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图7。葡萄糖饥饿后LC3脂质化和自噬体形成是PtdIns3P非依赖性的。(A类)将WT初级MEF用含有100 nM沃特曼(−AA+Wm)的全营养培养基(F)、EBSS(−AA)或EBSS处理2 h。或者,将细胞在无葡萄糖培养基(−Glc)或含有100 nM沃特曼的无葡萄糖培养液中培养24 h。用LC3(Abcam多克隆)和肌动蛋白抗体对分解的细胞裂解物进行免疫印迹。结果显示为平均LC3-II/actin±SEM(n=4)。在不含沃特曼的等效治疗条件下进行双尾配对t检验:*p<0.04。(B类)WT(永生化)MEFs用全营养培养基(F)或EBSS(−AA)处理2小时。或者,将细胞在无葡萄糖培养基(−Glc)中孵育16小时。如有指示,孵育包括100 nM wortmannin(+Wm)。细胞经LC3免疫染色处理后固定。所示为−AA和−Glc条件±沃特曼的典型共焦图像。比例尺:10μm。图中显示了每个条件的点状/单元分布。每列代表一个细胞的定量(40-60个细胞/条件取自两个实验)。所示为每组中包含15个(或更多)点/单元格的单元格百分比。

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