细胞生物化学功能。作者手稿；PMC 2011年12月2日提供。
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PMCID公司：项目经理3021795
NIHMSID公司：NIHMS261327号
自然幽门螺杆菌感染调节小鼠肠道巨噬细胞反应
堪萨斯州立大学生物系
将信件发送至：Sherry D.Fleming，18 Ackert Hall，Division of Biology，Kansas State University，Manhattan，KS 66506，ude.usk@nimelfds，电话：（785）532-6130，传真：（786）532-6653 摘要
幽门螺杆菌种是在易感小鼠中引起肠道炎症和疾病的常见实验室病原体。体外研究表明幽门螺杆菌产品激活巨噬细胞，我们假设在体内幽门螺杆菌感染调节C57Bl/6小鼠肠肌层巨噬细胞的炎症反应。肝螺杆菌感染增加了整个肠肌内巨噬细胞标记物F4/80、CD11b和MHC-II的表面表达。然而，尽管培养物中没有检测到细菌产物，但与未感染小鼠的巨噬细胞相比，从感染小鼠分离的巨噬细胞产生的构成性细胞因子和趋化因子显著减少。此外，感染小鼠的肌层巨噬细胞上调了FIZZ-1和SK-1基因的表达，表明巨噬细胞具有抗炎表型。与抗炎基因表达增加相对应的是，感染小鼠的巨噬细胞在LPS和IFN-γ或免疫复合物和IL-4刺激后，吞噬能力更强，但不产生细胞因子。因此幽门螺杆菌感染使肠肌层巨噬细胞成熟，调节构成性巨噬细胞反应，使其变得更具抗炎性，并对二次刺激产生抵抗力。
关键词：幽门螺杆菌、巨噬细胞、肠道、炎症、感染
介绍
一种实验室小鼠常见的肠道病原体，幽门螺杆菌感染来自世界各地商业和学术来源的85%以上的小鼠螺杆菌和H.啮齿动物作为研究相关啮齿动物中最常见的两种。21在易感小鼠中，螺杆菌导致盲肠炎症和肝炎损伤和坏死。16相反，H.啮齿动物似乎是正常肠道菌群的一部分，除非同时感染螺杆菌或沙门氏菌.19;26共同感染会加重肝炎和胆结石，并增加免疫功能受损小鼠的NO、TNF-α、IP-10、IFN-γ和IL-10基因表达。14此外，慢性、亚临床螺杆菌感染改变了对继发感染的反应柠檬酸杆菌感染。10尽管幽门螺杆菌sp.感染粘膜细胞，尚不清楚细菌或细菌产物是否在体内改变肠肌层巨噬细胞。
作为先天免疫反应的哨兵，巨噬细胞遍布全身，细菌或细菌产物激活并成熟巨噬细胞。肠道肌层内的主要常驻白细胞、巨噬细胞形成一个规则分布的网络，该网络为F4/80、CD11b和MHC II类（MHC-II）阳性。11作为对手术操作的反应，这些细胞主动分泌趋化因子和细胞因子，包括MCP-1、NO、TNF-α、IL-1β和IL-6。三;15;24作为对大肠杆菌LPS、肠肌层巨噬细胞上调环氧合酶-2，随后释放前列腺素E2（PGE2)7，并通过增加MHC II类（MHC-II）表达来调节细胞免疫。11–12然而，在慢性感染期间，巨噬细胞可能会对进一步的刺激产生抵抗力。
为了验证慢性病幽门螺杆菌感染使肠道肌层巨噬细胞成熟，变得抗炎并对二次刺激具有耐受性，我们比较了从未感染和感染小鼠获得的肌层巨噬细胞。我们证明了这一点幽门螺杆菌感染使肠肌层巨噬细胞成熟，增加F4/80、CD11b和MHC-II表面表达、特征性抗炎基因表达和吞噬作用。然而，与未感染小鼠的类似细胞相比，用LPS和IFN-γ或免疫复合物（IC）和IL-4治疗感染小鼠的肌层巨噬细胞可显著降低细胞因子反应。因此，幽门螺杆菌感染可诱导成熟的、抗炎的但吞噬性很强的巨噬细胞表型，对进一步刺激无反应。
