PDGF-D在LNCaP细胞中过度表达可诱导EMT特征。（A） Western blot分析显示，与LNCaP-Neo细胞（GAPDH蛋白用作蛋白负荷控制）相比，LNCaP PDGF-D细胞（PDGF-D-过表达细胞）中ZO-1、波形蛋白、纤维连接蛋白的表达以及PDGF-D的水平。（B） 使用miRNA-特异性Taqman MGB探针和引物测定LNCaP PDGF-D细胞（PDGF-D）和LNCaP-Neo细胞（Neo）中miR-200a、miR-200b和miR-200c的水平。miRNA的相对量归一化为RNU6B。（C） 实时RT-PCR检测PC3和LNCaP细胞PDGF-D mRNA水平。相对mRNA水平根据GAPDH标准化。（D） 使用miRNA-specific Taqman MGB探针和引物测定PC3和LNCaP细胞中miR-200a、miR-200b和miR-200c的水平。miRNA的相对量归一化为RNU6B。（E） 在侵袭试验中，将转染抗miR-200a、miR-200b和miR-200c（抑制剂）或抗miRNA对照的LNCaP细胞接种到涂有生长因子减少型Matrigel的Transwell插入物中。孵育24小时后，用4μg/ml Calcein AM在PBS中于37°C下染色1小时。在ULTRA多功能微孔板读取器中以485/530nm的激发/发射波长读取插入物底侧的细胞荧光。显示了相对荧光的值。这些值代表入侵细胞的比较值。[*，p<0.05，**，与对照组相比p<0.01。N:LNCaP Neo细胞，D:LNCa p PDGF-D细胞，con:抗miRNA对照，200abc:ant-miR-200a，miR-200b和miR-200c（miRNA抑制剂）]。
