PKCα的抑制抑制血管内转移（A） 使用生物发光成像技术（IVIS50，Xenogen，Caliper Life Science的一部分，n=4）测量4T1-luc细胞通过小鼠内皮细胞层进入基质凝胶层的渗透。小鼠肿瘤内皮细胞（2H-11，ATCC）生长在24孔板中组织培养插入物中的Matrigel塞顶部，直到它们形成融合的单层。然后在内皮细胞层上方添加表达荧光素酶的乳腺癌细胞（1000000个细胞/孔），并按照指示添加肽，最终浓度为10µM。每2小时重复应用肽10小时，然后再培养细胞14小时（总共24小时）。最后，抽吸细胞培养基，用棉签去除内皮细胞层。添加荧光素后，对基质凝胶塞进行成像（IVIS50；Xenogen，Caliper Life Sciences的一部分）。产生的生物发光用于量化穿过内皮细胞层并进入基质凝胶塞的标记肿瘤细胞的数量。（B） 重复实验，观察人MDA-MB-231-luc乳腺癌细胞对原代人内皮HUVEC细胞的侵袭（透明条中的TAT治疗和蓝色条中的αV5-3治疗，n=4）。（C） 通过凝胶内酶谱法测定原发性肿瘤中MMP-9的活性，该酶谱法是在按照显示了MMP-9前体和活性形式的分子量。（D） 用载体（DMSO，对照）和SB-3CT（MMP-9抑制剂，DMSO中10µM）处理的4T1-luc细胞培养物，测量分泌型MMP-9的活性（n=3）。细胞处理24小时，收集培养基并分析MMP-9活性。此外，在用对照（ctrl）siRNA和PKCα的siRNA处理48小时并再培养2天的细胞的培养基中测量MMP-9活性。