材料和方法
老鼠
购得C57Bl/6J小鼠（缅因州巴尔港杰克逊实验室），然后在堪萨斯州立大学生物系啮齿动物设施（堪萨斯州曼哈顿）繁殖和饲养。未感染的小鼠在特定的无病原体条件下饲养(幽门螺杆菌种、小鼠肝炎病毒、小鼠微小病毒、小鼠细小病毒、仙台病毒、小鼠诺如病毒、，肺支原体、泰勒氏鼠脑脊髓炎病毒和内外寄生虫）。所有程序均由堪萨斯州立大学机构动物护理和使用委员会批准，并按照《动物福利法案》进行。
幽门螺杆菌感染
一些小鼠被自然定植螺杆菌由受感染的雌性饲养，或在正常梳洗期间接触受感染的粪便。出席者螺杆菌通过聚合酶链反应（PCR）分析每个感染小鼠的粪便进行验证（数据未显示）。根据制造商的方案，使用Qiagen DNA粪便迷你试剂盒纯化粪便DNA，并使用幽门螺杆菌特异性16s rRNA引物在54°C下进行35个周期的PCR扩增：正向5′ATG GGT AAA ATA GCA AAA AGA TTG CAA3′和反向5′CTA TTT CAT ATC CAT AAG CTC TTG AGA ATC3′。PCR产物使用AlphaImager（Alpha Innotech）成像，并使用Image J（美国国立卫生研究院）进行半定量分析。每只小鼠在治疗前至少感染4至8周。用PCR对未感染小鼠的粪便进行分析，结果为100%阴性。根据制造商的方案，用TRIzol纯化肝脏、盲肠和结肠DNA，并进行类似的PCR分析。初步数据表明，感染后1至2个月内，脱落细菌数量保持不变（数据未显示）。此外，螺杆菌在所有感染小鼠的肝脏、盲肠和结肠中也可以检测到DNA。
免疫组织化学
在4°C下添加纯化或生物素标记的初级F4/80、CD11b、MHC-II（eBioscience）或IL-6（Biolegend）抗体过夜之前，用10%血清（Jackson ImmunoResearch）阻断丙酮固定的全肠肌肉支架或甲醇固定的细胞胞旋。冲洗载玻片，并用荧光共轭二级抗体（Jackson ImmunoResearch）或荧光链霉亲和素孵育。荧光在配备CoolSnap CF相机（光度学）的尼康日食80i显微镜上进行可视化，并使用Metavue软件（分子器件）进行分析。使用图像J（NIH）量化相对染色强度，将同型控制阈值设置为零，并测量总阳性面积。
巨噬细胞的分离和组织培养
使用改编自Kalff等人的方法，从2-4月龄未感染或感染小鼠中分离出肠道巨噬细胞。8空肠和回肠被冷钙冲洗2+和镁2+免费HBSS（Cellgro）。将无肠系膜肌层从粘膜上沿圆周剥离，并在37°C的Ca中消化2+和镁2+含有1 mg/ml胶原酶（沃辛顿）并添加0.4 mM CaCl的游离HBSS2（联合化学公司）。将洗净的颗粒置于含有5%FBS（亚特兰大生物制品）、5%NuSerum（BD Biosciences）、10%OptiMEM（Gibco）、5 ng/ml重组小鼠M-CSF（R&D Systems）、1%L-谷氨酰胺（Gibco）、100 U/ml青霉素G、100μG/ml链霉素和50μG/ml庆大霉素2移除非粘附细胞，将剩余细胞培养在新鲜培养基中。来自未感染或感染小鼠的培养巨噬细胞未检测到幽门螺杆菌DNA，无论感染状态如何，根据鲎Amoebocytelysate试验（Hycult Biotechnology）测定，未刺激上清液中LPS含量<18pg/ml。
刺激和分泌物
