在饥饿期间,Atg1与自噬体一起进入液泡。(A类)atg1处将含有野生型Atg1或带有GFP标记的激酶缺失型Atg1-T226A突变体的Δ细胞培养至对数中期,然后在SD-N中饥饿24小时。在指定的时间点采集样品,并通过western blotting分析GFP的裂解。饥饿条件下内源性Ape1的处理监测自噬通量。(B类)atg1处含有GFP标记的野生型Atg1或Atg1-VE突变体的Δ细胞按照(A类). (C类)atg1处Δ第四人民党含有YFP标记野生型Atg1或Atg1-VE突变体的Δ细胞生长到对数期并在SD-N中饥饿。通过延时显微镜监测细胞,并按照“材料和方法”中的描述量化Atg1的空泡堆积。数据绘制为至少90个量化细胞的平均值±标准偏差。其他图像如所示补充图S3H.Bar=5μm。(天)atg1处Δ第13天表达GFP标记的野生型Atg13的Δ细胞、野生型Atg 1或Atg1-VE突变体(左面板)以及含有Atg13-GFP和野生型Atg13或Atg13-FV的野生型细胞生长到对数中期,然后在SD-N培养基中饥饿6小时。western blotting分析GFP裂解。图:可以使用补充数据.