图8

用SIM共聚焦显微镜对PTP1B、VEGFR2和NRP1进行染色和NRP1-依赖性动脉生成信号模型

（A） VEGF-A后10分钟免疫标记VEGFR2和PTP1b的原发性动脉EC的SIM图像₁₆₅刺激显示VEGFR2和PTP1b在早期内体特有的“甜甜圈”形结构中共定位。

（A′）顶部面板显示了使用结构光照显微镜成像的内吞囊泡，相邻的图表显示了囊泡中VEGFR2和PTP1b的定位。注意VEGFR2和PTP1b在早期内体的圆环状结构特征中的共定位。底部面板显示（A）中相同的内吞囊泡，但使用常规显微镜进行成像，相邻的图绘制了囊泡中VEGFR2和PTP1b的定位；请注意SIM卡的卓越分辨率。比例尺代表20μm。

（B） 初级动脉EC的SIM图像，WT和编号1^细胞VEGF-A后15分钟免疫标记小鼠VEGFR2和NRP1₁₆₅刺激显示VEGFR2和NRP1在两种细胞类型中共定位。

（C） NRP1依赖性动脉生成信号模型。血管内皮生长因子-A₁₆₅在质膜上与VEGFR2和NRP1结合可诱导三种分子之间形成复合物，并导致网格蛋白介导的内吞作用。VEGFR2中Y1175的磷酸化刺激ERK信号传导，但当暴露于质膜或RAB5+内体中的酪氨酸磷酸酶PTP1b时失活。NRP1细胞质结构域连接VEGF-A₁₆₅/VEGFR2/NRP1复合物通过连接蛋白与肌球蛋白VI结合，促进从RAB5+到EAA1+内体的转运，其中VEGFR2在不接触PTP1b的情况下保持其Y1175磷酸化，因此能够激发足够振幅的ERK信号以促进动脉生成。

另请参见图S8.