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美国国家科学院院刊。1978年7月;75(7): 3327–3331.
数字对象标识:10.1073/pnas.75.7.3327
预防性维修识别码:项目经理392768
PMID:28524

荧光探针测量活细胞溶酶体内pH值以及各种试剂对pH值的扰动。

摘要

描述了一种定量测量活细胞溶酶体内pH值的方法。荧光素异硫氰酸标记的右旋糖酐(FD)被内吞并积聚在溶酶体中,在那里它保持不明显降解。该化合物的荧光光谱随pH值在4-7范围内变化,不受FD浓度、离子强度或蛋白质浓度的严重影响。盖玻片上的活细胞安装在荧光分光光度计细胞中,可以灌注各种介质。巨噬细胞溶酶体内的正常pH值似乎为4.7-4.8,尽管它可以暂时降至4.5。细胞暴露于各种弱碱和酸性钾离子载体会导致pH值升高。pH值的变化比弱碱在溶酶体内的积累要快得多。糖酵解抑制剂(2-脱氧葡萄糖)和氧化磷酸化抑制剂(氰化物或叠氮化物)一起添加,但不单独添加,会导致溶酶体内pH值升高。这些结果为溶酶体膜中存在活性质子积累机制提供了证据,并支持溶酶体通过质子捕获积累弱碱的理论。

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选定的引用

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文章来自美国国家科学院院刊由以下人员提供美国国家科学院