EMBO J。1995年12月15日；14(24): 6087–6094.
从cDNA中回收感染性仙台副粘病毒的高度重组系统：产生一种新的复制支持非缺陷性干扰病毒。
摘要
我们通过将该cDNA和表达核衣壳蛋白（NP）、磷酸蛋白和大蛋白的pGEM质粒转染到表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒感染的细胞中，从全长cDNA（FL-3）中恢复了感染性仙台病毒（SeV）。然后将这些细胞注射到鸡蛋中，SeV在鸡蛋中生长到非常高的滴度。FL-3在先导区用BglII位点标记，在NP基因的5'非翻译区用NsiI位点（ATGCAT）标记，创造了一个新的、框架外的、5'近端的AUG。所有产生的病毒库通过FL-3和pGEM-NP之间的点突变或重组，最终消除了NP表达的障碍。发现回收系统具有高度重组性。即使在没有选择压力的情况下，所产生的重组SeV中，仍有二十分之一的人将FL-3的NP基因与pGEM-NP的NP进行了交换。当包含新基因组3'末端的第五个质粒没有可能有害的BglII位点时，作为重组的另一个靶点，在12次回收中，有12次在重组SeV中发现新的基因组3'末端。使用这种方法，生成了一种新型的复制备份非缺陷病毒，该病毒会干扰野生型病毒的复制。
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