图6

（A）用Chal-24（8μM）处理A549细胞指定时间。Western blot检测所示蛋白。β-actin或GAPDH被检测为输入对照。（B）将ERK1和ERK2 siRNA或JNK1和JNK2 siRNAs（各10 nM）联合转染A549细胞24 h，然后用Chal-24（8μM）再处理30 h。通过Western blot检测所示蛋白。GAPDH被检测为输入控制。（C）A549细胞用3MA（10mM）、CQ（20μM）或Wortmannin（WTM，1μM）预处理30分钟，然后用Chal-24（8μM）再处理30小时。通过蛋白质印迹检测所指示的蛋白质。GAPDH被检测为输入控制。（D）用指示的siRNAs（10nM）转染A549 24小时，然后用Chal-24（8μM）再处理30小时。检测GAPDH作为输入对照。（E）用U0126（10μM）预处理A549细胞30分钟，然后用Chal-24（8μM）处理指定时间。Lambda磷酸酶处理如5E所述。Western blot检测所示蛋白。GAPDH被检测为输入控制。（F）A549用Chal-24（8μM）处理指定时间。与RIP1抗体共同免疫沉淀后，用Western blot检测所示蛋白（G）用CQ（20μM）预处理A549 30 min，然后用Chal-24（8μM）再处理30 h。在与RIP-1抗体共免疫沉淀后，用Western blot检测指示蛋白。检测GADPH作为联合免疫沉淀特异性的对照。