ING2 PHD结构域对H3K4me3的识别体内对ING2功能至关重要一,所示细胞系中ING2表达的西方分析。*,内源性ING2。b条,ING2是抑制细胞周期蛋白D1表达以响应阿霉素(dox)所必需的。含或不含阿霉素(0.2μg ml)的细胞周期蛋白D1 mRNA定量PCR−1,24小时),在野生型(“WT”)、敲除(“KD”)和用ING2(“KD+ING2”)细胞系重组的敲除中。c(c),突变ING2蛋白在重组阿霉素依赖的细胞周期蛋白D1阻遏中的活性受损,如b条,相对于野生型ING2(“KD+ING2”)。在b条和c(c),误差条表示三次实验的标准偏差;P(P)-值<0.01。d-f型细胞周期蛋白D1启动子处ING2-HDAC1占用率的增加依赖于DNA损伤,需要甲基化H3K4结合。带有Flag抗体的ChIP(d日)、HDAC1(e(电子))和H4K8ac((f))在所示细胞系中的细胞周期蛋白D1启动子处,加入或不加入阿霉素(2μM,1小时)。误差条表示至少三个独立实验的标准偏差。P(P)-值<0.05。克在含有或不含有阿霉素(0.2μg ml)的指示细胞系中对细胞周期蛋白D1蛋白进行Western分析−1,24小时)。小时,ING2敲除或用H3K4me3-结合缺陷ING2重组后阿霉素敏感性受损。相对细胞活力归一化为未处理细胞。误差条表示3-6个独立实验的标准误差。