分离后立即刺激2-4只小鼠的分离巨噬细胞，或在刺激前6天进行培养。用30 U/ml IFN-γ（Sigma）或100 U/ml IL-4（Antigenix）刺激一些巨噬细胞培养18–20小时，然后用10μg/ml的IFN-γ刺激18–20个小时大肠杆菌如前所述制备的LPS O55:B5（Sigma）或150μg/ml IgG调理卵清蛋白免疫复合物（IC）。4通过剂量反应确定最佳浓度。收集无细胞上清液并将其储存在−80°C下。使用Milliplex试剂盒（Millipore）检测上清中的IL-6、角质细胞衍生细胞因子（KC）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和TNF-α的生成。在Luminex100机器上读取平板，并使用MasterPlex QT软件（MiraiBio）分析结果。
RNA分离、cDNA合成和PCR
从0.5–1×10中分离出总RNA6根据制造商的说明，使用Superscript III第一链合成试剂盒（Invitrogen）合成带有TRIzol试剂（Invit罗gen）和cDNA的巨噬细胞。使用来自Integrated DNA Technologies的以下引物进行PCR：FIZZ-1（Fwd 5′TCC AGC TGA TGG TCC CAG TGA ATA 3′，Rev 5′AAG CTG GGT TCT CCA CCT CTT CAT 3′）、SK-1（Fwd 5′ATG GTC TGA ATG AGG TGG TGA 3′，版本5′ACC ACA GTC CAA TGA GAA GGC ACT 3′），Ym-1（Fwd 5′TTC CAA GGC TGC TAC TCA CTT CCA 3′，Rev 5′AGA CCA CGG CAC CTC CTA AAT TGT 3′）和GAPDH（Fwd 5′CCA TGG AGA AGG CCG GGG 3′，Rev 5′CAA AGT TGT CAT GGA TGA CC 3′）。对产物进行电泳，并使用图像J量化相对带强度，然后归一化为GAPDH。
吞噬作用
培养的巨噬细胞和FITC-结合酵母菌在Ca中孵育（每个细胞10粒）2+和镁2+含有5%正常小鼠血清的游离HBSS在37°C下旋转20分钟，然后进行胰蛋白酶化以去除外部酵母菌。在制备胞浆后，如上所述对荧光进行可视化和分析。计算大于100个细胞/玻片的吞噬百分比（摄入至少1个颗粒的细胞/得分的细胞总数）和摄入颗粒的平均数量（摄入的颗粒总数/100个细胞得分）。
统计
使用Prism4（GraphPad软件）进行的学生t检验确定了统计显著性；p<0.05。
结果
幽门螺杆菌在感染小鼠的粪便中检测到DNA，但在巨噬细胞肌层中检测不到
出席者幽门螺杆菌通过PCR建立感染小鼠幽门螺杆菌粪便样本和分离巨噬细胞中的16S rRNA基因，并与已知阳性对照进行比较。所有受感染小鼠的粪便样本均含有幽门螺杆菌将DNA与已知感染对照进行比较（数据未显示）。相反，幽门螺杆菌从感染小鼠分离的巨噬细胞中未检测到DNA。此外，没有幽门螺杆菌在这些研究中使用的未感染小鼠的粪便样本或巨噬细胞中检测到DNA（数据未显示）。鲎变形虫细胞裂解物试验确定，未感染和感染小鼠的培养上清液中同样存在少量LPS（<18pg/ml）。因此，来自感染小鼠的巨噬细胞培养物不含可检测的细菌DNA，LPS水平与来自未感染小鼠的巨噬细胞培养物相似。
幽门螺杆菌感染增加巨噬细胞表面标志物的表达
