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美国国家科学院院刊。1996年7月9日;93(14): 7310–7314.
数字对象标识:10.1073/pnas.93.14.7310
预防性维修识别码:PMC38980型
PMID:8692989

狂犬病病毒载体中外源基因的高度稳定表达。

摘要

应用反向遗传学方法产生一种表达外源蛋白的嵌合非片段负链RNA病毒,即狂犬病病毒(RV)。将包含细菌氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因的整个开放阅读框和上游RV顺反子边界序列的DNA构建物插入RV基因组全长cDNA拷贝的非翻译假基因区域或与假基因区域交换。在细胞内T7 RNA聚合酶驱动表达全长抗原组RNA转录物和转染质粒的RV核蛋白、磷酸蛋白和聚合酶后,RV转录新的单顺反子mRNA并高水平表达CAT,恢复正常。嵌合病毒具有标准RV的生长特性,在连续细胞培养传代后遗传稳定。在感染传代病毒25次以上的细胞培养物中仍观察到CAT活性。基于嵌合RNA基因组前所未有的稳定性,这很可能是由于弹状病毒核糖核蛋白复合物的结构所致,我们预测重组弹状病毒载体未来将成功用于显示外源抗原或传递治疗基因。

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