短暂过度表达Hsp70细胞中HSF1转录活性的分析。(A类)HSF1激活域和Hsp70的共表达。(我)在β-actin hsp70质粒DNA(0、1、5和10μg)存在下,GAL4–HSF1激活域的转录活性作为报告质粒G5BCAT的相对CAT活性进行测量。用荧光成像仪对CAT活性进行量化,用共转染的内部对照β-半乳糖活性进行标准化,并与转染的β-肌动蛋白量进行对比热休克蛋白70质粒DNA。(ii(ii))GAL4–HSF1的DNA结合活性。仅显示了凝胶的顶部对应于GAL4–HSF1 DNA结合复合物。凝胶位移分析在探针过量时进行。(三)用Hsp70特异性单克隆抗体4G4进行Western blot分析,检测Hsp70过表达水平。(B类)HSF1激活域和Hsp70 AAAA突变体的共表达。(我)β-肌动蛋白存在下GAL4–HSF1激活结构域的转录活性热休克蛋白70AAAA质粒DNA(0、1、5和10μg)。(ii(ii))Hsp70 AAAA突变体的过度表达水平。ECL暴露与A类(三). (C类)VP16激活域和Hsp70的共表达。(我)β-actin存在下GAL4–VP16激活域的转录活性热休克蛋白70质粒DNA(0、1、5和10μg)。(ii(ii))Hsp70的过度表达水平。ECL暴露与A类(三).