DETANONOate抑制NFκB并逆转间充质细胞和侵袭性细胞表型。(A) DETANONOate逆转间充质细胞表型。在用1000µM DETANONOate处理4和12 h前后,对来自DU-145和PC-3细胞的蛋白裂解物进行western blot分析,以测定E-cadherin、vimentin和fibronectin的表达。肌动蛋白被用作加载的内部控制。(B) DETANNOATE抑制DU145细胞的侵袭特性。2.5 × 104将DU-145细胞接种在方法所述的体外侵袭检测系统的上腔中,同时在下腔中添加含有10%FBS的RPMI 1640。用200、500或1000µM DETANNOate处理或不处理细胞,并孵育22小时。基质凝胶膜固定并用结晶紫染色后,在显微镜下计数侵入的细胞。数据表示为通过基质凝胶基质和膜的侵入百分比,相对于通过对照插入膜的迁移。p<0.03处理细胞与未处理细胞(Mann-Whitney U检验)。(C) DETANONOate对NFκB DNA结合活性的抑制。用500或1000μM DETANONOate处理DU145细胞4 h,并对衍生的核提取物进行EMSA处理。β-actin水平作为负荷控制。