幽门螺杆菌体外刺激巨噬细胞活化5;22但不知道是否幽门螺杆菌感染会刺激体内肠道肌肉中的巨噬细胞网络。确定是否幽门螺杆菌感染改变了肠肌层巨噬细胞的成熟度，分析了F4/80、CD11b和MHC-II在整个肠肌中的表面表达。如所示F4/80、CD11b和MHC-II在感染小鼠肌层中的星状巨噬细胞网络比未感染小鼠染色更为强烈(). 荧光染色定量显示，感染小鼠的巨噬细胞表达的F4/80比未感染小鼠的多3倍，CD11b表达的多20倍，MHC-II表达的多5倍(). 虽然染色更强烈，但染色细胞的平均数量并没有随着感染而改变(). 与其他肠道巨噬细胞类似，18TLR4在感染或未感染小鼠的肌层巨噬细胞中均未表达（数据未显示）。
幽门螺杆菌感染增加肠肌层巨噬细胞F4/80、CD11b和MHC-II的表达用F4/80、CD11b、MHC-II或适当的同型对照物对未感染或感染小鼠的整个肠肌进行染色。显示了具有代表性的部分（A），并量化了未感染（□）或感染（■）小鼠显微照片的相对荧光（B）。使用未感染（□）或感染（■）小鼠（C）的肌肉显微照片计算每个场（200x）F4/80阳性细胞的平均数量。显微照片（200X）是3-4个实验的代表性照片，每个实验分析4-6张代表性照片*感染者与未感染者相比p<0.05。
幽门螺杆菌感染降低了肌层巨噬细胞合成细胞因子
未经处理的肌层巨噬细胞表达IL-69而且很可能幽门螺杆菌与未感染小鼠的巨噬细胞相比，分泌物增加。体外组织学检查时，IL-6分泌与F4/80共定位+未感染小鼠肠肌中的巨噬细胞，但在幽门螺杆菌受感染的小鼠(). 在培养24小时后，对分离的肌层巨噬细胞产生的细胞因子进行定量。感染和未感染小鼠的培养巨噬细胞均产生IL-6。与组织学结果类似，巨噬细胞来自幽门螺杆菌感染小鼠分泌的IL-6明显低于未感染小鼠，表明感染改变了巨噬细胞表型().
IL-6与未感染但未感染的巨噬细胞共定位幽门螺杆菌-受感染的小鼠用F4/80（绿色）、IL-6（红色）、F4/80和IL-6或适当的同型对照物对从未感染或感染小鼠分离的代表性整批肠肌进行染色。F4/80和IL-6表达的共定位用橙色表示。显微照片（200X）是3-4个实验的代表性照片，每个实验分析4-6张代表性照片。
幽门螺杆菌感染降低肠肌层巨噬细胞合成细胞因子和趋化因子的产生从未感染（□）或幽门螺杆菌-感染（■）小鼠在不刺激（Unstim）的情况下培养36小时，用IFN-γ和LPS（LPS）或IL-4和IC（IC）培养。测定上清液中IL-6（A）、MCP-1（B）、KC（C）和TNF（D）的生成。每个条形代表测量重复上清液的4-8个独立实验的平均值*感染组与未感染组相比p<0.05，未刺激组与刺激组相比p<0.05。
然后我们测量了肠肌层巨噬细胞典型表达的额外细胞因子和趋化因子(). 从未感染小鼠培养的巨噬细胞产生高浓度MCP-1和KC，低水平TNF-α().幽门螺杆菌感染导致所测量的所有细胞因子的产生减少。尽管LPS和IFN-γ处理的骨髓巨噬细胞中检测到IL-10或IL-12p70，但用ELISA或Milliplex检测时，未感染或感染小鼠的肠肌层巨噬细胞未组成性表达IL-10或IL-12p70（数据未显示）。这些数据表明幽门螺杆菌感染降低了肠平滑肌巨噬细胞的细胞因子和趋化因子的组成性生成。
少量炎性细胞因子表明，感染小鼠的巨噬细胞成熟为抗炎巨噬细胞，因此会增加抗炎基因的表达，如在炎症区-1（FIZZ-1）、鞘氨醇激酶-1（SK-1）和Ym-1。4;23与未感染小鼠的类似巨噬细胞相比，GAPDH正常化后，感染小鼠巨噬细胞中FIZZ-1和SK-1基因表达显著升高().
