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人类热休克转录因子1的DNA结合能力的激活可能涉及从分子内三链卷曲螺旋结构到分子间三链卷曲螺旋结构的转变。
佛罗里达州迈阿密大学医学院生物化学系，邮编33101。
摘要
人类热休克基因的热应激调控由人类热休克转录因子hHSF1介导，hHSF1包含三个4-3疏水性重复序列（LZ1至LZ3）。在未应激的人类细胞（37摄氏度）中，hHSF1似乎处于非活性的单体状态，这种状态可以通过与hsp70的瞬时相互作用稳定的分子内相互作用来维持。热应激（39至42℃）破坏这些相互作用，hHSF1同源三聚体化并获得热休克元素DNA结合能力。在爪蟾卵母细胞中表达的hHSF1也呈单体非DNA-结合状态，并在卵母细胞受到热休克（该生物体内为35至37℃）后转化为三聚体DNA-绑定形式。由于内源性HSF DNA结合活性低，抗hHSF1抗体不能识别爪蟾HSF，因此我们使用该系统来定位hHSF1中维持单体状态所需的区域。诱变分析的结果强烈表明，非活性hHSF1单体通过涉及所有三个亮氨酸拉链的疏水相互作用而稳定，这三个拉链可能形成一个三品牌的卷曲线圈。三聚化可通过促进单体DNA结合域与热休克元件基序的协同结合，实现hHSF1的DNA结合功能。观察到几个不同的LexA DNA结合域-hHSF1嵌合体以热调节方式结合到LexA结合位点，破坏疏水重复序列完整性的单个氨基酸替换使这些嵌合体构成三聚体和DNA结合，支持了这一观点，在我们的分析中，LexA本身只能作为二聚体而不是单体稳定地与DNA结合。
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