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核酸研究。1994年12月11日;22(24): 5354–5359.
数字对象标识:10.1093/nar/22.24.5354
预防性维修识别码:PMC332082型
PMID:7816625

CpG特异性甲基化酶SssI在Mg2+存在下具有拓扑异构酶活性。

摘要

一种来自螺原体的原核CpG特异性甲基化酶,SssI甲基化酶现在被广泛用于研究哺乳动物细胞中CpG甲基化的影响,并且可以在缺乏Mg2+的情况下对CpG二核苷酸中的胞嘧啶进行修饰。在Mg2+存在的情况下,我们发现(i)甲基化反应是分布的而不是过程性的,这是因为SssI甲基化酶对DNA的亲和力降低的结果,以及(ii)在SssI甲酯制剂中存在i型拓扑异构酶活性。这种拓扑异构酶活性仍然存在于通过SDS-聚丙烯酰胺或等电聚焦凝胶电泳进一步纯化的SssI甲基化酶中。我们表明,甲基化酶和拓扑异构酶的活性在功能上并不相互依赖,因为在某些条件下只能检测到一种或另一种酶的活性。SssI甲基化酶和原核拓扑异构酶的催化域在氨基酸水平上表现出相似性,进一步支持了拓扑异异构酶活性是SssI甲化酶真正活性的观点。支原体,包括螺旋体,是所有生物中基因组最小的;因此,两种酶活性缩合为同一蛋白质可能是基因组经济的结果,也可能对甲基化的机制具有功能意义。

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文章来自核酸研究由以下人员提供牛津大学出版社