幽门螺杆菌感染增加肠肌巨噬细胞的某些基因表达从肠肌巨噬细胞中分离出总RNA，并通过RT-PCR测定FIZZ-1、SK-1、Ym-1和GAPDH转录物的水平。未感染（□）或幽门螺杆菌-感染（■）的小鼠被归为GAPDH。n=4-8个实验/组，感染组与未感染组相比p<0.05。
来自幽门螺杆菌-受感染的小鼠对刺激不敏感
前炎性巨噬细胞对细菌脂多糖和干扰素γ治疗产生反应。因此，慢性病的存在幽门螺杆菌感染表明巨噬细胞可能对进一步刺激具有耐受性。为了验证这一假设，我们测量了刺激后未感染或感染小鼠离体肠肌层巨噬细胞产生的细胞因子和趋化因子。LPS和IFN-γ对未感染小鼠巨噬细胞的治疗导致TNF-α的释放显著增加(). 相比之下，来自感染小鼠的类似处理的巨噬细胞分泌的每种细胞因子数量都很低，与来自相同小鼠的未刺激巨噬细胞没有显著差异(). 仅用LPS刺激其他对照细胞，结果相似。
免疫复合物（IC）和IL-4刺激抗炎巨噬细胞。4未感染小鼠的巨噬细胞对IC和IL-4的刺激没有反应。然而，在IC和IL-4刺激后，感染小鼠的肌层巨噬细胞也没有显著增加任何测得的细胞因子(). 仅用IC刺激其他对照细胞，结果相似。
培养7天不会改变肌层巨噬细胞产生的细胞因子或趋化因子
由于第0天的培养物不是100%的巨噬细胞，其他类型的细胞可能会分泌细胞因子，因此我们在M-CSF中培养了从肠肌分离出来的巨噬细胞7天。第7天，培养细胞F4/80和/或CD11b染色阳性(). 与整个肠肌群相似，从感染小鼠分离的巨噬细胞在这两种标记物上的染色程度均高于未感染小鼠(). 因此幽门螺杆菌-培养7天后，F4/80和CD11b表达的诱导增加仍然存在。
巨噬细胞培养自幽门螺杆菌-感染小鼠表达F4/80和CD11b从未感染或感染小鼠的肠道肌肉中分离出巨噬细胞，并在含有M-CSF的培养基中培养7天，然后对F4/80或CD11b表达（绿色）和DAPI进行染色以显示细胞核（蓝色）。显微照片（400X）是3-4个实验的代表性照片，每个实验分析4-6张代表性照片。
为了验证第0天的分泌物是由巨噬细胞产生的，我们在培养7天后测量了巨噬细胞产生的细胞因子和趋化因子。与第0天相似，与未感染小鼠相比，感染小鼠的巨噬细胞在第7天分泌的IL-6、MCP-1和KC浓度显著降低(). 尽管在M-CSF培养7天后，总体分泌模式保持不变，但与未感染小鼠相比，感染小鼠巨噬细胞中TNF-α的组成性生成并未减少(). 与体外立即刺激细胞因子表达类似，感染小鼠培养的巨噬细胞在LPS和IFN-γ或IC和IL-4刺激后分泌的IL-6、MCP-1、KC和TNF-α浓度显著低于未感染小鼠的巨噬细胞().
肠肌层巨噬细胞培养自幽门螺杆菌-受感染的小鼠对刺激没有反应从未感染（□）或幽门螺杆菌-感染（■）小鼠在无刺激（Unstim）或有IFN-γ和LPS（LPS）或IC和IL-4（IC）刺激前6天在M-CSF中培养。测定上清液中IL-6（A）、MCP-1（B）、KC（C）和TNF（D）的产生，每个条代表4-8个测量重复上清液的独立实验的平均值*感染组与未感染组相比p<0.05，未刺激组与刺激组相比p<0.05。
感染小鼠培养的巨噬细胞吞噬能力增强
肠肌层巨噬细胞是吞噬性的。17我们测试了以下假设：螺杆菌感染小鼠通过用荧光酵母多糖颗粒培养未感染或感染小鼠的巨噬细胞来保持吞噬活性。70%以上的细胞吞噬酶原，感染小鼠的巨噬细胞的吞噬能力几乎是未感染小鼠的三倍(). 感染小鼠的巨噬细胞每细胞摄取的酵母菌多5倍（1.87±0.24，而0.31±0.16）。因此，幽门螺杆菌感染可增加肠肌层巨噬细胞的吞噬能力，并在培养中维持1wk。
巨噬细胞培养自幽门螺杆菌-受感染的小鼠吞噬能力更强从未感染（□）或幽门螺杆菌-感染（■）小鼠在M-CSF中培养7天。在37°C下用荧光酵母多糖颗粒培养细胞20分钟，然后用胰蛋白酶处理以去除外部结合颗粒。制备细胞蛋白，拍照，并对每片≥100个细胞进行评分，以确定吞噬率（A）。显微照片（400X）代表了从未感染（B）或感染（C）小鼠中分离的巨噬细胞。n=3-4个实验/组，感染组与未感染组相比p<0.05。
讨论
