脂蛋白1细胞质核分布受mTORC1、生长因子和营养物质的调节(A) 用100 nM雷帕霉素、250 nM Torin1或载体处理过表达FLAG-lipin 1的NIH3T3细胞8小时。然后在免疫荧光分析中对细胞进行处理,检测FLAG(绿色),并与DAPI共染DNA含量(蓝色),然后成像。
(B) 用250 nM Torin1处理过表达FLAG-lipin 1的NIH3T3细胞指定时间,并通过免疫印迹分析所示蛋白的磷酸化状态和水平。
(C) 在免疫荧光分析中处理(B)中处理的细胞以检测FLAG,并与DAPI联合检测DNA含量,然后成像。对总数大于500个细胞的FLAG免疫反应与DAPI染色重叠进行分析。误差条表示n=3的标准误差。
(D) 将过表达FLAG脂蛋白1的NIH3T3细胞在完全培养基中生长或在没有血清、血清和葡萄糖、或血清和氨基酸的条件下生长8小时,并如(A)中那样成像。