图4

丙酸诱导的AMPK信号激活与线粒体缺陷诱导的细胞ATP耗竭和氧化应激有关。(一)HCT116细胞用丙酸盐（3 mM）处理指定时间。使用CellTiter-Glo发光细胞活性测定试剂盒测量细胞内ATP水平。条形代表平均值±S。E.公司(n个=4). (b条)HCT116细胞用丙酸盐（0，1，3，10 mM）处理指定时间，并用JC-1进行流式细胞术染色。红色荧光（FL-2（R3））降低的细胞数量显著增加，表明Δψ（i） ●●●●。极化细胞的百分比与去极化Δψ以条形图（ii）表示。条形代表平均值±S。E.公司(n个=3). (c（c）)线粒体同时用MitoTracker深红色和MitoTracher绿色FM染色，并用流式细胞术测定染色强度(我和ii（ii）)，平均荧光显示在条形图中(三). 条形代表平均值±S。E.公司(n个=3). (d日)HCT116细胞在没有或存在环孢菌素A（CsA，2μM）的情况下用丙酸盐（3 mM）处理24 h，然后用钙黄绿素-AM、氯化钴对细胞进行染色₂和MitoTracker Red。通过荧光显微镜获得了具有代表性的图像。放大倍数，×600。(e（电子）)丙酸盐处理的细胞用MitoTracker深红色和钙黄绿素AM染色。用流式细胞术分析染色强度(我)并以条形图的形式显示(ii（ii）). 条形代表平均值±S。E.公司(n个=3). (如果)HCT116细胞在有或无N-乙酰半胱氨酸（NAC）（1 mM）的情况下用丙酸盐（3 mM）处理24 h，细胞用羧基-h染色₂用于ROS检测的DCFDA和代表性图像通过荧光显微镜获得。放大倍数，×100。(克)用流式细胞术分析羧基-DCF荧光。(小时)用丙酸盐（0，1，3，10 mM）处理HCT116细胞48 h。细胞用羧基-h染色₂DCFDA和MitoTracker深红色。用流式细胞术分析荧光强度。羧基H增强的细胞百分比₂DCFDA和减少的MitoTracker深红色染色显示为条形图。条形代表平均值±S。E.公司(n个=3)