幽门螺杆菌啮齿动物群落中的感染很普遍。虽然最初被认为是共生细菌，但未被发现幽门螺杆菌野生型小鼠感染可诱导肠肌层巨噬细胞成熟为抗炎表型，并增加这些细胞的吞噬能力。此外，螺杆菌感染下调炎症介质的组成性分泌，并阻止巨噬细胞对体外二次刺激作出反应。这些数据支持我们的假设：幽门螺杆菌感染调节肠肌层巨噬细胞的构成性炎症反应，并诱导对二次刺激的耐受性，尽管缺乏细菌DNA或LPS。
与以往研究相对应8;11;15，我们观察到肠肌层巨噬细胞表达低水平的成熟巨噬细胞标记物F4/80、CD11b和MHC II类。与之前的研究相关，手术操作在隔离后立即提高了细胞因子的产生（REFS）。目前的数据表明，这些细胞不能被进一步刺激。然而，在培养6天后，操纵效应消失，允许刺激巨噬细胞。幽门螺杆菌感染似乎通过成熟的肌层-巨噬细胞群来调节先天免疫反应。亚临床小鼠的表面标记物显著增加幽门螺杆菌感染。肠肌层巨噬细胞细胞表面标记物的表达增加与腹腔注射LPS后大鼠ED2和iNOS表达增加相似。6此外，感染后肌层巨噬细胞表达增加的FIZZ-1和SK-1 mRNA。FIZZ-1和SK-1基因表达增加表明，感染小鼠的巨噬细胞正在成熟，成为抗炎替代巨噬细胞，而不是典型的促炎巨噬细胞。总之，这些数据表明肌层巨噬细胞通常处于静止状态，并且在4至8周后处于静止状态幽门螺杆菌感染后巨噬细胞成熟为抗炎表型。
亚临床条件下肌层巨噬细胞群的成熟幽门螺杆菌感染伴随着构成性巨噬细胞细胞因子和趋化因子生成的减少。先前的体外研究表明螺杆菌抑制LPS刺激的骨髓源巨噬细胞产生IL-12p40。22这些结果并不是巨噬细胞所独有的，因为在体外用两种药物刺激小鼠肠上皮细胞系螺杆菌与对照组相比，纯化LPS或产生的全裂解物显著降低MIP-2和TNF-α的分泌大肠杆菌液化石油气。20此外螺杆菌LPS与任一大肠杆菌LPS或沙门氏菌鞭毛蛋白下调肠上皮细胞的细胞因子和趋化因子反应。然而，这些体外研究并没有发现上皮细胞对随后的刺激具有内毒素耐受性。20相反，我们发现感染小鼠的巨噬细胞对进一步的体外刺激没有反应大肠杆菌LPS和IFN-γ或IC和IL-4，即使在培养1周后。对次级刺激缺乏反应具有临床意义，类似于亚临床幽门螺杆菌感染延迟清除柠檬酸杆菌减少细胞因子的产生。10一项类似的研究表明，蠕虫感染延迟了柠檬酸杆菌伴有替代巨噬细胞浸润的感染。25
尽管细胞因子和趋化因子的产生受到抑制，但我们证明，术后肠肌层中的巨噬细胞对酵母多糖颗粒的吞噬能力是术后的三倍幽门螺杆菌感染。免疫性血小板减少性紫癜患者的血单核细胞吞噬功能也有类似的增加幽门螺杆菌与没有幽门螺杆菌感染。2肠肌层巨噬细胞的功能研究通常使用小Fitc-右旋糖酐8;13;15;17可以通过内吞或吞噬来吸收。相反，大的酵母菌多糖颗粒必须被吞噬，类似于大的坏死细胞碎片。在骨骼肌巨噬细胞中，吞噬作用将促炎的巨噬细胞亚群转换为抗炎表型。1这表明幽门螺杆菌感染激活肌层巨噬细胞，增加大颗粒的吞噬作用，与抗炎表型相关。
曾被认为是共生细菌，亚临床幽门螺杆菌即使在肠道组织中检测不到细菌DNA，感染也会改变肠道肌层巨噬细胞的反应。尽管机制尚不清楚，但这些细胞似乎成熟为抗炎巨噬细胞，不再对第二次体外刺激作出反应。因此，为了应对随后的感染、损伤或实验挑战，亚临床幽门螺杆菌感染可能影响研究结果，也可能影响临床治疗。
鸣谢
这项工作得到了SDF的以下拨款的支持：NIH拨款AI061691和NCRR的机构发展奖（IDeA）计划拨款P20 RR017686和P20RR016475，以及特里·约翰逊癌症研究中心。本材料中表达的任何意见、发现、结论或建议均为作者的意见、发现和结论或建议，并不一定反映国家卫生研究所的观点。
