分子细胞生物学。1990年6月；10(6): 2820–2831.
GCN4表达翻译激活所需的GCN2蛋白激酶中正作用域的鉴定。
马里兰州贝塞斯达国家儿童健康与人类发展研究所低等真核生物分子遗传学研究室，邮编：20892。
摘要
GCN4是酿酒酵母氨基酸生物合成基因的转录激活剂。GCN2是GCN4表达的翻译激活剂，含有与真核生物蛋白激酶催化亚基同源的结构域。激酶结构域中一个高度保守的赖氨酸残基的取代消除了GCN2在体内的调节功能及其在体外的自磷酸化能力，这表明GCN2作为一种蛋白激酶刺激GCN4的表达。在非保存条件下，GCN2基因剂量的增加导致GCN4的去表达；然而，我们发现野生型细胞中GCN2 mRNA和蛋白水平并没有随着氨基酸饥饿而增加。因此，氨基酸保护细胞中GCN2蛋白激酶功能似乎在翻译后受到刺激。分离出三个显性组成的GCN2点突变，在非保守条件下导致GCN4表达下调。GCN2（Con）的两个突变定位于激酶结构域本身。第三个位于与组氨酸-tRNA合成酶（HisRS）同源的羧基末端片段的下游，我们认为该酶可能具有检测氨基酸保护细胞中未带电tRNA并激活邻近蛋白激酶部分的功能。HisRS相关序列和羧基末端片段中的缺失和替换，其中一个GCN2（Con）突变定位的羧基末端区段在体内取消了GCN2的阳性调节功能，而在体外没有降低自身磷酸化活性。这些结果表明，GCN2蛋白激酶部分的侧翼序列是增加生理底物识别或降低在氨基酸饥饿条件下激活激酶活性对未带电tRNA的需求所需的正作用域。
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