图3

Atg1中的LIR域在功能上很重要体内试验。(一个)atg1处Δ第13天将含有空对照质粒、野生型或指示的Atg1突变体、以及Atg13野生型、Atg13 FV突变体或空质粒的Δ细胞生长到中对数期。通过western blotting分析内源性Ape1的加工过程，并按照图1I通过用抗Atg1或Atg13的抗体进行免疫印迹来控制不同蛋白质的表达。星号表示Atg13抗体检测到的非特异性带。(B类)第8页Δ60磷13Δatg1处表达野生型（wt）、激酶死亡（kd）、Atg1-VE（VE）或-EYE（EYE）突变体或空质粒的Δ细胞生长至对数中期，并在SD-N培养基中饥饿4h。在“材料和方法”中所述的三个独立实验中测量了Pho8Δ60特异性碱性磷酸酶（ALP）活性（nmol/min/mg），并绘制了与野生型对照组相比具有标准偏差（s.d.）的相对ALP活性图。(C类)单元格，如中所示(一个)表达GFP-Atg8的细胞在SD-N培养基中饥饿4h后生长至对数中期。对GFP-Atg8的加工过程进行分析和量化，如下所示图1I. (D类)呈指数级增长atg1处Δ和atg1处Δatg8型通过荧光显微镜检查表达PAS标记物Ape1-RFP和GFP标记的野生型Atg1或Atg1-VE突变体的Δ菌株。棒材=5μm。(E类)atg1处含有TAP标记野生型或所示Atg1突变体的Δ细胞生长到对数中期。Atg1被免疫沉淀在体外放射自显影法测定自身磷酸化活性。激酶死亡（kd）Atg1突变体K54A作为阴性对照。图：可以使用补充数据.