图1

（A） 用100 nM雷帕霉素、250 nM Torin1或载体处理NIH3T3细胞12小时后，通过免疫印迹分析所示蛋白的磷酸化状态和水平。

（B） 用100 nM雷帕霉素、250 nM Torin1或载体处理NIH3T3细胞12小时，在免疫荧光分析中检测层粘连蛋白A（绿色），与DAPI共染DNA含量（蓝色），并成像。显示了每种情况下的图解细胞核。

（C） 偏心解释。椭圆物体的偏心率是衡量椭圆形状偏离圆形的程度。数学定义，偏心率=1−2/((一/第页)+1） ，其中一是凸起处的半径，即椭圆边缘到其中心的最远距离，以及第页是指近心点的半径，即距椭圆中心最近的距离。椭圆的偏心率必须介于0和1之间；圆的偏心率为0。当偏心率趋于1时，椭圆变得更长一/第页趋于无穷大。

（D） 利用图像分析软件，基于层粘连蛋白A免疫荧光分析（B）中处理的图像，以确定核偏心率(Carpenter等人，2006年). 雷帕霉素和Torin1处理的细胞的核离心率分布与来自相应载体处理的细胞的核离心率分布重叠。平均值。每种情况下三个独立字段的偏心值（总计>500个单元格）为：DMSO（黑色）0.630；雷帕霉素（灰色）0.628；Torin1（红色）0.704。

（E） 利用RNAi介导的对照蛋白TSC2或猛禽敲除对p53−/−MEF中TSC2和猛禽蛋白水平进行免疫印迹分析。

（F） p53−/−MEF与TSC2、猛禽或对照蛋白的敲除进行了分析，如（D）所示。每种条件下三个独立场的平均离心率值（总数>500个细胞）为：shGFP（黑色）0.660；shTSC2_1（绿色）0.622；收缩器1（红色）0.705。

（G） 去除血清、血清和葡萄糖或血清和氨基酸12小时后NIH3T3细胞中T37/T46 4E-BP1磷酸化的免疫印迹分析。

（H） 用250nM Torin1处理NIH3T3细胞，或在指定时间内去除血清、血清和葡萄糖，或血清和氨基酸，如（D）所示进行分析。未处理电池的平均偏心值为0.633（虚线）。误差条表示n=3的标准误差。*表示p<0.03；^#表示p<0.01。