图5

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依赖磷脂酰丝氨酸上的C1A和C1B双层结合(PS)密度。通过SM-TIRFM定量蛋白质的膜密度如前所述。29C1A或C1B浓度固定在5 pM,并添加到支撑磷脂酰胆碱(PC)中含有(A)增加PS脂质量或(B)增加的双层膜PS脂质总量,其中阴离子脂质总量保持在40%,使用磷脂酰甘油(PG)脂质。短暂孵化后,确保荧光膜结合蛋白的稳态结合密度从三个单独的框架中测量了5个暂时隔离的框架电影流在三个单独的滴定实验中。为了去除PG脂质引起的纯静电结合去除0~40%PS脂质的结合信号。产生的结果因此,结合是由于与PS的特定蛋白质相互作用,因为非特异性静电征募已被消除。