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1Arnold L、Henry A、Poron F、Baba-Amer Y、van Rooijen N、Plonquet A、Gherardi RK、Chazaud B。骨骼肌损伤后募集的炎性单核细胞转变为抗炎巨噬细胞以支持肌生成。《实验医学杂志》。2007;204:1057–1069. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 2朝日社A、西本社T、冈崎社Y、铃木社H、Masaoka社T、川上社Y、池田社Y、久旺社M。幽门螺杆菌在免疫性血小板减少性紫癜患者中，根除使单核细胞Fcgamma受体平衡向抑制性FcgamaRIIB转变。临床投资杂志。2008;118:2939–2949. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 三。鲍尔AJ。提及胃肠动力的免疫调节。神经胃肠和莫替尔。2008;20（补充1）：81–90。[公共医学][谷歌学者] 4.Edwards JP，Zhang X，Frauwirth KA，Mosser DM。三种活化巨噬细胞群的生化和功能特征。白细胞生物学杂志。2006;80:1298–1307. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 5Erdman SE、Rao VP、Poutahidis T、Rogers AB、Taylor CL、Jackson EA、Ge Z、Lee CW、Schauer DB、Wogan GN、Tannenbaum SR、Fox JG。一氧化氮和TNF-α触发肝螺杆菌感染的Rag2缺陷小鼠的结肠炎症和致癌。美国国家科学院院刊。2009;106:1027–1032. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 6Eskandari MK、Kalff JC、Billiar TR、Lee KKW、Baure AJ。LPS诱导的肌层巨噬细胞一氧化氮抑制大鼠空肠环肌活动。美国生理学杂志《细胞生理学》。1999;277：G478–G486。[公共医学][谷歌学者] 7Hori M、Kita M、Torihashi S、Miyamoto S、Won K-J、Sato K、Ozaki H、Karaki H。受LPS刺激的大鼠肠道肌层常驻巨噬细胞中COX-2上调iNOS。美国生理学杂志。2001;280:930–938.[公共医学][谷歌学者] 8Kalff JC、Schwarz NT、Walgenbach KJ、Schraut WH、Bauer AJ。肠肌层白细胞的表型和分离。白细胞生物学杂志。1998;63:683–691.[公共医学][谷歌学者] 9Kalff JC、Turler A、Schwarz NT、Schraut WH、Lee KK、Tweardy DJ、Billar TR、Simmons RL、Bauer AJ。剖腹手术期间人体外肌层内局部炎症反应的腹腔内激活。安·苏格。2003;237:301–315. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 10McBee ME、Zheng PZ、Rogers AB、Fox JG、Schauer DB。持续性细菌感染对急性腹泻疾病的调节作用。感染免疫。2008 [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 11米克尔森HB。哺乳动物肠道外肌层中的巨噬细胞。组织病理学。1995;10:719–736.[公共医学][谷歌学者] 12Mikkelsen HB，Larsen JO，Hadberg H。炎症期间肠外肌层中的巨噬细胞系统：骨质疏松小鼠的免疫组织化学和定量研究。组织化学细胞生物学。2008[公共医学][谷歌学者] 13.Mikkelsen HB、Mirsky R、Jessen KR、Thuneberg L.小鼠小肠外肌层中的巨噬细胞样细胞：F4/80、M1/70和Ia-抗原的免疫组织化学定位。细胞组织研究。1988;252:301–306.[公共医学][谷歌学者] 14Myles MH，Livingston RS，Franklin CL.啮齿动物螺杆菌在A/JCr和SCID小鼠中的致病性。比较医学。2004;54:549–557.