Hsp70和Hdj1直接与HSF1激活域相互作用。(A类)体外重组Hsp70与HSF1激活域的相互作用。纯化的重组Hsp70、Hsc70和Hsp70 AAAA突变体与纯化的GST或GST-HSF1激活域融合蛋白(GST-AD)在谷胱甘肽珠上孵育。与GST结合的蛋白质(泳道5——7)或GST–AD(车道9——11)用SDS-PAGE和考马斯蓝染色进行分析。车道中包括Hsp70、Hsc70和Hsp70 AAAA突变株1, 2,和三,分别;GST在通道中4;GST–AD在车道上8;分子质量标记(MW)在车道上12(B类)体外重组Hdj1和HSF1激活结构域的相互作用。将纯化的重组Hdj1和Hsp90与谷胱甘肽珠上的GST或GST–AD一起孵育。与GST结合的蛋白质在通道中4和5;通道中与GST–AD结合的蛋白质7和8;车道内的Hdj11;车道内的Hsp902;车道GST三;GST–车道AD6;车道内的MW9(C类)核苷酸对Hsp70或Hdj1与HSF1激活域相互作用的影响。Hsp70或Hdj1与GST–HSF1激活域在没有核苷酸的情况下孵育(通道3,7),存在1m米ATP(车道4,8),或1米米ATP-γs(车道5,9). 车道中包括Hsp70输入1;GST–车道AD2;车道内的Hdj16;车道内MW10(尺寸为正确的).