PC3细胞中PDGF-D的过度表达上调转录因子的表达,下调上皮特异性基因的表达。(A) 实时RT-PCR用于测定PC3-Neo和PC3-PDGF-D细胞中上皮标志物的mRNA水平。相对mRNA水平根据GAPDH标准化。(B) 采用实时RT-PCR定量分析PC3-Neo和PC3-PDGF-D细胞中ZEB1、ZEB2和波形蛋白mRNA的表达。GAPDH用于内部控制,以校正RNA负载的潜在变化。(C) 实时RT-PCR结果显示,与对照siRNA相比,转染ZEB1 siRNA的PC3 PDGF-D中E-cadherin、F11R、CRB3和sciellin的mRNA水平增加。相对mRNA水平归一化为GAPDH。(D) 与对照siRNA相比,转染ZEB1 siRNA的PC3 PDGF-D中ZEB1、ZEB2和波形蛋白的mRNA水平降低。相对mRNA水平归一化为GAPDH。(E) 用ZEB1或对照siRNA转染PC3 PDGF-D细胞并孵育72 h。使用针对ZEB1和GAPDH的初级抗体进行蛋白质印迹分析。GAPDH用于蛋白质负荷控制。*,与对照细胞相比,p<0.05,**,p<0.01。(Neo:PC3-Neo细胞,PDGF-D:PC3-PDGF-D细胞,Con:对照,E-cad:E-cadherin,Vim:波形蛋白)。