[公共医学][谷歌学者] 15.Ozaki H、Kawai T、Shuttleworth CW、Won KJ、Suzuki T、Sato K、Horiguchi H、Hori M、Karaki H、Torihashi S、Ward SM、Sanders KM。小鼠小肠平滑肌层常驻巨噬细胞的分离和表征。神经胃肠和莫替尔。2004;16:39–51.[公共医学][谷歌学者] 16罗杰斯AB，福克斯JG。炎症和癌症。感染性胃肠道和肝癌的啮齿动物模型。美国生理学杂志。2004;286：G361-366。[公共医学][谷歌学者] 17Sato K、Torihashi S、Hori M、Nasu T、Ozaki H。肌层常驻巨噬细胞的吞噬细胞激活抑制大鼠回肠平滑肌收缩。兽医医学杂志。2007;69:1053–1060.[公共医学][谷歌学者] 18Schenk M，Mueller C.肠道巨噬细胞对富含抗原环境的适应。Semin免疫。2007;19:84–93.[公共医学][谷歌学者] 19Shen Z、Fox JG、Dewhirst FE、Paster BJ、Foltz CJ、Yan L、Shames B、Perry L。啮齿动物螺杆菌sp.nov.，一种从实验室小鼠中分离出的尿素酶阴性幽门螺杆菌。国际系统细菌学杂志。1997;47:627–634.[公共医学][谷歌学者] 20Sterzenbach T，Lee SK，Brenneke B，von Goetz F，Schauer DB，Fox JG，Suerbaum S，Josenhans C.肠肝抑制作用肝螺杆菌对小鼠肠上皮细胞天然免疫反应的影响。感染免疫。2007;75:2717–2728. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 21Taylor NS、Xu S、Nambiar P、Dewhirst FE、Fox JG。来自亚洲、欧洲和北美的商业和学术机构的小鼠中普遍存在肠肝幽门螺杆菌。临床微生物学杂志。2007;45:2166–2172. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 22Tomczak MF、Gadjeva M、Wang YY、Brown K、Maroulakou I、Tsichlis PN、Erdman SE、Fox JG、Horwitz BH。缺乏NF-kappaB p50/p105亚单位的巨噬细胞中ERK的缺陷激活是导致肝螺杆菌攻击后观察到IL-12 p40表达升高的原因。免疫学杂志。2006;176:1244–1251.[公共医学][谷歌学者] 23Verreck一汽、Boer T、Langenberg DML、Zaden L、Ottenhoff THM。人类炎症前1型和炎症后2型巨噬细胞对微生物抗原和IFN-γ-和CD40L介导的共刺激反应的表型和功能分析。白细胞生物学杂志。2006;79:285–293.[公共医学][谷歌学者] 24Wehner S、Behrendt FF、Lyutenski BN、Lysoon M、Bauer AJ、Himer A、Kalff JC。巨噬细胞功能的抑制可预防啮齿类动物的肠道炎症和术后肠梗阻。内脏。2007;56:176–185. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 25Weng M，Huntley D，Huang IF，Foye-Jackson O，Wang L，Sarkisian A，Zhou Q，Walker WA，Cherayil BJ，Shi HN。肠道蠕虫感染中选择性激活巨噬细胞：对并发细菌性结肠炎的影响。免疫学杂志。2007;179:4721–4731. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者] 26Zenner L.啮齿动物幽门螺杆菌感染的病理学、诊断和流行病学。复合免疫微生物感染病。1999;22:41–61.[公共医学][谷歌学者] 
