糖尿病标志Link to Publisher's site
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2013年3月14日在线发布。 数字对象标识:10.2337/db12-0533

图3。

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AMPK通过诱导自噬减轻高糖(HG)诱导的细胞凋亡。A类B:H9c2细胞用3-MA(10μmol/L)预处理30 min,然后在有或无二甲双胍(Met;1 mmol/L)的情况下用HG(30 mmol/L.)处理48 h。用Western blot分析细胞裂解产物以确定LC3的表达(A类)和细胞凋亡标志物(B)包括裂解caspase-3(C-Casp3)和裂解PARP(C-PARP)(n个= 5; *P(P)<0.05与对照组,†P(P)与HG相比<0.05,†P(P)<0.05 vs.HG/Met)。C类:用对照siRNA(C-siRNA)或Atg7 siRNA(Atg7-si)转染H9c2细胞48小时。细胞在HG培养基中培养,并用或不用Met(1 mmol/L)处理48小时。用C-Casp3、C-PARP、LC3B和Atg7抗体对细胞裂解物进行Western blot分析。D类:采用annexin V/PI双重染色的流式细胞术检测细胞凋亡,并计算凋亡细胞与annexinV的比值+/PI公司单元格与总单元格之比(n个= 5; *P(P)<0.05与对照/C-siRNA,†P(P)<0.05 vs.C-siRNA/HG,P(P)<0.05 vs.HG/Met/C-siRNA)。E类用编码GFP或Atg7的腺病毒感染H9c2细胞48小时,然后用或不用CQ(5μmol/L)处理16小时。用Western blot检测细胞裂解液中LC3的表达(n个= 5; *P(P)<0.05与GFP,†P(P)与CQ/GFP相比<0.01)。F类:将感染GFP或Atg7腺病毒的H9c2细胞在HG培养基中培养48 h。将细胞裂解物进行Western blot检测C-Casp3和C-PARP的表达(n个= 5; *P(P)<0.05与GFP,†P(P)<0.05 vs.GFP/HG)。G公司:采用annexin V/PI双重染色的流式细胞术检测细胞凋亡,并计算凋亡细胞与annexinV的比值+/PI公司单元格与总单元格之比(n个= 5; *P(P)<0.05与GFP,†P(P)<0.05 vs.GFP/HG)。

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