份样品。对于d日e(电子)所示为两个独立生物复制的一个代表;每个复制都需要同时检测多个杂交位点。有关原始数据,请参阅补充表4.