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图2

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弱酸预处理对IAV感染、病毒结合和融合的影响。(A) 在酸-旁路感染之前对X31进行预酸化和中和。将病毒在37°C的DMEM缓冲液中预处理1小时,缓冲液调节至指定的pH值。如顶部示意图所示,一半样品通过添加HEPES(1 M,pH 9.5)(白色条)进行中和。两组样品均进行了酸-旁路感染试验。(B) X31在正常感染前的预处理。如顶部示意图所示,病毒在基于DMEM的缓冲液中预处理1小时,并在37°C下调整到相应的pH值,中和,然后添加到A549细胞中。细胞在感染培养基中培养并固定在10 h p.i。统计显著性由Student’st吨测试。(C) 预酸化病毒与A549细胞的结合。X31用指定的基于DMEM的pH缓冲液在37°C下预处理1小时,在冰上结合1小时,并固定。在PBS中对细胞进行大量清洗,使其不渗透。用多克隆抗X31抗体通过间接免疫荧光检测结合颗粒。用WGA染色显示细胞边界,用DRAQ5染色细胞核。显示了所有条件下的典型共焦图像(右)和量化结果(左)。棒材,15μm。(D) 荧光光谱监测预酸化和中和后R18-标记X31与A549细胞表面的融合动力学。按照图例中的说明测量R18去淬图1C.试验前。,预处理;中子。,中和;不另作说明,无显著差异。

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